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GAP-43在视网膜干细胞及神经干细胞定向分化过程中的作用机制研究及对比分析

中文摘要第5-8页
Abstract第8-10页
英文缩略词第13-14页
第1章 绪论第14-26页
    1.1 前言第14-15页
    1.2 文献回顾第15-26页
        1.2.1 眼内可能存在的干细胞\前体细胞的部位及类型第15-18页
        1.2.2 其它可应用于眼科的干细胞\前体细胞第18-19页
        1.2.3 视网膜干细胞\前体细胞增殖及分化的可能信号途径第19-21页
        1.2.4 关于GAP-43的文献回顾第21-26页
第2章 GAP-43在新生大鼠视网膜、视网膜干细胞及神经干细胞定向分化过程中表达的研究第26-42页
    2.1 材料与方法第26-34页
        2.1.1 主要实验材料与设备第26-27页
        2.1.2 实验步骤与方法第27-34页
    2.2 结果第34-38页
        2.2.1 新生大鼠视网膜细胞培养及GAP-43表达检测第34页
        2.2.2 RSCs及NSCs的分离、培养、鉴定第34-35页
        2.2.3 RSCs及NSCs的生长曲线的绘制第35页
        2.2.4 RSCs及NSCs的诱导分化及分化后神经细胞标志物的检测第35-36页
        2.2.5 GAP-43及nestin在两种干细胞向神经细胞诱导分化过程中表达及变化的检测第36-38页
        2.2.6 RSCs分化后Thy1.1蛋白质及mRNA的表达的检测第38页
    2.3 讨论第38-42页
        2.3.1 GAP-43在新生大鼠视网膜中的表达及意义第38页
        2.3.2 RSCs及NSCs的分离、培养及鉴定第38-40页
        2.3.3 nestin、GAP-43在干细胞分化过程中的表达及意义第40-42页
第3章 表达外源性GAP-43基因的视网膜干细胞及神经干细胞的定向分化研究第42-60页
    3.1 材料与方法第42-50页
        3.1.1 主要材料及设备第42-44页
        3.1.2 实验步骤与方法第44-50页
    3.2 结果第50-55页
        3.2.1 GAP-43真核表达载体的扩增及序列确认第50-51页
        3.2.2 应用Lipofectamine 2000将GAP-43重组表达载体转染RSCs及NSCs第51-52页
        3.2.3 转染GAP-43的RSCs及NSCs向神经细胞的定向分化情况的变化第52-55页
    3.3 讨论第55-60页
        3.3.1 干细胞的基因修饰第55-56页
        3.3.2 实时荧光定量PCR第56-58页
        3.3.3 将GAP-43基因导入干细胞第58-59页
        3.3.4 GAP-43基因修饰对于干细胞分化的影响第59-60页
第4章 GAP-43基因沉默后视网膜干细胞及神经干细胞的定向分化研究第60-72页
    4.1 材料与方法第60-64页
        4.1.1 主要材料及设备第60-61页
        4.1.2 实验步骤与方法第61-64页
    4.2 结果第64-68页
        4.2.1 pGCsilencerTM U6/Neo/GFP/GAP-43shRNA扩增及序列确认第64页
        4.2.2 将pGCsi-U6/Neo/GFP/GAP-43shRNA转染到RSCs及NSCs内第64-66页
        4.2.3 GAP-43基因沉默的情况下RSCs及NSCs向神经细胞的分化情况第66-68页
    4.3 讨论第68-72页
        4.3.1 RNAi技术的应用第68-69页
        4.3.2 将pGCsi-U6/Neo/GFP/GAP-43shRNA转染到RSCs及NSCs内第69页
        4.3.3 GAP-43沉默后对于RSCs及NSCs分化的影响第69-72页
第5章 结论第72-74页
参考文献第74-82页
附图第82-90页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第90-92页
致谢第92页

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