| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-25页 |
| 1.1 环境水中植物病毒的简介 | 第14-19页 |
| 1.1.1 植物病毒在环境水中的来源 | 第14-15页 |
| 1.1.2 植物病毒在水中的存活 | 第15-18页 |
| 1.1.3 水作为传播植物病毒的介体及制约因素 | 第18-19页 |
| 1.2 水体中病毒的浓缩方法与检测技术 | 第19-22页 |
| 1.2.1 水体中病毒的浓缩方法 | 第19-21页 |
| 1.2.2 水体中病毒的检测技术 | 第21-22页 |
| 1.3 水体中检出的部分病毒简介 | 第22-24页 |
| 1.3.1 烟草花叶病毒简介 | 第22-23页 |
| 1.3.2 番茄花叶病毒简介 | 第23-24页 |
| 1.3.3 黄瓜绿斑驳花叶病毒简介 | 第24页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第25-29页 |
| 2.1.1 样品采集 | 第25-27页 |
| 2.1.2 菌株、分子生物学及生化试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.4 实验试剂的配制方法 | 第28-29页 |
| 2.2 环境水中植物病毒的鉴定及检测 | 第29-36页 |
| 2.2.1 环境水中植物病毒的浓缩方法 | 第29页 |
| 2.2.2 病毒粒子DNA/RNA共提取 | 第29-30页 |
| 2.2.3 引物设计与合成 | 第30-32页 |
| 2.2.4 反转录cDNA的合成 | 第32页 |
| 2.2.5 PCR扩增 | 第32-33页 |
| 2.2.6 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
| 2.2.7 PCR产物目的片段回收 | 第33-34页 |
| 2.2.8 连接载体 | 第34页 |
| 2.2.9 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.10 连接产物转化大肠杆菌 | 第35页 |
| 2.2.11 PCR方法鉴定阳性菌落 | 第35-36页 |
| 2.2.12 序列测定及数据分析 | 第36页 |
| 2.3 环境水中植物病毒接种鉴定 | 第36-38页 |
| 2.3.1 摩擦接种法 | 第36-37页 |
| 2.3.2 接种病株RNA提取 | 第37页 |
| 2.3.3 引物设计与合成 | 第37页 |
| 2.3.4 反转录cDNA的合成 | 第37-38页 |
| 2.3.5 PCR扩增 | 第38页 |
| 2.3.6 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第38页 |
| 2.3.7 PCR产物目的片段回收 | 第38页 |
| 2.3.8 连接载体 | 第38页 |
| 2.3.9 连接产物转化大肠杆菌 | 第38页 |
| 2.3.10 PCR方法鉴定阳性菌落 | 第38页 |
| 2.3.11 序列测定及数据分析 | 第38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-53页 |
| 3.1 环境水中植物病毒检测及鉴定 | 第38-42页 |
| 3.1.1 环境水中植物病毒种类检测结果 | 第38-39页 |
| 3.1.2 环境水中植物病毒检出率 | 第39-40页 |
| 3.1.3 不同环境水中植物病毒分布情况 | 第40页 |
| 3.1.4 不同环境水中植物病毒的检出类型 | 第40-42页 |
| 3.2 烟草花叶病毒的接种鉴定与分析 | 第42-46页 |
| 3.2.1 济南地区TMV接种检测及鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2.2 序列一致性分析 | 第44-45页 |
| 3.2.3 系统进化树分析 | 第45-46页 |
| 3.3 黄瓜绿斑驳花叶病毒的接种鉴定与分析 | 第46-49页 |
| 3.3.1 山东地区CGMMV接种检测及鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3.2 序列一致性分析 | 第47-48页 |
| 3.3.3 系统进化树分析 | 第48-49页 |
| 3.4 番茄花叶病毒的接种鉴定与分析 | 第49-53页 |
| 3.4.1 济南地区ToMV接种检测及鉴定 | 第49-51页 |
| 3.4.2 序列一致性分析 | 第51-52页 |
| 3.4.3 系统进化树分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 4.1 环境水中植物病毒检测鉴定 | 第53页 |
| 4.2 对环境水中已检出的TMV、ToMV和CGMMV接种鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3 构建TMV、ToMV和CGMMV系统进化树分析 | 第54页 |
| 5 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |