摘要 | 第3-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
缩略词表 | 第12-18页 |
第一章 文献综述和选题依据 | 第18-38页 |
1 引言 | 第18-19页 |
2 心肌细胞增殖潜力研究进展 | 第19-22页 |
2.1 心肌细胞具有增殖潜力 | 第19页 |
2.2 心肌细胞增殖的细胞来源 | 第19-20页 |
2.3 心肌细胞增殖调控 | 第20-22页 |
3 心梗的干细胞治疗研究进展 | 第22-25页 |
3.1 心脏移植和干细胞疗法 | 第22-23页 |
3.2 自体骨髓干细胞动员 | 第23-24页 |
3.3 骨髓干细胞动员研究进展 | 第24-25页 |
4 粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的干细胞动员作用 | 第25-30页 |
4.1 粒细胞集落刺激因子的生物学作用 | 第25-28页 |
4.2 粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对心脏的作用 | 第28-29页 |
4.3 G-CSF动员干细胞向损伤部位迁移,介导通过旁分泌机制修复心肌 | 第29-30页 |
5 运动促进心梗后心肌细胞增殖 | 第30-33页 |
5.1 运动可显著改善心梗后的心功能 | 第30页 |
5.2 运动可促进心肌细胞增殖 | 第30-31页 |
5.3 间歇运动比持续有氧运动能更有效改善心功能 | 第31页 |
5.4 运动促进心肌细胞增殖的可能机制 | 第31-33页 |
6 FGF1通过通路促进细胞增殖,抑制细胞凋亡 | 第33-34页 |
7 选题依据 | 第34-38页 |
第二章 间歇运动和rhG-CSF对骨髓干细胞动员与归巢的影响 | 第38-54页 |
1 背景与目的 | 第38页 |
2 材料与方法 | 第38-44页 |
2.1 主要仪器和试剂 | 第38-39页 |
2.2 动物分组与心梗模型制备 | 第39-40页 |
2.3 间歇运动和G-CSF及AMD3100给药方案 | 第40页 |
2.4 外周血单个核细胞分离,免疫标记,流式细胞仪检测 | 第40-41页 |
2.5 心肌梗死大鼠梗死边缘区HIF-1α、SDF-1α、c-kit、CD29、CD34蛋白表达Western Blot实验 | 第41-44页 |
2.6 数据统计 | 第44页 |
3 实验结果 | 第44-50页 |
3.1 间歇运动和rhG-CSF均可有效增加外周血c-kit+、CD29+和CD34+细胞数量 | 第44-48页 |
3.2 间歇运动和rhG-CSF均可促进大鼠心梗边缘区HIF-1α和SDF-1蛋白的表达 | 第48-49页 |
3.3 间歇运动和rhG-CSF均可促进大鼠心梗边缘区c-kit、CD29和CD34蛋白的表达 | 第49-50页 |
4 分析与讨论 | 第50-53页 |
5 小结 | 第53-54页 |
第三章 间歇运动和粒细胞集落刺激因子对心梗心肌细胞增殖与心功能的改善作用 | 第54-70页 |
1 背景与目的 | 第54页 |
2 材料与方法 | 第54-58页 |
2.1 主要仪器和试剂 | 第54-55页 |
2.2 动物分组、大鼠心肌梗死模型的建立、间歇运动方案和G-CSF、AMD 3100给药方法 | 第55页 |
2.3 心功能检测方法 | 第55-56页 |
2.4 心肌细胞增殖的免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜观察 | 第56-57页 |
2.4.1 心脏取材、固定及石蜡包埋 | 第56页 |
2.4.2 石蜡包埋和切片程序 | 第56页 |
2.4.3 石蜡免疫荧光染色实验程序: | 第56-57页 |
2.5 心梗边缘区单个心肌细胞钙瞬变和舒缩功能检测 | 第57-58页 |
2.5.1 成体大鼠心肌细胞分离溶液配制 | 第57页 |
2.5.2 成体大鼠心肌细胞分离实验步骤 | 第57-58页 |
2.6 图像采集与数据统计处理 | 第58页 |
3 实验结果 | 第58-66页 |
3.1 间歇运动和粒细胞集落刺激因子显著促进心梗大鼠心肌细胞增殖 | 第58-61页 |
3.2 间歇运动和粒细胞集落刺激因子显著提高大鼠心梗边缘区心肌细胞钙瞬变和收缩功能 | 第61-63页 |
3.3 间歇运动和粒细胞集落刺激因子显著缩小心梗面积 | 第63页 |
3.4 间歇运动和粒细胞集落刺激因子显著改善心梗大鼠心功能 | 第63-66页 |
4 分析与讨论 | 第66-68页 |
5 小结 | 第68-70页 |
第四章 间歇运动和rhG-CSF激活FGF1-PI3K-AKT通路对心梗心肌细胞增殖的影响 | 第70-86页 |
1 背景与目的 | 第70-71页 |
2 外源性注射重组大鼠FGF1对心梗大鼠心肌细胞增殖的影响 | 第71-72页 |
2.1 材料与方法 | 第71页 |
2.2 实验动物与分组 | 第71页 |
2.3 主要仪器与试剂 | 第71页 |
2.4 血清和心肌组织中FGF1的ELISA实验 | 第71-72页 |
2.5 心肌组织caspase3活性检测 | 第72页 |
2.6 免疫荧光法检测心肌细胞增殖 | 第72页 |
3 间歇运动和(或)rhG-CSF激活FGF1-FGF1R-PI3K-AKT通路对心梗心肌细胞增殖的影响 | 第72-75页 |
3.1 实验动物与分组、心梗模型制备和运动方案 | 第72-73页 |
3.2 主要仪器与试剂 | 第73页 |
3.3 RNA提取、反转录和PCR法检测NKX2-5、GATA4的表达 | 第73-75页 |
3.4 心肌细胞凋亡、FGF1信号通路相关因子的Western Blot实验 | 第75页 |
4 实验结果 | 第75-83页 |
4.1 外源性重组大鼠FGF1显著升高心梗大鼠循环和心梗心肌组织FGF1水平 | 第75-76页 |
4.2 外源性重组大鼠FGF1显著降低心梗大鼠心肌组织caspase 3的活性 | 第76页 |
4.3 外源性重组大鼠FGF1显著增加心梗大鼠梗死边缘区心肌细胞增殖的数 | 第76-79页 |
4.4 间歇运动和(或)rhG-CSF促进心梗心脏Nkx2.5和Gata4 mRNA表达 | 第79-80页 |
4.5 间歇运动和(或)rhG-CSF显著降低心梗心肌细胞凋亡 | 第80-81页 |
4.6 间歇运动和(或)rhG-CSF激活心梗心肌FGF1-FGF1R-PI3K-AKT通路 | 第81-83页 |
5 分析与讨论 | 第83-85页 |
6 小结 | 第85-86页 |
全文总结 | 第86-90页 |
参考文献 | 第90-116页 |
致谢 | 第116-118页 |
博士在读期间的研究成果 | 第118页 |