| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 猪瘟病原学 | 第12-15页 |
| 1.1.1 病毒结构与复制 | 第12-14页 |
| 1.1.2 病毒遗传多样性 | 第14-15页 |
| 1.2 猪瘟流行病学 | 第15-16页 |
| 1.3 猪瘟诊断进展 | 第16-17页 |
| 1.4 猪瘟免疫进展 | 第17-19页 |
| 第二章 规模化猪场肺脏组织主要病原微生物检测 | 第19-32页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 病原微生物检测 | 第19-24页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第20-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-30页 |
| 2.3.1 猪瘟病毒抗原检测结果及分析 | 第24-25页 |
| 2.3.2 猪繁殖与呼吸综合征抗原检测结果及分析 | 第25页 |
| 2.3.3 猪圆环病毒抗原检测结果及分析 | 第25-26页 |
| 2.3.4 猪链球菌2型(SS2)抗原检测结果及分析 | 第26页 |
| 2.3.5 猪肺炎支原体抗原检测结果及分析 | 第26-27页 |
| 2.3.6 肺脏眼观病变观察 | 第27页 |
| 2.3.7 肺脏临床病变统计 | 第27-28页 |
| 2.3.8 病理组织学变化 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 2016-2017年猪瘟病毒遗传演化分析 | 第32-40页 |
| 3.1 引言 | 第32-33页 |
| 3.2 材料和方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 主要试剂和耗材 | 第33页 |
| 3.2.2 方法与步骤 | 第33-35页 |
| 3.3 结果 | 第35-39页 |
| 3.3.1 E2基因扩增 | 第35-36页 |
| 3.3.2 E2基因遗传进化树构建与分析 | 第36-37页 |
| 3.3.3 CSFV E2基因主要中和抗原区(B/C)氨基酸分析 | 第37-38页 |
| 3.3.4 血清中和实验 | 第38-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 猪瘟病毒2.1d亚型E2蛋白免疫原性分析 | 第40-53页 |
| 4.1 引言 | 第40页 |
| 4.2 材料与方法 | 第40-47页 |
| 4.2.1 主要菌株、毒株、试剂与设备 | 第40-41页 |
| 4.2.2 主要溶液的配制 | 第41-42页 |
| 4.2.3 序列合成 | 第42页 |
| 4.2.4 载体和目的基因的双酶切 | 第42页 |
| 4.2.5 载体和目的基因的连接转化 | 第42-43页 |
| 4.2.6 质粒提取及鉴定 | 第43页 |
| 4.2.7 表达载体转化及诱导表达 | 第43-44页 |
| 4.2.8 SDS-PAGE分析鉴定诱导表达结果 | 第44页 |
| 4.2.9 蛋白的纯化 | 第44-46页 |
| 4.2.10 蛋白浓缩 | 第46页 |
| 4.2.11 动物攻毒保护试验 | 第46页 |
| 4.2.12 病毒ELISA抗体和中和抗体检测 | 第46-47页 |
| 4.2.13 剖检组织病理变化 | 第47页 |
| 4.2.14 数据统计学分析 | 第47页 |
| 4.3 结果 | 第47-51页 |
| 4.3.1 质粒构建 | 第47-48页 |
| 4.3.2 蛋白表达及纯化、验证 | 第48页 |
| 4.3.3 Western blot | 第48-49页 |
| 4.3.4 疫苗免疫后观察 | 第49-50页 |
| 4.3.5 疫苗免疫后增重观察 | 第50页 |
| 4.3.6 ELISA抗体和中和抗体检测 | 第50-51页 |
| 4.3.7 仔猪攻毒后临床症状及病理变化 | 第51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 总结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第61-62页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第62页 |