| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 第1章 引言 | 第9-15页 |
| 1.1 嗜水气单胞菌概述 | 第9页 |
| 1.2 嗜水气单胞菌流行病学 | 第9-10页 |
| 1.3 嗜水气单胞菌致病因子 | 第10-11页 |
| 1.3.1 毒力因子 | 第10-11页 |
| 1.4 细菌粘附的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.4.1 粘附模型建立 | 第11页 |
| 1.4.2 粘附机制的研究 | 第11-12页 |
| 1.4.3 影响粘附的相关因子 | 第12-13页 |
| 1.4.4 粘附研究方法 | 第13-15页 |
| 第2章 理化因子对嗜水气单胞菌粘附的影响研究 | 第15-24页 |
| 2.1 材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 试验用菌和鱼 | 第15页 |
| 2.1.2 试剂 | 第15页 |
| 2.1.3 器材 | 第15-16页 |
| 2.2 试验方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 鳗鲡表皮黏液制备 | 第16页 |
| 2.2.2 菌株培养及菌悬液制备 | 第16页 |
| 2.2.3 体外黏附及间接ELISA检测 | 第16页 |
| 2.2.4 OD492检测黏附的灵敏度 | 第16页 |
| 2.2.5 理化因子对嗜水气单胞菌黏附的影响 | 第16-17页 |
| 2.3 数据处理 | 第17页 |
| 2.4 试验结果 | 第17-22页 |
| 2.4.1 OD_(492)检测黏附的灵敏度 | 第17-18页 |
| 2.4.2 菌浓度与黏附量的关系 | 第18-19页 |
| 2.4.3 孵育时间对黏附的影响 | 第19页 |
| 2.4.4 温度对黏附的影响 | 第19-20页 |
| 2.4.5 pH对黏附的影响 | 第20-21页 |
| 2.4.6 Na~+对黏附的影响 | 第21页 |
| 2.4.7 Mg~(2+)对黏附的影响 | 第21-22页 |
| 2.5 讨论 | 第22-24页 |
| 第3章 嗜水气单胞菌粘附突变库构建和筛选 | 第24-37页 |
| 3.1 材料 | 第24-25页 |
| 3.1.1 试验用菌和鱼 | 第24页 |
| 3.1.2 试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.3 器材 | 第25页 |
| 3.2 试验方法 | 第25-32页 |
| 3.2.1 构建突变库 | 第25-27页 |
| 3.2.2 嗜水气单胞菌粘附缺陷突变株的筛选 | 第27-28页 |
| 3.2.3 PCR鉴定突变株 | 第28-29页 |
| 3.2.4 Southern blot鉴定 | 第29-32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-36页 |
| 3.3.1 pLOF/Km质粒提取及转化E.coli Sm10 | 第32页 |
| 3.3.2 粘附缺陷突变株筛选 | 第32-33页 |
| 3.3.3 突变株的鉴定 | 第33-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-37页 |
| 第4章 嗜水气单胞菌粘附相关基因鉴定及flgC基因互补菌株的构建 | 第37-54页 |
| 4.1 材料 | 第37-39页 |
| 4.1.1 试验用菌和载体 | 第37-38页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.3 主要试验仪器 | 第39页 |
| 4.2 试验方法 | 第39-47页 |
| 4.2.1 基因组DNA的提取 | 第39页 |
| 4.2.2 TAIL-PCR克隆侧翼序列 | 第39-42页 |
| 4.2.3 PCR产物连接、转化和测序 | 第42页 |
| 4.2.4 测序分析 | 第42页 |
| 4.2.5 flgC互补菌株构建 | 第42-47页 |
| 4.3 结果 | 第47-52页 |
| 4.3.1 Tail-PCR的结果 | 第47-49页 |
| 4.3.2 基因测序结果 | 第49-51页 |
| 4.3.3 flgC基因互补菌株构建结果 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第5章 粘附相关基因—flgC生物学功能研究 | 第54-61页 |
| 5.1 试验材料 | 第54-55页 |
| 5.1.1 试验菌株和鱼 | 第54页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第54-55页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 5.2 试验方法 | 第55-57页 |
| 5.2.1 生长曲线 | 第55页 |
| 5.2.2 运动性 | 第55页 |
| 5.2.3 毛细管趋化 | 第55页 |
| 5.2.4 粘附 | 第55-56页 |
| 5.2.5 生物膜 | 第56页 |
| 5.2.6 胞内存活 | 第56-57页 |
| 5.3 结果 | 第57-60页 |
| 5.3.1 生长曲线 | 第57页 |
| 5.3.2 运动性 | 第57-58页 |
| 5.3.3 毛细管趋化 | 第58页 |
| 5.3.4 粘附 | 第58-59页 |
| 5.3.5 生物膜 | 第59页 |
| 5.3.6 胞内存活 | 第59-60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-61页 |
| 第6章 小结与展望 | 第61-63页 |
| 6.1 小结 | 第61-62页 |
| 6.2 展望 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第72页 |