| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第10-13页 |
| 1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第10-11页 |
| 1.2 国内外研究概况 | 第11-12页 |
| 1.3 论文的主要研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-27页 |
| 2.1 研究资料及仪器设备 | 第13-18页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第13-14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14-17页 |
| 2.1.3 质粒和shRNA | 第17页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验流程与方法 | 第18-27页 |
| 2.2.1 细胞免疫荧光实验 | 第18页 |
| 2.2.2 免疫印迹实验 | 第18-20页 |
| 2.2.3 免疫共沉淀实验 | 第20-21页 |
| 2.2.4 GSTpull-down实验 | 第21-23页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第23页 |
| 2.2.6 细胞核仁核质分离实验 | 第23页 |
| 2.2.7 体外泛素化分析实验 | 第23页 |
| 2.2.8 EdU细胞增殖实验 | 第23-24页 |
| 2.2.9 CCK-8实验 | 第24页 |
| 2.2.10 流式细胞术 | 第24-25页 |
| 2.2.11 克隆形成实验 | 第25页 |
| 2.2.12 裸鼠成瘤实验 | 第25页 |
| 2.2.13 免疫组化分析实验 | 第25-26页 |
| 2.2.14 统计分析 | 第26-27页 |
| 第三章 结果 | 第27-39页 |
| 3.1 在肝癌组织和细胞系中,NS和p27存在相互作用 | 第27-29页 |
| 3.1.1 免疫共沉淀及GSTpull-down验证NS和p27的相互作用 | 第27-28页 |
| 3.1.2 免疫荧光分析NS和p27在肝癌细胞中的共定位情况 | 第28页 |
| 3.1.3 NS和p27相互作用结构域的确定 | 第28-29页 |
| 3.2 在肝癌细胞中,NS促进核仁p27泛素化降解 | 第29-30页 |
| 3.3 在肝癌细胞中,NS-p27相互作用对CDK2功能及细胞增殖的影响 | 第30-32页 |
| 3.3.1 NS解离p27与CDK2间的相互作用 | 第30-31页 |
| 3.3.2 干扰NS抑制肝癌细胞增殖 | 第31-32页 |
| 3.4 在裸鼠成瘤模型中,NS-p27相互作用对体内肝癌生长的影响 | 第32-34页 |
| 3.4.1 NS稳定干扰细胞系的建立 | 第32-33页 |
| 3.4.2 干扰NS抑制体内肝癌生长 | 第33-34页 |
| 3.5 在临床肝癌样本中,NS和p27表达的相关性及临床意义 | 第34-39页 |
| 3.5.1 免疫印迹检测NS和p27在8对新鲜肝癌及癌旁组织样本中的表达. | 第34-35页 |
| 3.5.2 免疫组化检测NS和p27在肝癌及癌旁组织芯片中的表达 | 第35-36页 |
| 3.5.3 NS和p27表达与临床病理参数的相关性 | 第36-38页 |
| 3.5.4 NS和p27表达与HCC患者预后的相关性 | 第38-39页 |
| 第四章 讨论 | 第39-41页 |
| 第五章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 英文缩写词表 | 第46-48页 |
| 综述 | 第48-60页 |
| 综述参考文献 | 第54-60页 |
| 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第60-62页 |
| A 在国内外刊物上发表的论文 | 第60页 |
| B 所参加的项目 | 第60-61页 |
| C 研究生期间所获得的荣誉 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
