摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 链霉菌研究进展 | 第10-14页 |
1.1.1 链霉菌简介 | 第10-11页 |
1.1.2 链霉菌形态研究进展 | 第11-13页 |
1.1.3 链霉菌抗生素研究进展 | 第13-14页 |
1.2 利迪链菌素研究进展 | 第14-16页 |
1.3 氨基酸对于次级代谢的影响 | 第16-17页 |
1.4 代谢组学及蛋白质组学在次级代谢研究中的应用 | 第17-18页 |
1.4.1 代谢组学在次级代谢研究中的应用 | 第17-18页 |
1.4.2 蛋白组学在次级代谢研究中的应用 | 第18页 |
1.5 本文的立题背景、意义、依据及主要研究内容 | 第18-20页 |
1.5.1 立题背景、意义 | 第18-19页 |
1.5.2 立题依据 | 第19页 |
1.5.3 主要研究内容 | 第19-20页 |
第二章 外源谷氨酸和脯氨酸对利迪链霉菌的代谢物组影响 | 第20-38页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 材料与方法 | 第20-21页 |
2.2.1 实验菌株 | 第20页 |
2.2.2 培养基 | 第20-21页 |
2.2.3 培养条件 | 第21页 |
2.3 主要仪器与试剂 | 第21-22页 |
2.3.1 主要仪器 | 第21-22页 |
2.3.2 主要试剂 | 第22页 |
2.4 分析方法 | 第22-25页 |
2.4.1 发酵液的菌体干重测定及发酵滤液萃取方法 | 第22页 |
2.4.2 HPLC 测定利迪链菌素的含量 | 第22页 |
2.4.3 发酵液中残留葡萄糖的测定 | 第22-23页 |
2.4.4 菌丝块法测定抗真菌抗生素抑菌活性 | 第23页 |
2.4.5 胞内小分子代谢物的提取过程 | 第23页 |
2.4.6 代谢物样品的衍生化 | 第23-24页 |
2.4.7 GC-TOF MS 检测 | 第24页 |
2.4.8 胞内小分子代谢物的定性定量检测方法 | 第24-25页 |
2.4.9 胞内代谢物数据分析 | 第25页 |
2.5 实验设计 | 第25页 |
2.6 结果与讨论 | 第25-37页 |
2.6.1 外源氨基酸对利迪链霉菌利迪链菌素产量的影响 | 第25-26页 |
2.6.2 外源氨基酸对利迪链霉菌 E9 发酵过程中的胞内代谢物的影响 | 第26-28页 |
2.6.3 利迪链霉菌 E9 代谢物多元统计分析 | 第28-31页 |
2.6.4 外源氨基酸对于利迪链霉菌的氨基酸代谢的影响 | 第31-33页 |
2.6.5 外源氨基酸添加对利迪链霉菌胞内脂肪酸的影响 | 第33-34页 |
2.6.6 外源氨基酸添加对利迪链霉菌胞内多元醇和胺类水平的影响 | 第34-35页 |
2.6.7 外源氨基酸添加对利迪链霉菌 E9 中心碳代谢的影响 | 第35-37页 |
2.7 小结 | 第37-38页 |
第三章 外源谷氨酸和脯氨酸对利迪链霉菌蛋白质组影响 | 第38-47页 |
3.1 引言 | 第38页 |
3.2 材料与方法 | 第38页 |
3.2.1 实验菌株 | 第38页 |
3.2.2 培养基 | 第38页 |
3.2.3 培养条件 | 第38页 |
3.3 主要仪器与试剂 | 第38-39页 |
3.3.1 主要仪器 | 第38-39页 |
3.3.2 主要试剂及溶液配制 | 第39页 |
3.4 分析方法 | 第39-41页 |
3.4.1 链霉菌胞内蛋白的提取 | 第39页 |
3.4.2 蛋白质浓度的测定 | 第39-40页 |
3.4.3 蛋白的酶解与标记 | 第40-41页 |
3.4.4 二维色谱及质谱进行蛋白鉴定 | 第41页 |
3.4.5 数据分析 | 第41页 |
3.5 实验设计 | 第41-42页 |
3.6 实验结果 | 第42-46页 |
3.6.1 相对定量蛋白的功能分类 | 第42-43页 |
3.6.2 外源谷氨酸和脯氨酸引起利迪链霉菌蛋白水平总体变化 | 第43页 |
3.6.3 氨基酸代谢相关蛋白变化 | 第43-45页 |
3.6.4 碳代谢相关蛋白水平变化 | 第45页 |
3.6.5 其他蛋白水平变化 | 第45-46页 |
3.7 小结 | 第46-47页 |
第四章 利迪链霉菌抗真菌活性定性研究 | 第47-67页 |
4.1 引言 | 第47页 |
4.2 材料与方法 | 第47-48页 |
4.2.1 实验菌种 | 第47页 |
4.2.2 培养基 | 第47-48页 |
4.2.3 培养条件 | 第48页 |
4.3 主要仪器与试剂 | 第48-50页 |
4.3.1 主要仪器 | 第48页 |
4.3.2 主要试剂及溶液配制 | 第48-50页 |
4.4 分析方法 | 第50-51页 |
4.4.1 SDS-PAGE 电泳 | 第50页 |
4.4.2 SDS-PAGE 胶蛋白的复性 | 第50-51页 |
4.4.3 茯苓多糖琼脂糖胶的制备 | 第51页 |
4.4.4 SDS-PAGE 胶与茯苓多糖琼脂糖胶的反应 | 第51页 |
4.5 实验设计 | 第51页 |
4.6 结果与讨论 | 第51-66页 |
4.6.1 发酵过程 pH 控制对利迪链霉菌抗真菌活性物的影响 | 第51-54页 |
4.6.2 淀粉对利迪链霉菌 E9 生产利迪链菌素和抗真菌活性物的影响 | 第54-55页 |
4.6.3 利迪链霉菌 E9 抗真菌活性的葡聚糖酶特性初步考察 | 第55-56页 |
4.6.4 利迪链霉菌 E9 抗真菌活性物的降解葡聚糖特性分析 | 第56-61页 |
4.6.5 固体平板培养基上利迪链霉菌 E9 周围的 pH 变化 | 第61页 |
4.6.6 利迪链霉菌 E9 抗真菌抗生素性质分析 | 第61-64页 |
4.6.7 抗真菌抗生素的初步分离纯化 | 第64-65页 |
4.6.8 抗真菌活性物的 SDS-PAGE 和底物检测分析 | 第65-66页 |
4.7 小结 | 第66-67页 |
第五章 结论与展望 | 第67-69页 |
5.1 结论 | 第67页 |
5.2 展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第76-77页 |
附录 | 第77-83页 |
致谢 | 第83页 |