摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-29页 |
1.1 伪狂犬病研究概况 | 第11-16页 |
1.1.1 伪狂犬病及其危害 | 第11页 |
1.1.2 伪狂犬病毒 | 第11-12页 |
1.1.3 国内伪狂犬病新疫情及流行毒株特点 | 第12-13页 |
1.1.4 伪狂犬病的诊断方法 | 第13-16页 |
1.2 长链非编码RNA—病毒和宿主相互作用中调控因子 | 第16-29页 |
1.2.1 前言 | 第16-17页 |
1.2.2 lncRNAs的来源和功能 | 第17-18页 |
1.2.3 宿主lncRNA抗病毒功能 | 第18-24页 |
1.2.4 病毒劫持并利用宿主IncRNAs | 第24-26页 |
1.2.5 病毒编码的lncRNAs沉默宿主的抗病毒应答 | 第26-27页 |
1.2.6 总结及展望 | 第27-29页 |
第二章 鉴别检测伪狂犬病病毒经典株、变异株和Bartha-K61疫苗株的三重荧光定量PCR方法的建立 | 第29-41页 |
2.1 材料与方法 | 第29-33页 |
2.1.1 病毒 | 第29页 |
2.1.2 病毒基因组提取 | 第29页 |
2.1.3 引物和探针的选择 | 第29-31页 |
2.1.4 标准曲线建立 | 第31-32页 |
2.1.5 三重荧光定量PCR方法条件优化 | 第32页 |
2.1.6 不同PRV毒株的检测 | 第32页 |
2.1.7 特异性、敏感性和重复性试验 | 第32-33页 |
2.1.8 病毒分离试验验证三重荧光定量PCR方法 | 第33页 |
2.2 结果 | 第33-39页 |
2.2.1 引物和探针的选择 | 第33-34页 |
2.2.2 条件优化 | 第34-35页 |
2.2.3 标准曲线 | 第35-36页 |
2.2.4 PRV不同毒株的鉴别检测 | 第36-37页 |
2.2.5 三重荧光定量PCR特异性、敏感性和重复分析 | 第37-38页 |
2.2.6 三重荧光定量PCR和病毒分离方法符合性分析 | 第38-39页 |
2.3 讨论 | 第39-41页 |
第三章 快速检测PRV交叉引物扩增-试纸条联用方法的建立和评价 | 第41-53页 |
3.1 材料与方法 | 第41-46页 |
3.1.1 病毒及样品 | 第41-42页 |
3.1.2 病毒基因组提取 | 第42页 |
3.1.3 引物和探针的选择 | 第42-44页 |
3.1.4 质粒标准品的制备 | 第44页 |
3.1.5 反应条件优化 | 第44页 |
3.1.6 金纳米颗粒复合物的制备 | 第44-45页 |
3.1.7 试纸条的制备及应用 | 第45页 |
3.1.8 CPA-strip特异性分析 | 第45页 |
3.1.9 CPA-strip敏感性和重复性分析 | 第45页 |
3.1.10 CPA-strip、三重荧光定量PCR和病毒分离方法符合性分析 | 第45-46页 |
3.2 结果 | 第46-51页 |
3.2.1 引物和探针的选择 | 第46-47页 |
3.2.2 标记探针对CPA反应的影响 | 第47-48页 |
3.2.3 标记探针对CPA反应的影响 | 第48页 |
3.2.4 CPA-strip特异性分析 | 第48-49页 |
3.2.5 CPA-strip方法的灵敏性和重复性分析 | 第49-51页 |
3.2.6 CPA-strip、三重荧光定量PCR和病毒分离方法符合性分析 | 第51页 |
3.3 讨论 | 第51-53页 |
第四章 影响猪瘟病毒复制的lncRNA的筛选 | 第53-69页 |
4.1 材料与方法 | 第53-57页 |
4.1.1 病毒与细胞 | 第53页 |
4.1.2 动物感染试验 | 第53页 |
4.1.3 PBMC细胞分离 | 第53-54页 |
4.1.4 总RNA提取 | 第54页 |
4.1.5 反转录 | 第54页 |
4.1.6 IncRNAs预测 | 第54-55页 |
4.1.7 定量RCR | 第55页 |
4.1.8 RNA干扰 | 第55-56页 |
4.1.9 CSFV滴度的测定 | 第56页 |
4.1.10 lncRNA过表达细胞系构建 | 第56-57页 |
4.1.11 数据分析 | 第57页 |
4.2 结果 | 第57-67页 |
4.2.1 SPF猪人工感染CSFV模型的建立 | 第57-59页 |
4.2.2 RNA测序结果及差异表达分析 | 第59-61页 |
4.2.3 Pathway分析、KEGG分析及功能性lncRNAs的初步筛选 | 第61-65页 |
4.2.4 沉默或过表达lncRNAs对共表达基因的影响 | 第65-67页 |
4.3 讨论 | 第67-69页 |
第五章 结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-79页 |
作者简历 | 第79页 |