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去泛素化酶USP48调节TNFα信号转导通路中TRAF2蛋白稳定性的研究

中文摘要第7-10页
英文摘要第10-13页
前言第14-20页
材料和方法第20-36页
    1.实验材料第20-25页
        1.1 细胞系及培养条件第20页
        1.2 主要试剂及来源第20-24页
        1.3 常用试剂的配制第24-25页
    2.实验方法第25-35页
        2.1 细胞培养和冻存第25-26页
        2.2 质粒构建第26-29页
        2.3 质粒转染细胞第29页
        2.4 SiRNA转染细胞第29-30页
        2.5 免疫印迹检测第30-31页
        2.6 免疫沉淀反应第31-32页
        2.7 细胞免疫荧光染色第32页
        2.8 泛素分析第32-33页
        2.9 肿瘤坏死因子α(TNFα)刺激细胞第33页
        2.10 总RNA提取第33页
        2.11 逆转录合成cDNA第33-34页
        2.12 半定量RT-PCR检测Usp48,Traf2,Traf6和E-cadherin mRNA水平第34页
        2.13 电子细胞基质阻抗测定(ECIS)测量跨上皮电阻抗值第34-35页
    3.数据的获取及分析第35-36页
        3.1 数据的获取第35页
        3.2 统计学分析第35-36页
结果第36-58页
    1.USP48调节TRAF2蛋白稳定性第36-38页
    2.USP48调控TRAF2蛋白的泛素化第38-40页
    3.GSK3β调节TNFα介导的USP48磷酸化第40-44页
    4.GSK3β介导的USP48磷酸化有助于TRAF2蛋白稳定第44-46页
    5.GSK3β介导USP48磷酸化修饰能够增加USP48去泛素化酶活性第46-48页
    6.敲降USP48能够减弱TRAF2介导的JNK1激活并且能够增加E-钙黏蛋白表达第48-55页
    7.USP48和JNK活性调节上皮屏障功能第55-58页
讨论第58-63页
结论第63-64页
参考文献第64-72页
综述第72-89页
    参考文献第82-89页
攻读学位期间发表文章情况第89-91页
致谢第91-92页

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