| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第14-33页 |
| 1.1 海洋资源概况 | 第14-18页 |
| 1.1.1 海洋生物和活性物质 | 第15页 |
| 1.1.2 海洋微生物 | 第15-16页 |
| 1.1.3 海洋微生物酶种类 | 第16-18页 |
| 1.2 海绵及共附生微生物 | 第18-21页 |
| 1.2.1 海绵概况 | 第18-20页 |
| 1.2.2 海绵共附生微生物 | 第20-21页 |
| 1.3 微生物脂肪酶的研究 | 第21-27页 |
| 1.3.1 微生物脂肪酶的来源及其筛选方法 | 第21-22页 |
| 1.3.2 微生物脂肪酶的活力测定 | 第22-23页 |
| 1.3.3 微生物脂肪酶的发酵生产 | 第23-25页 |
| 1.3.4 微生物脂肪酶学特性 | 第25-27页 |
| 1.3.5 微生物脂肪酶分子生物学研究进展 | 第27页 |
| 1.4 微生物脂肪酶的应用 | 第27-31页 |
| 1.4.1 生物柴油 | 第28-29页 |
| 1.4.2 去污剂工业 | 第29页 |
| 1.4.3 食品工业 | 第29-30页 |
| 1.4.4 医药工业 | 第30页 |
| 1.4.5 造纸工业 | 第30-31页 |
| 1.4.6 化妆品 | 第31页 |
| 1.4.7 其它应用 | 第31页 |
| 1.5 研究目的、内容与意义 | 第31-33页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第31页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.5.3 研究意义 | 第32页 |
| 1.5.4 研究创新 | 第32-33页 |
| 第二章 脂肪酶高产菌株筛选、产酶条件优化、酶学性质的研究 | 第33-62页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-36页 |
| 2.1.1 海绵及海绵共附生微生物 | 第33-35页 |
| 2.1.2 试剂 | 第35页 |
| 2.1.3 培养基 | 第35-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-43页 |
| 2.2.1 平板筛选方法 | 第36页 |
| 2.2.2 酶活测定方法 | 第36-37页 |
| 2.2.3 菌种鉴定 | 第37-40页 |
| 2.2.4 培养条件及生长曲线测定 | 第40页 |
| 2.2.5 逐因子实验 | 第40-41页 |
| 2.2.6 PB 设计法筛选培养基重要组分 | 第41-42页 |
| 2.2.7 优化培养基水平 | 第42页 |
| 2.2.8 优化培养基验证 | 第42页 |
| 2.2.9 酶活性质研究 | 第42-43页 |
| 2.2.9.1 最适温度的测定 | 第42页 |
| 2.2.9.2 最适pH 值的测定 | 第42-43页 |
| 2.2.9.3 最适盐度的测定 | 第43页 |
| 2.2.9.4 有机溶剂抑制剂对脂肪酶酶的影响 | 第43页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第43-60页 |
| 2.3.1 筛选结果 | 第43-44页 |
| 2.3.2 菌种鉴定 | 第44-46页 |
| 2.3.3 三株菌生长产酶曲线比较 | 第46-48页 |
| 2.3.4 最适碳氮源筛选 | 第48-51页 |
| 2.3.5 Plackett-Burrman 设计筛选影响产酶主效因子 | 第51-54页 |
| 2.3.6 优化培养基水平确定 | 第54页 |
| 2.3.7 优化培养基结果验证 | 第54-56页 |
| 2.3.8 酶学特性 | 第56-60页 |
| 2.4 本章小结 | 第60-62页 |
| 第三章 脂肪酶基因全长克隆及生物信息学分析 | 第62-74页 |
| 3.1 实验材料 | 第62页 |
| 3.1.1 菌种 | 第62页 |
| 3.1.2 试剂 | 第62页 |
| 3.2 实验方法 | 第62-67页 |
| 3.2.1 活性菌总DNA 提取 | 第62页 |
| 3.2.2 Bacillus pumilus B106 脂肪酶基因全长PCR 扩增 | 第62-63页 |
| 3.2.3 PCR 产物回收纯化 | 第63页 |
| 3.2.4 回收片段酶连和转化 | 第63-66页 |
| 3.2.5 测序及系统发育分析 | 第66-67页 |
| 3.2.6 生物信息学分析 | 第67页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第67-73页 |
| 3.3.1 Bacillus pumilus B106 的DNA 提取 | 第67页 |
| 3.3.2 脂肪酶基因扩增结果 | 第67-68页 |
| 3.3.3 回收片段酶连和转化结果 | 第68-69页 |
| 3.3.4 序列分析及BLAST 比对 | 第69页 |
| 3.3.5 生物信息学分析 | 第69-73页 |
| 3.4 本章小结 | 第73-74页 |
| 第四章总结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 附录 | 第79-86页 |
| 附录1.溶液试剂及培养基 | 第79-82页 |
| 附录2.实验所用仪器设备 | 第82-83页 |
| 附录3.海绵共附生细菌的16SrDNA序列 | 第83-85页 |
| 附录4.海绵共附生Bacillus pumilus B106 的lipase的全长序列 | 第85-86页 |
| 论文发表情况 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
