| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 二穗短柄草介绍 | 第11-13页 |
| 1.2 T-DNA插入突变体介绍 | 第13-14页 |
| 1.3 TAIL-PCR原理 | 第14-15页 |
| 1.4 生长素作用途径 | 第15-18页 |
| 1.5 脱落酸作用途径 | 第18-20页 |
| 1.6 酵母双杂交 | 第20页 |
| 1.7 研究的目的及意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第23-25页 |
| 2.1.5 各种缓冲液及培养基配方 | 第25-32页 |
| 2.1.5.1 菌株培养所用LB固体培养基 | 第25页 |
| 2.1.5.2 植物培养所用培养基及营养液等配方 | 第25-30页 |
| 2.1.5.3 侵染液配方 | 第30页 |
| 2.1.5.4 激素配方 | 第30页 |
| 2.1.5.5 酵母双杂交Y_2H培养基及试剂 | 第30-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-42页 |
| 2.2.1 植物栽培方法 | 第32页 |
| 2.2.1.1 拟南芥的栽培 | 第32页 |
| 2.2.1.2 二穗短柄草的栽培 | 第32页 |
| 2.2.2 感受态细胞的制备和转化 | 第32-34页 |
| 2.2.2.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| 2.2.2.2 热激法进行大肠杆菌的转化 | 第33页 |
| 2.2.2.3 根癌农杆菌GV3101的制备 | 第33页 |
| 2.2.2.4 低温冷冻法转化农杆菌 | 第33-34页 |
| 2.2.3 表达载体构建方法 | 第34-36页 |
| 2.2.3.1 目的片段的PCR扩增 | 第34页 |
| 2.2.3.2 DNA产物的回收 | 第34页 |
| 2.2.3.3 目的片段与表达载体质粒的酶切回收 | 第34-35页 |
| 2.2.3.4 目的片段与表达载体的连接 | 第35页 |
| 2.2.3.5 菌落PCR鉴定大肠杆菌转化结果 | 第35页 |
| 2.2.3.6 质粒DNA的提取 | 第35页 |
| 2.2.3.7 质粒DNA的酶切验证及测序 | 第35-36页 |
| 2.2.4 拟南芥的转化及阳性植株的筛选 | 第36-37页 |
| 2.2.4.1 拟南芥的转化 | 第36页 |
| 2.2.4.2 转基因拟南芥阳性植株的筛选 | 第36-37页 |
| 2.2.5 二穗短柄草的转化及阳性植株的筛选 | 第37-39页 |
| 2.2.5.1 胚性愈伤组织诱导 | 第37页 |
| 2.2.5.2 二穗短柄草的侵染 | 第37-38页 |
| 2.2.5.3 二穗短柄草的共培养 | 第38页 |
| 2.2.5.4 二穗短柄草的筛选 | 第38页 |
| 2.2.5.5 二穗短柄草分化 | 第38页 |
| 2.2.5.6 二穗短柄草生根 | 第38页 |
| 2.2.5.7 二穗短柄草移栽 | 第38-39页 |
| 2.2.6 植物总DNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.7 植物总RNA的提取、反转录及定量分析 | 第39-40页 |
| 2.2.7.1 植物总RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.7.2 植物总RNA的反转录 | 第39-40页 |
| 2.2.8 二穗短柄草与拟南芥、玉米、水稻、小麦同源基因比对 | 第40页 |
| 2.2.9 Y_2H酵母双杂交 | 第40-42页 |
| 2.2.9.1 Y_2H酵母感受态的制备 | 第40-41页 |
| 2.2.9.2 质粒共转Y_2H酵母感受态及结果观察 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-66页 |
| 3.1 筛选所需激素浓度探究 | 第42-43页 |
| 3.2 突变体筛选、定位和表型分析 | 第43-49页 |
| 3.2.1 4号突变体表型分析 | 第43页 |
| 3.2.2 7号突变体表型分析 | 第43-44页 |
| 3.2.3 11号突变体表型分析 | 第44-45页 |
| 3.2.4 12号突变体表型分析 | 第45页 |
| 3.2.5 18号突变体表型分析 | 第45-46页 |
| 3.2.6 23号突变体定位及表型分析 | 第46页 |
| 3.2.7 31号突变体定位及表型分析 | 第46-47页 |
| 3.2.8 35号突变体定位及表型分析 | 第47-49页 |
| 3.3 bdwar1表型分析 | 第49-56页 |
| 3.3.1 主根长势和对NAA响应情况 | 第49-50页 |
| 3.3.2 bdwar1对ABA响应情况 | 第50页 |
| 3.3.3 BdWAR1对胁迫的响应及bdwar1种子表型 | 第50-52页 |
| 3.3.4 成苗表型观察 | 第52-54页 |
| 3.3.5 小穗表型观察 | 第54-55页 |
| 3.3.6 根尖与根毛表型分析 | 第55-56页 |
| 3.4 T-DNA插入位置分析 | 第56-58页 |
| 3.5 BdWAR1基因同源性分析 | 第58-61页 |
| 3.6 表达模式分析 | 第61页 |
| 3.7 qRT-PCR结果分析 | 第61-64页 |
| 3.8 酵母双杂交 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
