| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语中英文对照 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒研究进展 | 第12-18页 |
| 1 PRRSV病原学 | 第12-13页 |
| 1.1 基因组结构 | 第12页 |
| 1.2 PRRSV蛋白 | 第12-13页 |
| 1.3 PRRSV的理化特性 | 第13页 |
| 2 PRRSV致病机制 | 第13-14页 |
| 2.1 PRRSV的感染 | 第13-14页 |
| 2.2 PRRSV的持续性感染 | 第14页 |
| 2.3 抗体依赖性增强作用(antibody dependent enhancement,ADE) | 第14页 |
| 3 PRRSV免疫学研究 | 第14-16页 |
| 3.1 细胞免疫 | 第14-15页 |
| 3.2 体液免疫 | 第15页 |
| 3.3 细胞因子 | 第15-16页 |
| 4 PRRSV疫苗 | 第16页 |
| 5 猪品种间对PRRSV抗性差异 | 第16-18页 |
| 第二章 猪外周血单核细胞来源的巨噬细胞PRRSV感染模型的建立 | 第18-32页 |
| 1 材料和方法 | 第18-24页 |
| 1.1 病毒、菌种、载体和断奶仔猪的来源 | 第18页 |
| 1.2 试验试剂与耗材 | 第18页 |
| 1.3 鉴定PRRSV-NJGC病毒株的高致病性 | 第18-20页 |
| 1.3.1 PRRSV的培养和滴度测定 | 第18-19页 |
| 1.3.2 PRRSV抗原和抗体的检测 | 第19-20页 |
| 1.3.3 PRRSV-NJGC病毒株的致病性鉴定 | 第20页 |
| 1.4 外周血单核细胞来源的巨噬细胞PRRSV感染模型的建立 | 第20-22页 |
| 1.4.1 外周血单核细胞(PBMC)的分离 | 第20-21页 |
| 1.4.2 单核细胞来源的巨噬细胞(MDMs)的制备 | 第21页 |
| 1.4.3 肺泡巨噬细胞(PAM)的制备 | 第21页 |
| 1.4.4 MDMs和PAM表面抗原检测 | 第21页 |
| 1.4.5 MDMs和PAM吞噬功能检测 | 第21-22页 |
| 1.4.6 PRRSV在MDMs和PAM的生长趋势 | 第22页 |
| 1.4.7 GM-CSF刺激PBMC生成巨噬细胞(MDMs)的条件优化 | 第22页 |
| 1.5 荧光定量PCR条件的优化 | 第22-24页 |
| 1.5.1 荧光定量PCR标准质粒的建立 | 第22-23页 |
| 1.5.2 荧光定量PCR条件的优化和标准曲线的建立 | 第23-24页 |
| 2 结果和分析 | 第24-31页 |
| 2.0 扩繁后的PRRSV滴度的测定 | 第24-25页 |
| 2.1 仔猪的体温和体重的变化 | 第25页 |
| 2.2 仔猪组织病理学变化 | 第25-26页 |
| 2.2.3 病死猪各组织中PRRSV的分布 | 第26页 |
| 2.3 PAMs和MDMs形态特征 | 第26-27页 |
| 2.4 PAMs和MDMs细胞表面抗原分子 | 第27页 |
| 2.5 PAMs和MDMs吞噬功能 | 第27-28页 |
| 2.6 PRRSV在PAMs和MDMs中的生长趋势 | 第28页 |
| 2.7 接入PRRSV后,培养液病毒滴底的变化趋势 | 第28-29页 |
| 2.8 GM-CSF刺激单核细胞条件的优化 | 第29页 |
| 2.9 荧光定量PCR标准曲线的建立和线性回归方程的确定 | 第29-31页 |
| 3 讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 江苏省地方猪种对PRRSV的易感性的差异 | 第32-36页 |
| 1 材料和方法 | 第32-33页 |
| 1.1 试验材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 试验对象 | 第32页 |
| 1.1.2 病毒、菌种和载体 | 第32-33页 |
| 1.1.3 试验试剂与耗材 | 第33页 |
| 1.2 方法 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-34页 |
| 2.1 总RNA后的电泳检测 | 第33页 |
| 2.2 PRRSV在不同猪种MDMs中的的病毒载量 | 第33-34页 |
| 2.3 PRRSV在感染不同品种猪的MDMs后培养液的滴度 | 第34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 不同品种猪之间在感染PRRSV后细胞因子表达的差异 | 第36-41页 |
| 1 材料和方法 | 第36页 |
| 1.1 试验材料 | 第36页 |
| 1.2 方法 | 第36页 |
| 1.3 荧光定量PCR标准曲线的建立和线性回归方程的确定 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-39页 |
| 2.1 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第36-37页 |
| 2.2 不同品种猪MDMs感染PRRSV后IL-8 mRNA表达丰度 | 第37-38页 |
| 2.3 不同品种猪MDMs感染PRRSV后IL-10 mRNA表达丰度 | 第38-39页 |
| 2.4 不同品种猪MDMs感染PRRSV后TNF-α mRNA表达丰度 | 第39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 全文总结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 附录1 主要仪器设备及化学试剂 | 第47-48页 |
| 附录2 研究所使用的主要试剂 | 第48-49页 |
| 附录3 主要试剂的配制 | 第49页 |
