| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 RLCK生物学功能 | 第11-13页 |
| 1.1.1 RLCK参与植物的免疫反应 | 第11-12页 |
| 1.1.2 RLCK影响植物的生长发育 | 第12-13页 |
| 1.2 USP的调控机制研究 | 第13-15页 |
| 1.3 蛋白互作研究方法 | 第15-16页 |
| 1.3.1 酵母双杂交 | 第15页 |
| 1.3.2 免疫共沉淀 | 第15-16页 |
| 1.3.3 双分子荧光互补技术 | 第16页 |
| 1.4 本课题的研究目的及意义 | 第16-18页 |
| 第二章 玉米类受体蛋白激酶STK1的USP结构域克隆与表达 | 第18-36页 |
| 2.1 材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第18页 |
| 2.1.3 试验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第19页 |
| 2.1.5 主要溶液 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 STK1-USP克隆载体构建 | 第20-25页 |
| 2.2.2 STK1-USP表达载体构建 | 第25-27页 |
| 2.2.3 His-STK1-USP融合蛋白的原核表达 | 第27-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 STK1-USP克隆载体构建 | 第30-31页 |
| 2.3.2 STK1-USP表达载体构建 | 第31-32页 |
| 2.3.3 His-STK1-USP融合蛋白的原核表达 | 第32-35页 |
| 2.4 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 玉米类受体蛋白激酶STK1互作蛋白的筛选 | 第36-51页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 动植物材料 | 第36页 |
| 3.1.2 菌株 | 第36页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第36页 |
| 3.1.4 试验仪器 | 第36页 |
| 3.1.5 主要溶液 | 第36-37页 |
| 3.2 方法 | 第37-43页 |
| 3.2.1 STK1的表达与纯化 | 第37-39页 |
| 3.2.2 STK1免疫抗体亲和纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.3 Tris-HCl提花粉蛋白 | 第40-41页 |
| 3.2.4 STK1抗体的初步检测 | 第41页 |
| 3.2.5 STK1抗体的免疫沉淀(IP)检测 | 第41-42页 |
| 3.2.6 Co-IP筛选STK1的互作蛋白 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
| 3.3.1 STK1表达与纯化 | 第43-44页 |
| 3.3.2 花粉全蛋白裂解效果检测 | 第44页 |
| 3.3.3 STK1抗体的Western blot检测 | 第44-45页 |
| 3.3.4 STK1抗体的免疫沉淀(IP)检测 | 第45-46页 |
| 3.3.5 STK1互作蛋白筛选 | 第46页 |
| 3.3.6 质谱分析 | 第46-49页 |
| 3.4 小结 | 第49-51页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
