| 摘要 | 第9-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 致病性大肠杆菌及其毒力因子 | 第12-17页 |
| 1.1.1 大肠杆菌概述 | 第12页 |
| 1.1.2 产肠毒素性大肠杆菌及其毒力因子 | 第12-15页 |
| 1.1.3 菌毛黏附素的检测技术 | 第15-17页 |
| 1.2 凝集试验 | 第17-18页 |
| 1.2.1 直接凝集试验 | 第17页 |
| 1.2.2 间接凝集试验 | 第17-18页 |
| 1.3 单因子血清制备技术 | 第18-19页 |
| 1.4 二氧化硅微球的制备及应用 | 第19-21页 |
| 1.4.1 二氧化硅微球 | 第19页 |
| 1.4.2 二氧化硅微球的制备技术 | 第19-21页 |
| 1.4.3 二氧化硅微球的应用 | 第21页 |
| 1.5 研究的目的意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-32页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 菌株与实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 PCR引物 | 第23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 四种菌毛的PCR鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.2 电镜观察 | 第25-26页 |
| 2.2.3 大肠杆菌生长曲线的测定 | 第26页 |
| 2.2.4 大肠杆菌菌毛的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE鉴定 | 第27页 |
| 2.2.6 Western blot鉴定 | 第27页 |
| 2.2.7 抗血清的制备 | 第27页 |
| 2.2.8 抗血清效价的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.9 单因子血清的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.10 免疫彩色二氧化硅微球(ICSN)的制备 | 第29页 |
| 2.2.11 不同颜色微球的凝集试验 | 第29-30页 |
| 2.2.12 特异性试验 | 第30页 |
| 2.2.13 菌毛ICSN凝集试验条件的优化 | 第30-31页 |
| 2.2.14 敏感性试验 | 第31页 |
| 2.2.15 直接凝集与间接凝集效果的比较 | 第31页 |
| 2.2.16 稳定性试验 | 第31页 |
| 2.2.17 双盲样品检测 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-47页 |
| 3.1 四种菌毛的PCR鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2 电镜观察 | 第33-34页 |
| 3.3 K88ab、K99、987p、F41生长曲线的测定 | 第34-35页 |
| 3.4 SDS-PAGE鉴定 | 第35页 |
| 3.5 Western blot鉴定 | 第35-36页 |
| 3.6 抗血清效价测定 | 第36页 |
| 3.6.1 玻片凝集试验 | 第36页 |
| 3.6.2 间接ELISA检测抗体效价 | 第36页 |
| 3.7 单因子血清的制备 | 第36-38页 |
| 3.7.1 交叉凝集反应 | 第36-37页 |
| 3.7.2 交叉抗体的吸收 | 第37页 |
| 3.7.3 单因子血清效价检测 | 第37-38页 |
| 3.8 CSN形态观察 | 第38页 |
| 3.9 不同颜色微球凝集试验 | 第38-39页 |
| 3.10 特异性试验 | 第39-41页 |
| 3.11 凝集条件的优化 | 第41-43页 |
| 3.11.1 最适菌液与ICSN浓度的确定 | 第41-42页 |
| 3.11.2 最适反应温度的确定 | 第42-43页 |
| 3.11.3 不同稀释液的凝集效果 | 第43页 |
| 3.12 敏感性试验 | 第43-44页 |
| 3.13 直接凝集与间接凝集效果的比较 | 第44-45页 |
| 3.14 稳定性试验 | 第45页 |
| 3.15 双盲样品检测 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 菌毛的表达条件和提取技术的选择 | 第47页 |
| 4.2 新型凝集技术的研究 | 第47-48页 |
| 4.3 有机活性染料 | 第48页 |
| 4.4 二氧化硅微球的制备及其应用前景 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |