摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第11-17页 |
1.1 大黄鱼的养殖现状及面临的问题 | 第11页 |
1.2 副溶血弧菌 | 第11页 |
1.3 鱼类的免疫系统 | 第11-16页 |
1.3.1 鱼类的免疫组织和器官 | 第11页 |
1.3.2 细胞免疫 | 第11-12页 |
1.3.3 体液免疫 | 第12-16页 |
1.4 研究内容和目的意义 | 第16-17页 |
1.4.1 研究内容 | 第16页 |
1.4.2 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-25页 |
2.1 材料 | 第17-20页 |
2.1.1 实验动物 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
2.1.3 引物 | 第18-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第20-21页 |
2.2.2 cDNA第一链的合成和基因片段的获得 | 第21页 |
2.2.3 SMART-RACE技术获取基因全长 | 第21-22页 |
2.2.4 割胶纯化基因片段 | 第22-23页 |
2.2.5 与PET19-T质粒载体连接 | 第23页 |
2.2.6 JM109感受态细胞的转化及筛选 | 第23页 |
2.2.7 质粒插入片段的PCR检测 | 第23页 |
2.2.8 质粒测序 | 第23-24页 |
2.2.9 目的基因的生物信息学分析 | 第24页 |
2.2.10 实时荧光定量PCR反应体系及条件 | 第24-25页 |
第3章 结果 | 第25-40页 |
3.1 大黄鱼性腺、脾脏及其他各组织总RNA的质量 | 第25页 |
3.2 TNFR基因的克隆和序列分析 | 第25-30页 |
3.2.1 TNFR基因的克隆 | 第25-26页 |
3.2.2 TNFR的cDNA序列分析 | 第26-27页 |
3.2.3 大黄鱼Lc TNFR空间模拟结构预测及系统进化树构建 | 第27-30页 |
3.3 IgH基因的克隆和序列分析 | 第30-35页 |
3.3.1 IgH基因的克隆 | 第30页 |
3.3.2 IgH的cDNA序列分析 | 第30-32页 |
3.3.3 IgH的同源性分析和系统发育分析 | 第32-35页 |
3.4 免疫基因在不同组织器官中的表达结果 | 第35-36页 |
3.4.1 大黄鱼LcTNFR基因在不同组织器官中的差异性表达结果 | 第35-36页 |
3.4.2 大黄鱼LcIgH基因在不同组织器官中的差异性表达结果 | 第36页 |
3.5 大黄鱼免疫相关基因在应激情况下的表达 | 第36-40页 |
第4章 讨论 | 第40-45页 |
4.1 肿瘤坏死因子受体TNFR | 第40-41页 |
4.2 免疫球蛋白重链IgH | 第41-42页 |
4.3 其它免疫相关基因 | 第42-45页 |
4.3.1 主要组织相容性复合体MHC基因 | 第42页 |
4.3.2 趋化因子CC、CCL、CCL114和SDF-1 基因 | 第42-43页 |
4.3.3 Toll信号通路其它相关基因TNFR13B、TLR9、TLR22、IL8、IL10、IRF1、Caspass9和Rac | 第43-44页 |
4.3.4 补体1抑制因子、β2-微球蛋白和臂板蛋白 | 第44-45页 |
第5章 结论和展望 | 第45-46页 |
5.1 结论 | 第45页 |
5.2 展望 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
在学期间发表的学术论文 | 第54页 |