中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略词 | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第14-26页 |
1.1 前言 | 第14-15页 |
1.2 文献回顾 | 第15-26页 |
1.2.1 眼内可能存在的干细胞\前体细胞的部位及类型 | 第15-18页 |
1.2.2 其它可应用于眼科的干细胞\前体细胞 | 第18-19页 |
1.2.3 视网膜干细胞\前体细胞增殖及分化的可能信号途径 | 第19-21页 |
1.2.4 关于GAP-43的文献回顾 | 第21-26页 |
第2章 GAP-43在新生大鼠视网膜、视网膜干细胞及神经干细胞定向分化过程中表达的研究 | 第26-42页 |
2.1 材料与方法 | 第26-34页 |
2.1.1 主要实验材料与设备 | 第26-27页 |
2.1.2 实验步骤与方法 | 第27-34页 |
2.2 结果 | 第34-38页 |
2.2.1 新生大鼠视网膜细胞培养及GAP-43表达检测 | 第34页 |
2.2.2 RSCs及NSCs的分离、培养、鉴定 | 第34-35页 |
2.2.3 RSCs及NSCs的生长曲线的绘制 | 第35页 |
2.2.4 RSCs及NSCs的诱导分化及分化后神经细胞标志物的检测 | 第35-36页 |
2.2.5 GAP-43及nestin在两种干细胞向神经细胞诱导分化过程中表达及变化的检测 | 第36-38页 |
2.2.6 RSCs分化后Thy1.1蛋白质及mRNA的表达的检测 | 第38页 |
2.3 讨论 | 第38-42页 |
2.3.1 GAP-43在新生大鼠视网膜中的表达及意义 | 第38页 |
2.3.2 RSCs及NSCs的分离、培养及鉴定 | 第38-40页 |
2.3.3 nestin、GAP-43在干细胞分化过程中的表达及意义 | 第40-42页 |
第3章 表达外源性GAP-43基因的视网膜干细胞及神经干细胞的定向分化研究 | 第42-60页 |
3.1 材料与方法 | 第42-50页 |
3.1.1 主要材料及设备 | 第42-44页 |
3.1.2 实验步骤与方法 | 第44-50页 |
3.2 结果 | 第50-55页 |
3.2.1 GAP-43真核表达载体的扩增及序列确认 | 第50-51页 |
3.2.2 应用Lipofectamine 2000将GAP-43重组表达载体转染RSCs及NSCs | 第51-52页 |
3.2.3 转染GAP-43的RSCs及NSCs向神经细胞的定向分化情况的变化 | 第52-55页 |
3.3 讨论 | 第55-60页 |
3.3.1 干细胞的基因修饰 | 第55-56页 |
3.3.2 实时荧光定量PCR | 第56-58页 |
3.3.3 将GAP-43基因导入干细胞 | 第58-59页 |
3.3.4 GAP-43基因修饰对于干细胞分化的影响 | 第59-60页 |
第4章 GAP-43基因沉默后视网膜干细胞及神经干细胞的定向分化研究 | 第60-72页 |
4.1 材料与方法 | 第60-64页 |
4.1.1 主要材料及设备 | 第60-61页 |
4.1.2 实验步骤与方法 | 第61-64页 |
4.2 结果 | 第64-68页 |
4.2.1 pGCsilencerTM U6/Neo/GFP/GAP-43shRNA扩增及序列确认 | 第64页 |
4.2.2 将pGCsi-U6/Neo/GFP/GAP-43shRNA转染到RSCs及NSCs内 | 第64-66页 |
4.2.3 GAP-43基因沉默的情况下RSCs及NSCs向神经细胞的分化情况 | 第66-68页 |
4.3 讨论 | 第68-72页 |
4.3.1 RNAi技术的应用 | 第68-69页 |
4.3.2 将pGCsi-U6/Neo/GFP/GAP-43shRNA转染到RSCs及NSCs内 | 第69页 |
4.3.3 GAP-43沉默后对于RSCs及NSCs分化的影响 | 第69-72页 |
第5章 结论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
附图 | 第82-90页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第90-92页 |
致谢 | 第92页 |