致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩写表 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-26页 |
1.1 UFM1以及UFM1级联反应 | 第12-17页 |
1.1.1 类泛素化 | 第12页 |
1.1.2 类泛素化蛋白UFM1以及UFM1级联反应 | 第12-13页 |
1.1.3 UFM1级联反应中的激酶 | 第13-15页 |
1.1.4 UFM1以及UFM1级联反应的功能 | 第15-17页 |
1.2 UFM1级联反应与NF-κB信号通路 | 第17-18页 |
1.3 NF-κB信号通路 | 第18-26页 |
1.3.1 NF-κB家族成员 | 第18-19页 |
1.3.2 IKK复合物 | 第19页 |
1.3.3 IκB蛋白家族 | 第19-20页 |
1.3.4 NF-κB通路中的接头蛋白TRAFs和RIPs | 第20-21页 |
1.3.5 NF-κB的转录调控 | 第21-22页 |
1.3.6 NF-κB信号终止 | 第22-23页 |
1.3.7 NF-κB的功能 | 第23-26页 |
2 材料与方法 | 第26-44页 |
2.1 实验材料 | 第26-31页 |
2.1.1 细胞株 | 第26页 |
2.1.2 菌株 | 第26页 |
2.1.3 质粒与shRNA | 第26-28页 |
2.1.4 实时定量PCR引物序列 | 第28页 |
2.1.5 siRNA序列 | 第28-29页 |
2.1.6 相关抗体 | 第29-30页 |
2.1.7 分子克隆相关酶与Marker | 第30页 |
2.1.8 相关试剂与试剂盒 | 第30页 |
2.1.9 实验室相关仪器与耗材 | 第30-31页 |
2.2 实验试剂 | 第31-35页 |
2.2.1 分子生物学相关试剂 | 第31-33页 |
2.2.2 细胞与蛋白相关试剂 | 第33-35页 |
2.3 实验方法 | 第35-44页 |
2.3.1 DNA电泳 | 第35页 |
2.3.2 细菌转化 | 第35页 |
2.3.3 质粒构建 | 第35-36页 |
2.3.4 质粒提取 | 第36-37页 |
2.3.5 细胞培养 | 第37-38页 |
2.3.6 细胞转染 | 第38页 |
2.3.7 免疫共沉淀(Co-IP) | 第38-39页 |
2.3.8 类泛素化修饰(Ufinylation) | 第39页 |
2.3.9 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第39-40页 |
2.3.10 实时定量PCR(Real-time PCR) | 第40-42页 |
2.3.11 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第42页 |
2.3.12 激光共聚焦免疫荧光 | 第42-44页 |
3 实验结果 | 第44-52页 |
3.1 UFM1调控NF-κB转录活性及其下游靶基因表达 | 第44-45页 |
3.2 p3×Flag-IKKβ质粒构建 | 第45-47页 |
3.3 UFM1类泛素化修饰IKKβ蛋白 | 第47-48页 |
3.4 UFM1调控NF-κB信号通路的分子机制研究 | 第48-49页 |
3.5 UFM1调控p65的核定位 | 第49-52页 |
4 结果与讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |