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Ⅰ.两种伪狂犬病病毒诊断检测方法的建立 Ⅱ.影响猪瘟病毒复制的lncRNAs的筛选

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第11-29页
    1.1 伪狂犬病研究概况第11-16页
        1.1.1 伪狂犬病及其危害第11页
        1.1.2 伪狂犬病毒第11-12页
        1.1.3 国内伪狂犬病新疫情及流行毒株特点第12-13页
        1.1.4 伪狂犬病的诊断方法第13-16页
    1.2 长链非编码RNA—病毒和宿主相互作用中调控因子第16-29页
        1.2.1 前言第16-17页
        1.2.2 lncRNAs的来源和功能第17-18页
        1.2.3 宿主lncRNA抗病毒功能第18-24页
        1.2.4 病毒劫持并利用宿主IncRNAs第24-26页
        1.2.5 病毒编码的lncRNAs沉默宿主的抗病毒应答第26-27页
        1.2.6 总结及展望第27-29页
第二章 鉴别检测伪狂犬病病毒经典株、变异株和Bartha-K61疫苗株的三重荧光定量PCR方法的建立第29-41页
    2.1 材料与方法第29-33页
        2.1.1 病毒第29页
        2.1.2 病毒基因组提取第29页
        2.1.3 引物和探针的选择第29-31页
        2.1.4 标准曲线建立第31-32页
        2.1.5 三重荧光定量PCR方法条件优化第32页
        2.1.6 不同PRV毒株的检测第32页
        2.1.7 特异性、敏感性和重复性试验第32-33页
        2.1.8 病毒分离试验验证三重荧光定量PCR方法第33页
    2.2 结果第33-39页
        2.2.1 引物和探针的选择第33-34页
        2.2.2 条件优化第34-35页
        2.2.3 标准曲线第35-36页
        2.2.4 PRV不同毒株的鉴别检测第36-37页
        2.2.5 三重荧光定量PCR特异性、敏感性和重复分析第37-38页
        2.2.6 三重荧光定量PCR和病毒分离方法符合性分析第38-39页
    2.3 讨论第39-41页
第三章 快速检测PRV交叉引物扩增-试纸条联用方法的建立和评价第41-53页
    3.1 材料与方法第41-46页
        3.1.1 病毒及样品第41-42页
        3.1.2 病毒基因组提取第42页
        3.1.3 引物和探针的选择第42-44页
        3.1.4 质粒标准品的制备第44页
        3.1.5 反应条件优化第44页
        3.1.6 金纳米颗粒复合物的制备第44-45页
        3.1.7 试纸条的制备及应用第45页
        3.1.8 CPA-strip特异性分析第45页
        3.1.9 CPA-strip敏感性和重复性分析第45页
        3.1.10 CPA-strip、三重荧光定量PCR和病毒分离方法符合性分析第45-46页
    3.2 结果第46-51页
        3.2.1 引物和探针的选择第46-47页
        3.2.2 标记探针对CPA反应的影响第47-48页
        3.2.3 标记探针对CPA反应的影响第48页
        3.2.4 CPA-strip特异性分析第48-49页
        3.2.5 CPA-strip方法的灵敏性和重复性分析第49-51页
        3.2.6 CPA-strip、三重荧光定量PCR和病毒分离方法符合性分析第51页
    3.3 讨论第51-53页
第四章 影响猪瘟病毒复制的lncRNA的筛选第53-69页
    4.1 材料与方法第53-57页
        4.1.1 病毒与细胞第53页
        4.1.2 动物感染试验第53页
        4.1.3 PBMC细胞分离第53-54页
        4.1.4 总RNA提取第54页
        4.1.5 反转录第54页
        4.1.6 IncRNAs预测第54-55页
        4.1.7 定量RCR第55页
        4.1.8 RNA干扰第55-56页
        4.1.9 CSFV滴度的测定第56页
        4.1.10 lncRNA过表达细胞系构建第56-57页
        4.1.11 数据分析第57页
    4.2 结果第57-67页
        4.2.1 SPF猪人工感染CSFV模型的建立第57-59页
        4.2.2 RNA测序结果及差异表达分析第59-61页
        4.2.3 Pathway分析、KEGG分析及功能性lncRNAs的初步筛选第61-65页
        4.2.4 沉默或过表达lncRNAs对共表达基因的影响第65-67页
    4.3 讨论第67-69页
第五章 结论第69-70页
参考文献第70-77页
致谢第77-79页
作者简历第79页

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