| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-26页 |
| 1.1 选题背景与意义 | 第9页 |
| 1.2 基因编辑及调控工具 | 第9-18页 |
| 1.2.1 梓指核酸酶（Zinc Finger nuclease, ZFN) | 第10-11页 |
| 1.2.2 转录激活效应因子核酸酶（Transcription activator-like effector nucleases, TALEN) | 第11-13页 |
| 1.2.3 Cas9-sgRNA | 第13-18页 |
| 1.3 CRISPR-Cas系统 | 第18-20页 |
| 1.3.1 CRISPR系统的发现过程 | 第18页 |
| 1.3.2 CRISPR系统的作用机制 | 第18-19页 |
| 1.3.3 CRISPR系统的分类 | 第19-20页 |
| 1.4 CRISPR-Cpfl系统的简介 | 第20-21页 |
| 1.5 CRISPR-Cas系统的应用 | 第21-24页 |
| 1.5.1 全基因组筛选 | 第21-22页 |
| 1.5.2 基因组成像 | 第22页 |
| 1.5.3 疾病模型的构建 | 第22-23页 |
| 1.5.4 疾病的治疗 | 第23页 |
| 1.5.5 抗菌剂及抗病毒剂 | 第23-24页 |
| 1.6 主要研究内容及技术路线 | 第24-26页 |
| 1.6.1 主要研究内容 | 第24页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第24-26页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第26-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验菌株及试剂 | 第26页 |
| 2.1.2 溶液配制 | 第26-27页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 克隆构建方法 | 第27-30页 |
| 2.2.2 流式细胞仪荧光定量检测方法 | 第30-31页 |
| 2.2.3 PAM序列富集测试方法 | 第31-34页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第34-52页 |
| 3.1 结果 | 第34-50页 |
| 3.1.1 FndCpfl不同突变位点对抑制作用的影响 | 第34-35页 |
| 3.1.2 FndCpfl在启动子区的抑制作用 | 第35-36页 |
| 3.1.3 FndCpfl在编码区的抑制作用 | 第36-38页 |
| 3.1.4 不同sgRNA设计对抑制作用的影响 | 第38-41页 |
| 3.1.5 FndCpfl同时作用于编码区多个位点的抑制作用 | 第41-44页 |
| 3.1.6 PAM序列对FndCpfl抑制作用的影响 | 第44-50页 |
| 3.2 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-65页 |
| 附录 | 第65-71页 |
| 报告质粒中的启动子序列信息 | 第65页 |
| 不同PAM序列下的报告质粒的荧光值及流式峰图 | 第65-66页 |
| sfGFP序列信息 | 第66页 |
| FndCpfl不同PAM序列及对应的荧光值 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第72页 |
