| CONTENTS | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 引言 | 第11-16页 |
| 1.1 硒缺乏对肝脏的影响 | 第11-12页 |
| 1.1.1 缺硒与肝脏疾病 | 第11页 |
| 1.1.2 缺硒时肝脏的病理学变化 | 第11-12页 |
| 1.2 H_2S的生物学功能 | 第12-15页 |
| 1.2.1 内源性H_2S的生成途径 | 第12页 |
| 1.2.2 H_2S与疾病 | 第12-13页 |
| 1.2.3 H_2S的信号转导通路 | 第13-14页 |
| 1.2.4 H_2S含量的检测方法 | 第14-15页 |
| 1.3 目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-23页 |
| 2.1 试验鸡的饲养 | 第16页 |
| 2.2 试验的主要试剂及仪器 | 第16-17页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.3 肝组织中H_2S含量的检测 | 第17页 |
| 2.4 肝组织中CSE、CBS、3-MST基因mRNA表达的检测 | 第17-18页 |
| 2.4.1 引物的设计与合成 | 第17页 |
| 2.4.2 总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.4.3 RNA反转录成cDNA | 第18页 |
| 2.4.4 荧光定量PCR扩增 | 第18页 |
| 2.5 鸡CSE基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备 | 第18-22页 |
| 2.5.1 鸡CSE基因序列的克隆与鉴定 | 第18-20页 |
| 2.5.2 鸡CSE基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定 | 第20-21页 |
| 2.5.3 抗鸡CSE多克隆抗体的制备 | 第21-22页 |
| 2.6 鸡CSE基因蛋白表达情况的检测 | 第22页 |
| 2.7 试验数据的分析与统计 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-29页 |
| 3.1 鸡CSE多克隆抗体的制备 | 第23-25页 |
| 3.1.1 鸡CSE基因的PCR扩增结果 | 第23页 |
| 3.1.2 鸡CSE mRNA基因序列的测序结果 | 第23页 |
| 3.1.3 重组表达载体的构建与鉴定 | 第23-24页 |
| 3.1.4 融合蛋白的表达、鉴定与纯化 | 第24-25页 |
| 3.1.5 多克隆抗体的制备和鉴定结果 | 第25页 |
| 3.2 鸡肝脏H_2S含量的检测结果 | 第25-26页 |
| 3.3 鸡肝脏CSE、CBS、3-MST mRNA与CSE蛋白表达的检测结果 | 第26-29页 |
| 4 讨论 | 第29-34页 |
| 4.1 鸡CSE的克隆、表达及多克隆抗体的制备 | 第29-30页 |
| 4.2 硒缺乏对鸡肝脏中H_2S含量的影响 | 第30-31页 |
| 4.3 硒缺乏对鸡肝脏中CSE、CBS、3-MST mRNA和CSE蛋白表达的影响 | 第31-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第43页 |
