致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
文中主要的英文缩写 | 第10-13页 |
1 文献综述 | 第13-25页 |
1.1 miRNA与靶基因互作参与植物发育调控 | 第13-15页 |
1.1.1 miRNA及其作用机理 | 第13-14页 |
1.1.2 miRNA参与调节植物生长发育 | 第14-15页 |
1.2 miR156/157-SPL互作调控植物的生长发育 | 第15-21页 |
1.2.1 miR156/157家族 | 第15-16页 |
1.2.2 植物SPL基因家族 | 第16-17页 |
1.2.3 miRNA156/157介导的SPL调控影响植物发育 | 第17-20页 |
1.2.4 miRNA156/157介导的SPL调控影响开花进程 | 第20-21页 |
1.2.5 miRNA156/157介导的SPL调控影响其他生长发育过程 | 第21页 |
1.3 miRNA-靶基因互作影响植物发育的其他研究进展 | 第21-23页 |
1.3.1 miR172介导的AP2调控影响植物发育 | 第21-22页 |
1.3.2 其他miRNA-靶基因互作影响植物发育的研究进展 | 第22-23页 |
1.4 本课题的引出 | 第23-25页 |
2 黄瓜CsSPL同源基因的克隆和表达载体构建 | 第25-43页 |
2.1 材料与试剂 | 第25页 |
2.1.1 材料 | 第25页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-33页 |
2.2.1 黄瓜育苗及培养 | 第25-26页 |
2.2.2 黄瓜SPL同源基因克隆 | 第26-31页 |
2.2.3 过表达载体的构建及验证 | 第31页 |
2.2.4 表达载体转化农杆菌 | 第31-32页 |
2.2.5 目的基因在黄瓜中的表达检测 | 第32-33页 |
2.3 实验结果 | 第33-40页 |
2.3.1 候选基因的确定 | 第33页 |
2.3.2 候选基因序列比较及命名 | 第33-35页 |
2.3.3 候选基因在黄瓜中的表达检测 | 第35-37页 |
2.3.4 CsSPL9和CsSPL13基因过表达载体的构建 | 第37-40页 |
2.4 分析与讨论 | 第40-43页 |
2.4.1 黄瓜中的CsSPL基因 | 第40-42页 |
2.4.2 CsSPL9和CsSPL13过表达载体构建 | 第42-43页 |
3 转基因拟南芥的获取及表型分析 | 第43-63页 |
3.1 材料与试剂 | 第43页 |
3.1.1 材料 | 第43页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第43页 |
3.2 方法 | 第43-47页 |
3.2.1 拟南芥育苗及培养 | 第43-44页 |
3.2.2 拟南芥转基因及筛选 | 第44页 |
3.2.3 转基因植株RNA的提取及SPL基因表达验证 | 第44-45页 |
3.2.4 表型观察及数据统计 | 第45-46页 |
3.2.5 开花基因定量检测 | 第46-47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-58页 |
3.3.1 转基因植株的获取及验证 | 第47-49页 |
3.3.2 CsSPL的异源表达影响拟南芥主根生长 | 第49-51页 |
3.3.3 CsSPL的异源表达影响拟南芥抽苔时间 | 第51-52页 |
3.3.4 CsSPL的异源表达不影响拟南芥抽苔时莲座叶数量 | 第52页 |
3.3.5 CsSPL的异源表达影响拟南芥开花时间 | 第52-55页 |
3.3.6 CsSPL的异源表达影响拟南芥开花基因的表达 | 第55-57页 |
3.3.7 其它表型检测比较 | 第57-58页 |
3.4 分析与讨论 | 第58-63页 |
4 总结与展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录一 常用培养基配方 | 第71-72页 |
附录二 常用抗生素和激素的配制 | 第72页 |