| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-14页 |
| 1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第12-13页 |
| 1.2.1 国外研究概况 | 第12-13页 |
| 1.2.2 国内研究概况 | 第13页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-26页 |
| 2.1 研究资料及仪器设备 | 第14-15页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第14页 |
| 2.1.2 主要仪器与试剂 | 第14-15页 |
| 2.2 实验流程与方法 | 第15-26页 |
| 2.2.1 组织标本的采集 | 第15页 |
| 2.2.2 细胞标本的采集 | 第15页 |
| 2.2.3 组织、细胞总RNA的提取 | 第15-16页 |
| 2.2.4 逆转录 | 第16-17页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第17-18页 |
| 2.2.6 细胞培养 | 第18页 |
| 2.2.7 细胞总蛋白提取 | 第18-19页 |
| 2.2.8 蛋白免疫印迹(WesternBlot) | 第19-20页 |
| 2.2.9 细胞转染技术 | 第20-21页 |
| 2.2.10 细胞增殖实验(CCK-8法) | 第21页 |
| 2.2.11 细胞克隆形成实验 | 第21-22页 |
| 2.2.12 细胞划痕实验 | 第22页 |
| 2.2.13 细胞迁移实验(Transwell小室法) | 第22-23页 |
| 2.2.14 细胞侵袭实验(Transwell小室法,以铺胶6个小室为例) | 第23页 |
| 2.2.15 细胞周期分布检测实验 | 第23页 |
| 2.2.16 细胞凋亡检测实验 | 第23-24页 |
| 2.2.17 双荧光素酶报告基因分析实验 | 第24-25页 |
| 2.2.18 统计学分析 | 第25-26页 |
| 第三章 结果 | 第26-49页 |
| 3.1 建立荧光定量PCR方法检测组织CCAL的相对表达量 | 第26页 |
| 3.2 CCAL的组织相对表达量检测 | 第26-27页 |
| 3.3 CCAL的组织诊断价值 | 第27-28页 |
| 3.4 CCAL在GC细胞的表达情况及转染效率 | 第28-30页 |
| 3.4.1 CCAL在GC细胞中的相对表达量 | 第28页 |
| 3.4.2 CCAL在GC细胞中的转染效率 | 第28-30页 |
| 3.5 CCAL促进GC细胞增殖 | 第30-31页 |
| 3.5.1 GC细胞增殖(CCK-8法)实验结果 | 第30页 |
| 3.5.2 GC细胞克隆形成实验结果 | 第30-31页 |
| 3.6 CCAL通过延长S期细胞所占比例促进GC细胞增殖 | 第31-33页 |
| 3.7 CCAL抑制GC细胞凋亡 | 第33页 |
| 3.8 CCAL促进GC细胞迁移和侵袭 | 第33-37页 |
| 3.8.1 GC细胞迁移实验结果 | 第33-35页 |
| 3.8.2 GC细胞侵袭实验结果 | 第35-36页 |
| 3.8.3 细胞迁移、侵袭相关蛋白检测结果 | 第36-37页 |
| 3.9 CCAL靶标miRNA的预测和证实 | 第37-38页 |
| 3.9.1 生物信息学软件预测CCAL的靶标miRNA | 第37-38页 |
| 3.9.2 双荧光素酶报告基因证实CCAL与miR-149的调控关系 | 第38页 |
| 3.10 miR-149在GC组织、细胞中低表达,和CCAL呈负相关 | 第38-40页 |
| 3.10.1 miR-149在GC组织、细胞中低表达 | 第38-39页 |
| 3.10.2 CCAL和miR-149两者在GC组织中的表达呈负相关 | 第39-40页 |
| 3.11 CCAL通过负调控miR-149促进GC细胞迁移和侵袭 | 第40-44页 |
| 3.11.1 CCAL通过负调控miR-149促进GC细胞横向迁移(划痕法) | 第40-42页 |
| 3.11.2 CCAL通过负调控miR-149促进GC细胞纵向迁移(Transwell法) | 第42-43页 |
| 3.11.3 CCAL通过负调控miR-149促进GC细胞侵袭(Transwell法) | 第43-44页 |
| 3.11.4 CCAL负调控miR-149时,侵袭迁移相关蛋白的表达情况 | 第44页 |
| 3.12 miR-149负向调控FOXM | 第44-45页 |
| 3.13 FOXM1mRNA在GC组织中高表达,且和miR-149呈负相关,和CCAL呈正相关 | 第45-47页 |
| 3.13.1 FOXM1在GC组织中高表达(mRNA水平) | 第45-46页 |
| 3.13.2 FOXM1mRNA水平和miR-149呈负相关 | 第46页 |
| 3.13.3 FOXM1mRNA水平和CCAL呈正相关 | 第46-47页 |
| 3.14 CCAL通过抑制miR-149,正向调控FOXM1蛋白水平 | 第47-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 英文缩写词表 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-72页 |
| 综述参考文献 | 第66-72页 |
| 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第72-73页 |
| A：公开发表的论文 | 第72页 |
| B：所参加的项目 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
