| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-29页 |
| ·山梨醇在植物中的分布 | 第14-15页 |
| ·山梨醇的功能 | 第15-17页 |
| ·山梨醇是蔷薇科植物主要的光合产物 | 第15页 |
| ·山梨醇是蔷薇科植物运输物质的主要形式 | 第15页 |
| ·山梨醇是蔷薇科植物主要的贮藏物质 | 第15-16页 |
| ·与蔷薇科植物抗逆性密切相关 | 第16-17页 |
| ·可以作为组织培养的碳源物质 | 第17页 |
| ·是一种信号传导分子 | 第17页 |
| ·山梨醇在蔷薇科植物体内的合成与利用 | 第17-28页 |
| ·蔷薇科植物体内山梨醇代谢途径 | 第17-19页 |
| ·山梨醇代谢相关酶（蛋白） | 第19-28页 |
| ·6-磷酸山梨醇脱氢酶（Sorbitol-6-phosphate dehydrogenase，S6PDH；EC 1.1.1.200） | 第19-22页 |
| ·山梨醇-6-磷酸脂酶（Sorbitol-6-phosphate phosphatase，SorPP；EC 3.1.3.50） | 第22页 |
| ·山梨醇运输蛋白（Sorbitol transporter，SOT） | 第22-24页 |
| ·山梨醇脱氢酶（Sorbitol dehydrogenase，SDH；EC1.1.1.14） | 第24-27页 |
| ·山梨醇氧化酶（Sorbitol oxidase，SOX） | 第27-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 苹果6-磷酸山梨醇脱氢酶分子特性研究 | 第29-52页 |
| ·材料和方法 | 第29-37页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-37页 |
| ·核酸的提取 | 第29-30页 |
| ·S6PDH cDNA 克隆 | 第30-31页 |
| ·S6PDH 基因DNA 序列的克隆 | 第31页 |
| ·叶片中山梨醇含量和S6PDH 活性测定 | 第31-32页 |
| ·叶片中S6PDH 基因表达分析 | 第32-33页 |
| ·S6PDH 基因的原核表达、多克隆抗体制备及Western blot 检测. | 第33-34页 |
| ·S6PDH 基因转化猕猴桃 | 第34-35页 |
| ·S6PDH 基因在洋葱表皮细胞中的定位分析 | 第35-36页 |
| ·S6PDH 蛋白在苹果叶片中的细胞免疫学定位 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-50页 |
| ·核酸的浓度和纯度 | 第37-38页 |
| ·S6PDH cDNA 克隆与序列分析 | 第38-41页 |
| ·S6PDH gDNA 克隆与序列分析 | 第41-44页 |
| ·MdS6PDH 基因的原核表达及多克隆抗体特异性验证 | 第44-46页 |
| ·山梨醇含量在叶片生长期中的变化 | 第46页 |
| ·S6PDH 基因表达和酶活性在叶片生长期中的变化 | 第46-47页 |
| ·S6PDH 基因在逆境胁迫下的表达 | 第47页 |
| ·S6PDH 基因转化猕猴桃 | 第47页 |
| ·S6PDH 在洋葱表皮细胞中的定位 | 第47-48页 |
| ·S6PDH 在苹果叶片中的定位 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·苹果S6PDH 基因cDNA 和gDNA 克隆及序列分析 | 第50-51页 |
| ·苹果S6PDH 基因的表达与活性变化 | 第51页 |
| ·苹果S6PDH 的定位 | 第51-52页 |
| 第三章 苹果6-磷酸山梨醇脱氢酶基因启动子克隆及活性分析 | 第52-67页 |
| ·材料和方法 | 第52-59页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-59页 |
| ·苹果叶片基因组DNA 的提取 | 第53页 |
| ·S6PDH 基因启动子的克隆 | 第53-56页 |
| ·启动子全长序列活性验证 | 第56-57页 |
| ·GUS 活性检测 | 第57-58页 |
| ·启动子5`端系列缺失体的构建、鉴定及活性检测 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-66页 |
| ·苹果S6PDH 基因启动子克隆与序列分析 | 第59-62页 |
| ·启动子活性分析 | 第62-63页 |
| ·S6PDH 基因启动子系列缺失体的构建与鉴定 | 第63-64页 |
| ·S6PDH 基因启动子系列缺失体的活性分析 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·启动子的克隆与序列分析 | 第66页 |
| ·启动子缺失体瞬时融合表达载体的构建及对基因表达调控的影响 | 第66-67页 |
| 第四章 苹果山梨醇脱氢酶分子特性研究 | 第67-87页 |
| ·材料和方法 | 第67-70页 |
| ·植物材料 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-70页 |
| ·核酸的提取 | 第67页 |
| ·苹果SDH 基因克隆 | 第67-68页 |
| ·SDH 基因DNA 序列的克隆 | 第68页 |
| ·SDH 基因表达分析 | 第68页 |
| ·SDH 活性测定 | 第68-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-84页 |
| ·SDH cDNA 克隆与序列分析 | 第70-77页 |
| ·三个SDH cDNA 全长克隆 | 第70-73页 |
| ·氨基酸多序列比对及进化树构建 | 第73-74页 |
| ·MdSDH7、MdSDH8、MdSDH9 基因编码氨基酸的生物信息学分析 | 第74-77页 |
| ·SDH gDNA 克隆与序列分析 | 第77-80页 |
| ·SDH 基因Real-time RT-PCR 引物特异性的验证 | 第80-81页 |
| ·果实RGR 和果实生长期内SDH 基因表达和酶活性 | 第81-83页 |
| ·果实不同部位SDH 基因表达和酶活性变化 | 第83-84页 |
| ·不同叶龄叶片中SDH 基因表达和酶活性变化 | 第84页 |
| ·讨论 | 第84-87页 |
| ·苹果SDH 基因家族cDNA 和gDNA 克隆及序列分析 | 第84-85页 |
| ·苹果SDH 基因家族成员的表达 | 第85-87页 |
| 第五章 苹果山梨醇运输蛋白分子特性研究 | 第87-106页 |
| ·材料和方法 | 第87-89页 |
| ·植物材料 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-89页 |
| ·核酸的提取 | 第87页 |
| ·SOT 基因克隆 | 第87页 |
| ·SOT 基因DNA 序列的克隆 | 第87-88页 |
| ·SOT 基因表达分析 | 第88-89页 |
| ·结果与分析 | 第89-104页 |
| ·SOT cDNA 克隆与序列分析 | 第89-98页 |
| ·四个SOT cDNA 全长克隆 | 第89页 |
| ·氨基酸多序列比对及进化树构建 | 第89-96页 |
| ·MdSOT7、MdSOT8、MdSOT9 和 MdSOT10 基因编码氨基酸的生物信息学分析 | 第96-98页 |
| ·SOT gDNA 克隆与序列分析 | 第98-103页 |
| ·SOT 基因Real-time RT-PCR 引物特异性的验证 | 第103-104页 |
| ·SOT 基因在叶片不同发育期的表达 | 第104页 |
| ·SOT 基因在果实不同发育期的表达 | 第104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·苹果山梨醇运输蛋白cDNA 克隆与gDNA 克隆 | 第104-105页 |
| ·苹果SOT 基因家族成员的表达 | 第105-106页 |
| 第六章 结论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简介 | 第118页 |
