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荷花APETALA3、LEAFY基因的克隆与表达分析

致谢第4-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-20页
    1.1 高等植物的花发育机理研究第9-10页
    1.2 MADS-box基因与ABCDE模型第10-13页
        1.2.1 MADS-box基因的结构与功能第10-11页
        1.2.2 ABCDE模型及相关基因研究第11-13页
            1.2.2.1 A功能基因第11-12页
            1.2.2.2 B功能基因第12页
            1.2.2.3 C/D类功能基因第12-13页
            1.2.2.4 E功能基因第13页
    1.3 成花相关基因研究第13-15页
        1.3.1 花分生组织特性基因第13-14页
        1.3.2 花器官特性基因第14页
        1.3.3 花时基因第14-15页
    1.4 LEAFY(LFY)同源基因研究进展第15-17页
        1.4.1 LFY同源基因的结构研究第15页
        1.4.2 LFY基因及其同源基因的功能研究第15-16页
        1.4.3 LFY基因及其同源基因的表达研究第16-17页
    1.5 APETALA3(AP3)基因研究进展第17-18页
    1.6 荷花的概述第18-20页
2 引言第20-21页
3 荷花AP3基因的克隆研究及生物学分析第21-35页
    3.1 试验材料第21-22页
        3.1.1 植物材料第21页
        3.1.2 试验试剂、试剂盒等第21页
        3.1.3 试验仪器第21-22页
        3.1.4 实验工具与耗材第22页
        3.1.5 引物合成与测序第22页
    3.2 试验方法第22-25页
        3.2.1. 总RNA的提取与纯化第22-23页
            3.2.1.1 总RNA的提取第22页
            3.2.1.2 RNA浓度、纯度和质量的检测第22-23页
        3.2.2 荷花AP3基因保守区的克隆第23-25页
            3.2.2.1 cDNA第一链的合成第23页
            3.2.2.2 引物的设计第23页
            3.2.2.3 PCR扩增第23页
            3.2.2.4 PCR产物的回收第23-24页
            3.2.2.5 目的片段与pUCm-T载体的连接第24页
            3.2.2.6 感受态细胞的制备第24-25页
            3.2.2.7 感受态细胞的转化与鉴定第25页
            3.2.2.8 重组质粒的PCR检测第25页
    3.3 结果与分析第25-35页
        3.3.1. 荷花花瓣总RNA的提取与检测第25-26页
            3.3.1.1 RNA电泳结果分析第25-26页
            3.3.1.2 分光光度计检测RNA结果分析第26页
        3.3.2 荷花AP3基因保守区序列的扩增结果第26-27页
        3.3.3 荷花AP3基因cDNA序列及其编码产物的同源性分析第27-30页
        3.3.4 荷花AP3基因片段氨基酸编码产物同源性分析第30-33页
        3.3.5 AP3基因编码的蛋白质结构的预测第33-34页
        3.3.6 荷花AP3基因编码的蛋白质保守区的预测及分析第34-35页
4 荷花AP3基因和LFY基因的时空表达第35-46页
    4.1 试验材料第35页
        4.1.1 植物材料第35页
        4.1.2 试验试剂第35页
        4.1.3 试验仪器第35页
        4.1.4 实验工具与耗材第35页
        4.1.5 引物合成与测序第35页
    4.2 试验方法第35-38页
        4.2.1 总RNA的提取与纯化第35-36页
            4.2.1.1 总RNA的提取第35页
            4.2.1.2 RNA浓度、纯度和质量的检测第35-36页
        4.2.2 cDNA第一链的合成第36页
        4.2.3 引物的设计第36-37页
        4.2.4 荷花AP3基因的实时荧光定量PCR反应第37页
        4.2.5 荷花AP3基因的半定量表达分析第37页
        4.2.6 荷花LFY基因的实时荧光定量PCR反应第37-38页
        4.2.7 荷花LFY基因的半定量表达分析第38页
    4.3 结果与分析第38-46页
        4.3.1 荷花不同发育时期不同器官总RNA的提取与检测第38-40页
        4.3.2 荷花AP3基因的时空表达模式研究第40-42页
        4.3.3 荷花AP3基因的半定量表达分析第42-43页
        4.3.4 荷花LFY基因的时空表达模式研究第43-45页
        4.3.5 荷花LFY基因的半定量表达分析第45-46页
5 结论与讨论第46-48页
    5.1 结论第46页
    5.2 讨论第46-48页
        5.2.1 AP3的表达特性讨论第47页
        5.2.2 LFY的表达特性讨论第47-48页
参考文献第48-61页
英文摘要第61-62页

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