| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-22页 |
| 第一章 绪论 | 第22-42页 |
| 一、研究背景 | 第22-39页 |
| 1. 苦瓜 | 第22-23页 |
| 2. 苦瓜蛋白 | 第23-26页 |
| 3. 苦瓜蛋白的抗肿瘤活性 | 第26-32页 |
| 4. 细胞凋亡途径 | 第32-39页 |
| 二、本研究的目的、意义、内容及研究路线 | 第39-42页 |
| 1. 研究的目的及意义 | 第39页 |
| 2. 研究内容 | 第39-40页 |
| 3. 研究路线 | 第40-42页 |
| 第二章 苦瓜MAP30基因的克隆表达及纯化 | 第42-56页 |
| ·材料与方法 | 第42-50页 |
| ·材料 | 第42-44页 |
| ·方法 | 第44-50页 |
| ·结果 | 第50-54页 |
| ·MAP30基因的T-A克隆和鉴定 | 第50-51页 |
| ·原核表达载体的构建鉴定 | 第51页 |
| ·氨基酸序列的同源性比较 | 第51-52页 |
| ·不同IPTG浓度对目的蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
| ·不同诱导时间对目的蛋白表达的影响 | 第53页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第三章 MAP30蛋白对人食管癌细胞EC-1.71增殖抑制作用 | 第56-66页 |
| ·材料与方法 | 第56-61页 |
| ·材料 | 第56-58页 |
| ·方法 | 第58-61页 |
| ·结果 | 第61-64页 |
| ·MTT比色法检测MAP30对EC-1.71增殖的抑制作用 | 第61-62页 |
| ·细胞计数法绘制生长曲线 | 第62页 |
| ·集落形成实验结果 | 第62-64页 |
| ·裸鼠致瘤实验结果 | 第64页 |
| ·人食管癌细胞EC-1.71小鼠转移瘤实验结果 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 MAP30蛋白诱导人食管癌细胞EC-1.71的凋亡作用 | 第66-78页 |
| ·材料与方法 | 第66-71页 |
| ·材料 | 第66-68页 |
| ·方法 | 第68-71页 |
| ·结果 | 第71-75页 |
| ·MAP30作用后人食管癌细胞EC-1.71光学显微镜下形态学观察 | 第71-72页 |
| ·MAP30作用后人食管癌细胞EC-1.71电子显微镜下形态学观察 | 第72-73页 |
| ·荧光染色鉴别活细胞/凋亡细胞/坏死细胞 | 第73-74页 |
| ·细胞DNA提取及电泳 | 第74页 |
| ·流式细胞仪检测人食管癌细胞EC-1.71的凋亡特征、凋亡细胞百分率及细胞周期变化 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| 第五章 MAP30蛋白诱导人食管癌细胞EC-1.71凋亡机制 | 第78-90页 |
| ·材料与方法 | 第78-82页 |
| ·材料 | 第78-80页 |
| ·方法 | 第80-82页 |
| ·结果 | 第82-85页 |
| ·线粒体膜电位(△Ψm)检测结果 | 第82-83页 |
| ·细胞培养上清液中Cytc的变化 | 第83页 |
| ·细胞培养上清液中TNF-α的变化 | 第83-84页 |
| ·ERK1/PERK1,AKT/PAKT,NF-κB和c-jun的表达 | 第84页 |
| ·EC-1.71细胞的Caspase-12活性变化 | 第84-85页 |
| ·讨论 | 第85-90页 |
| 第六章 MAP30蛋白对人胃癌细胞BGC-823增殖抑制作用 | 第90-98页 |
| ·材料与方法 | 第90-93页 |
| ·材料 | 第90-92页 |
| ·方法 | 第92-93页 |
| ·结果 | 第93-95页 |
| ·MTT法检测MAP30对人胃癌细胞BGC-823的生长抑制作用 | 第93-94页 |
| ·细胞计数法绘制生长曲线 | 第94-95页 |
| ·裸鼠致瘤实验 | 第95页 |
| ·讨论 | 第95-98页 |
| 第七章 MAP30蛋白诱导人胃癌细胞BGC-823的凋亡作用 | 第98-110页 |
| ·材料与方法 | 第98-102页 |
| ·材料 | 第98-100页 |
| ·方法 | 第100-102页 |
| ·结果 | 第102-107页 |
| ·MAP30作用后人胃癌细胞BGC-823光学显微镜下形态学观察 | 第102-104页 |
| ·MAP30作用后人胃癌细胞BGC-823电子显微镜下形态学观察 | 第104-105页 |
| ·荧光染色鉴别活细胞/凋亡细胞/坏死细胞 | 第105-106页 |
| ·流式细胞仪检测人胃癌细胞BGC-823的凋亡特征和凋亡细胞百分率 | 第106-107页 |
| ·讨论 | 第107-110页 |
| 第八章 MAP30蛋白诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡机制 | 第110-124页 |
| ·材料与方法 | 第110-116页 |
| ·材料 | 第110-112页 |
| ·方法 | 第112-116页 |
| ·结果 | 第116-119页 |
| ·线粒体膜电位(△Ψm)变化 | 第116-117页 |
| ·细胞培养上清液中Cytc的变化 | 第117页 |
| ·免疫细胞化学法检测NF-κB的表达 | 第117页 |
| ·细胞的Caspase-12活性变化 | 第117-118页 |
| ·BGC-823细胞的caspase-9和Apaf1 mRNA的表达 | 第118页 |
| ·BGC-823细胞的Caspase-3的活性 | 第118-119页 |
| ·讨论 | 第119-124页 |
| 第九章 主要结论与展望 | 第124-128页 |
| ·主要结论 | 第124页 |
| ·创新点 | 第124-125页 |
| ·展望 | 第125-128页 |
| 致谢 | 第128-130页 |
| 参考文献 | 第130-142页 |
| 在读期间已发表和待发表的学术论文 | 第142-144页 |
| 获奖成果 | 第144页 |
| 成果鉴定 | 第144-146页 |
| 目前参加的研究课题 | 第146页 |
