| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 胚胎干细胞研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 胚胎干细胞(ESCs)的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.2 猪胚胎干细胞(ESCs)的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2 哺乳动物原始生殖细胞的发育 | 第15-20页 |
| 1.2.1 原始生殖细胞的特化 | 第16-18页 |
| 1.2.2 原始生殖细胞的迁移 | 第18-19页 |
| 1.2.3 原始生殖细胞甲基化的去除与重建 | 第19-20页 |
| 1.3 影响原始生殖细胞重编程的细胞因子 | 第20-21页 |
| 1.3.1 白血病抑制因子(1euckemia inhibitory factor,Lif) | 第20-21页 |
| 1.3.2 干细胞因子(Stem Cell Factors,SCF) | 第21页 |
| 1.3.3 骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs) | 第21页 |
| 1.3.4 腺苷酸环化酶激活剂(Forskolin) | 第21页 |
| 1.3.5 碱性成纤维生长因子(basic Fibroblast Growth Factor,bFGF) | 第21页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.1.4 常用试剂及配制 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要的生物信息学网站及分析软件 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 猪生殖嵴组织学切片制作 | 第25-26页 |
| 2.2.2 猪生殖嵴的苏木素-伊红染色 | 第26页 |
| 2.2.3 猪生殖嵴的碱性磷酸酶染色 | 第26-27页 |
| 2.2.4 猪原始生殖细胞的培养 | 第27页 |
| 2.2.5 猪原始生殖细胞的碱性磷酸酶检测 | 第27-28页 |
| 2.2.6 猪原始生殖细胞的分化能力检测 | 第28页 |
| 2.2.7 免疫荧光检测 | 第28页 |
| 2.2.8 基因表达检测 | 第28-33页 |
| 3 结果 | 第33-45页 |
| 3.1 猪胚胎生殖嵴的发育 | 第33-34页 |
| 3.2 猪原始生殖细胞的生物学特性 | 第34-37页 |
| 3.2.1 猪原始生殖细胞的获得 | 第34页 |
| 3.2.2 猪原始生殖细胞的生长行为 | 第34-36页 |
| 3.2.3 猪类胚胎生殖细胞的体外分化 | 第36-37页 |
| 3.2.4 猪类胚胎生殖细胞的多能性及生殖系基因的表达 | 第37页 |
| 3.3 bFGF对原始生殖细胞克隆形成的影响 | 第37-45页 |
| 3.3.1 猪类胚胎生殖细胞表面受体的表达 | 第37-41页 |
| 3.3.2 碱性成纤维生长因子对原始生殖细胞克隆形成的影响 | 第41-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 猪原始生殖细胞的生长行为 | 第45页 |
| 4.2 bFGF对猪原始生殖细胞重编程的影响 | 第45-46页 |
| 4.3 生殖系基因在猪类胚胎生殖细胞中的表达 | 第46-47页 |
| 4.3.1 Blimp1在类胚胎生殖细胞中的表达 | 第46页 |
| 4.3.2 Stella在类胚胎生殖细胞中的表达 | 第46页 |
| 4.3.3 Ifitm3在类胚胎生殖细胞中的表达 | 第46页 |
| 4.3.4 Nanos1在类胚胎生殖细胞中的表达 | 第46-47页 |
| 4.4 多能性基因在猪类胚胎生殖细胞中的表达 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第56页 |
