摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-18页 |
第一章 绪论 | 第18-39页 |
·肺纤维化概述 | 第18页 |
·肺的解剖及超微结构 | 第18-20页 |
·肺实质—肺泡 | 第19页 |
·肺间质—肺泡隔 | 第19-20页 |
·肺纤维化病理 | 第20-21页 |
·肺纤维化发病机制 | 第21-23页 |
·经典的的发病机制 | 第21-22页 |
·肺纤维化发病机制新观点 | 第22-23页 |
·肺纤维化治疗现状 | 第23-25页 |
·基因治疗与肺纤维化 | 第25-27页 |
·基因治疗与载体 | 第27-29页 |
·慢病毒的一般生物学特性 | 第27-28页 |
·慢病毒载体 | 第28页 |
·慢病毒载体的特点 | 第28-29页 |
·Napsin A基因与蛋白 | 第29-31页 |
·Napsin A基因及蛋白的结构 | 第29页 |
·Napsin A在人体内不同组织的表达 | 第29页 |
·Napsin A的生理功能 | 第29-30页 |
·Napsin A研究进展 | 第30-31页 |
·Napsin A临床意义 | 第31页 |
·本研究的目的和立题依据 | 第31-33页 |
·研究目的 | 第31-32页 |
·选择构建体外肺纤维化模型的依据 | 第32页 |
·选择Napsin A基因的依据 | 第32-33页 |
·选择A549细胞的依据 | 第33页 |
·研究内容与技术路线 | 第33-35页 |
·本研究的主要内容 | 第33页 |
·本研究的技术路线 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
第二章 构建体外肺纤维化模型并鉴定 | 第39-59页 |
·材料与方法 | 第39-47页 |
·标本来源 | 第39页 |
·主要仪器和试剂 | 第39-42页 |
·实验步骤 | 第42-47页 |
·统计学方法 | 第47页 |
·结果 | 第47-53页 |
·建模所需TGF-β1的最佳浓度 | 第47-48页 |
·确定建模所需时间 | 第48-49页 |
·体外肺纤维化模型鉴定结果 | 第49-53页 |
·讨论 | 第53-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
第三章 稳定转染Napsin A基因细胞系的构建与鉴定 | 第59-81页 |
·材料与方法 | 第59-68页 |
·标本来源 | 第59页 |
·主要仪器和试剂 | 第59-61页 |
·实验步骤 | 第61-68页 |
·统计学方法 | 第68页 |
·结果 | 第68-75页 |
·Napsin A PCR扩增产物鉴定 | 第68-69页 |
·Napsin A PCR扩增反应液产物鉴定 | 第69页 |
·Napsin A PCR纯化产物酶切鉴定 | 第69页 |
·Napsin A酶切产物切胶纯化液鉴定 | 第69-70页 |
·载体质粒PLJM1酶切鉴定 | 第70页 |
·Napsin A-PLJM1菌液PCR鉴定 | 第70-71页 |
·阳性克隆质粒抽提鉴定 | 第71页 |
·质粒测序 | 第71-73页 |
·Napsin A mRNA和蛋白在A549细胞中的表达结果 | 第73-75页 |
·讨论 | 第75-79页 |
·关于目的基因的选择 | 第75-77页 |
·关于载体的选择 | 第77-78页 |
·关于宿主细胞的选择 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-81页 |
第四章 Napsin A基因对细胞增殖能力的影响研究 | 第81-91页 |
·材料与方法 | 第81-84页 |
·标本来源 | 第81页 |
·主要仪器和试剂 | 第81-82页 |
·实验步骤 | 第82-83页 |
·统计学方法 | 第83-84页 |
·结果 | 第84-88页 |
·细胞生长曲线 | 第84-85页 |
·细胞周期 | 第85页 |
·瘤体生长曲线及抑瘤率 | 第85-86页 |
·瘤体病理 | 第86-87页 |
·Napsin A mRNA和蛋白在瘤体中的表达 | 第87-88页 |
·讨论 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-91页 |
第五章 Napsin A基因对细胞EMT的影响研究 | 第91-105页 |
·材料与方法 | 第91-93页 |
·标本来源 | 第91页 |
·主要仪器和试剂 | 第91页 |
·实验步骤 | 第91-93页 |
·统计学方法 | 第93页 |
·结果 | 第93-102页 |
·细胞形态学 | 第93-95页 |
·六组细胞Napsin A mRNA和蛋白的表达 | 第95-97页 |
·六组细胞上皮标志E-钙蛋白mRNA和蛋白的表达 | 第97-99页 |
·六组细胞间质标志纤维连接蛋白和Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达 | 第99-102页 |
·讨论 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-105页 |
第六章 Napsin A影响细胞增殖和EMT的机制研究 | 第105-110页 |
·材料与方法 | 第105-106页 |
·标本来源 | 第105页 |
·主要仪器和试剂 | 第105页 |
·实验步骤 | 第105-106页 |
·统计学方法 | 第106页 |
·结果 | 第106-107页 |
·体外肺纤维化模型 | 第106页 |
·六组细胞FAK蛋白的表达 | 第106-107页 |
·讨论 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-110页 |
第七章 主要结论及展望 | 第110-111页 |
·主要结论 | 第110页 |
·创新性 | 第110页 |
·展望 | 第110-111页 |
综述一:特发性肺纤维化治疗药物新进展 | 第111-118页 |
参考文献 | 第115-118页 |
综述二:肺纤维化中肺内细胞参与机制研究进展 | 第118-124页 |
参考文献 | 第122-124页 |
英文缩略表 | 第124-126页 |
致谢 | 第126-127页 |
在读期间已发表和待发表的论文 | 第127页 |