致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-20页 |
1.1 高等植物的花发育机理研究 | 第9-10页 |
1.2 MADS-box基因与ABCDE模型 | 第10-13页 |
1.2.1 MADS-box基因的结构与功能 | 第10-11页 |
1.2.2 ABCDE模型及相关基因研究 | 第11-13页 |
1.2.2.1 A功能基因 | 第11-12页 |
1.2.2.2 B功能基因 | 第12页 |
1.2.2.3 C/D类功能基因 | 第12-13页 |
1.2.2.4 E功能基因 | 第13页 |
1.3 成花相关基因研究 | 第13-15页 |
1.3.1 花分生组织特性基因 | 第13-14页 |
1.3.2 花器官特性基因 | 第14页 |
1.3.3 花时基因 | 第14-15页 |
1.4 LEAFY(LFY)同源基因研究进展 | 第15-17页 |
1.4.1 LFY同源基因的结构研究 | 第15页 |
1.4.2 LFY基因及其同源基因的功能研究 | 第15-16页 |
1.4.3 LFY基因及其同源基因的表达研究 | 第16-17页 |
1.5 APETALA3(AP3)基因研究进展 | 第17-18页 |
1.6 荷花的概述 | 第18-20页 |
2 引言 | 第20-21页 |
3 荷花AP3基因的克隆研究及生物学分析 | 第21-35页 |
3.1 试验材料 | 第21-22页 |
3.1.1 植物材料 | 第21页 |
3.1.2 试验试剂、试剂盒等 | 第21页 |
3.1.3 试验仪器 | 第21-22页 |
3.1.4 实验工具与耗材 | 第22页 |
3.1.5 引物合成与测序 | 第22页 |
3.2 试验方法 | 第22-25页 |
3.2.1. 总RNA的提取与纯化 | 第22-23页 |
3.2.1.1 总RNA的提取 | 第22页 |
3.2.1.2 RNA浓度、纯度和质量的检测 | 第22-23页 |
3.2.2 荷花AP3基因保守区的克隆 | 第23-25页 |
3.2.2.1 cDNA第一链的合成 | 第23页 |
3.2.2.2 引物的设计 | 第23页 |
3.2.2.3 PCR扩增 | 第23页 |
3.2.2.4 PCR产物的回收 | 第23-24页 |
3.2.2.5 目的片段与pUCm-T载体的连接 | 第24页 |
3.2.2.6 感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
3.2.2.7 感受态细胞的转化与鉴定 | 第25页 |
3.2.2.8 重组质粒的PCR检测 | 第25页 |
3.3 结果与分析 | 第25-35页 |
3.3.1. 荷花花瓣总RNA的提取与检测 | 第25-26页 |
3.3.1.1 RNA电泳结果分析 | 第25-26页 |
3.3.1.2 分光光度计检测RNA结果分析 | 第26页 |
3.3.2 荷花AP3基因保守区序列的扩增结果 | 第26-27页 |
3.3.3 荷花AP3基因cDNA序列及其编码产物的同源性分析 | 第27-30页 |
3.3.4 荷花AP3基因片段氨基酸编码产物同源性分析 | 第30-33页 |
3.3.5 AP3基因编码的蛋白质结构的预测 | 第33-34页 |
3.3.6 荷花AP3基因编码的蛋白质保守区的预测及分析 | 第34-35页 |
4 荷花AP3基因和LFY基因的时空表达 | 第35-46页 |
4.1 试验材料 | 第35页 |
4.1.1 植物材料 | 第35页 |
4.1.2 试验试剂 | 第35页 |
4.1.3 试验仪器 | 第35页 |
4.1.4 实验工具与耗材 | 第35页 |
4.1.5 引物合成与测序 | 第35页 |
4.2 试验方法 | 第35-38页 |
4.2.1 总RNA的提取与纯化 | 第35-36页 |
4.2.1.1 总RNA的提取 | 第35页 |
4.2.1.2 RNA浓度、纯度和质量的检测 | 第35-36页 |
4.2.2 cDNA第一链的合成 | 第36页 |
4.2.3 引物的设计 | 第36-37页 |
4.2.4 荷花AP3基因的实时荧光定量PCR反应 | 第37页 |
4.2.5 荷花AP3基因的半定量表达分析 | 第37页 |
4.2.6 荷花LFY基因的实时荧光定量PCR反应 | 第37-38页 |
4.2.7 荷花LFY基因的半定量表达分析 | 第38页 |
4.3 结果与分析 | 第38-46页 |
4.3.1 荷花不同发育时期不同器官总RNA的提取与检测 | 第38-40页 |
4.3.2 荷花AP3基因的时空表达模式研究 | 第40-42页 |
4.3.3 荷花AP3基因的半定量表达分析 | 第42-43页 |
4.3.4 荷花LFY基因的时空表达模式研究 | 第43-45页 |
4.3.5 荷花LFY基因的半定量表达分析 | 第45-46页 |
5 结论与讨论 | 第46-48页 |
5.1 结论 | 第46页 |
5.2 讨论 | 第46-48页 |
5.2.1 AP3的表达特性讨论 | 第47页 |
5.2.2 LFY的表达特性讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-61页 |
英文摘要 | 第61-62页 |