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NapsinA基因治疗肺纤维化的体外实验研究及作用机制探讨

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-18页
第一章 绪论第18-39页
   ·肺纤维化概述第18页
   ·肺的解剖及超微结构第18-20页
     ·肺实质—肺泡第19页
     ·肺间质—肺泡隔第19-20页
   ·肺纤维化病理第20-21页
   ·肺纤维化发病机制第21-23页
     ·经典的的发病机制第21-22页
     ·肺纤维化发病机制新观点第22-23页
   ·肺纤维化治疗现状第23-25页
   ·基因治疗与肺纤维化第25-27页
   ·基因治疗与载体第27-29页
     ·慢病毒的一般生物学特性第27-28页
     ·慢病毒载体第28页
     ·慢病毒载体的特点第28-29页
   ·Napsin A基因与蛋白第29-31页
     ·Napsin A基因及蛋白的结构第29页
     ·Napsin A在人体内不同组织的表达第29页
     ·Napsin A的生理功能第29-30页
     ·Napsin A研究进展第30-31页
     ·Napsin A临床意义第31页
   ·本研究的目的和立题依据第31-33页
     ·研究目的第31-32页
     ·选择构建体外肺纤维化模型的依据第32页
     ·选择Napsin A基因的依据第32-33页
     ·选择A549细胞的依据第33页
   ·研究内容与技术路线第33-35页
     ·本研究的主要内容第33页
     ·本研究的技术路线第33-35页
 参考文献第35-39页
第二章 构建体外肺纤维化模型并鉴定第39-59页
   ·材料与方法第39-47页
     ·标本来源第39页
     ·主要仪器和试剂第39-42页
     ·实验步骤第42-47页
     ·统计学方法第47页
   ·结果第47-53页
     ·建模所需TGF-β1的最佳浓度第47-48页
     ·确定建模所需时间第48-49页
     ·体外肺纤维化模型鉴定结果第49-53页
   ·讨论第53-57页
 参考文献第57-59页
第三章 稳定转染Napsin A基因细胞系的构建与鉴定第59-81页
   ·材料与方法第59-68页
     ·标本来源第59页
     ·主要仪器和试剂第59-61页
     ·实验步骤第61-68页
     ·统计学方法第68页
   ·结果第68-75页
     ·Napsin A PCR扩增产物鉴定第68-69页
     ·Napsin A PCR扩增反应液产物鉴定第69页
     ·Napsin A PCR纯化产物酶切鉴定第69页
     ·Napsin A酶切产物切胶纯化液鉴定第69-70页
     ·载体质粒PLJM1酶切鉴定第70页
     ·Napsin A-PLJM1菌液PCR鉴定第70-71页
     ·阳性克隆质粒抽提鉴定第71页
     ·质粒测序第71-73页
     ·Napsin A mRNA和蛋白在A549细胞中的表达结果第73-75页
   ·讨论第75-79页
     ·关于目的基因的选择第75-77页
     ·关于载体的选择第77-78页
     ·关于宿主细胞的选择第78-79页
 参考文献第79-81页
第四章 Napsin A基因对细胞增殖能力的影响研究第81-91页
   ·材料与方法第81-84页
     ·标本来源第81页
     ·主要仪器和试剂第81-82页
     ·实验步骤第82-83页
     ·统计学方法第83-84页
   ·结果第84-88页
     ·细胞生长曲线第84-85页
     ·细胞周期第85页
     ·瘤体生长曲线及抑瘤率第85-86页
     ·瘤体病理第86-87页
     ·Napsin A mRNA和蛋白在瘤体中的表达第87-88页
   ·讨论第88-90页
 参考文献第90-91页
第五章 Napsin A基因对细胞EMT的影响研究第91-105页
   ·材料与方法第91-93页
     ·标本来源第91页
     ·主要仪器和试剂第91页
     ·实验步骤第91-93页
     ·统计学方法第93页
   ·结果第93-102页
     ·细胞形态学第93-95页
     ·六组细胞Napsin A mRNA和蛋白的表达第95-97页
     ·六组细胞上皮标志E-钙蛋白mRNA和蛋白的表达第97-99页
     ·六组细胞间质标志纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达第99-102页
   ·讨论第102-103页
 参考文献第103-105页
第六章 Napsin A影响细胞增殖和EMT的机制研究第105-110页
   ·材料与方法第105-106页
     ·标本来源第105页
     ·主要仪器和试剂第105页
     ·实验步骤第105-106页
     ·统计学方法第106页
   ·结果第106-107页
     ·体外肺纤维化模型第106页
     ·六组细胞FAK蛋白的表达第106-107页
   ·讨论第107-109页
 参考文献第109-110页
第七章 主要结论及展望第110-111页
   ·主要结论第110页
   ·创新性第110页
   ·展望第110-111页
综述一:特发性肺纤维化治疗药物新进展第111-118页
 参考文献第115-118页
综述二:肺纤维化中肺内细胞参与机制研究进展第118-124页
 参考文献第122-124页
英文缩略表第124-126页
致谢第126-127页
在读期间已发表和待发表的论文第127页

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