中文摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 玉米赤霉烯酮的研究进展 | 第13-18页 |
1.1 玉米赤霉烯酮的简介 | 第13页 |
1.2 玉米赤霉烯酮的污染现状 | 第13-14页 |
1.3 玉米赤霉烯酮的毒性及其作用机理 | 第14-18页 |
2 MicroRNA的概述 | 第18-21页 |
2.1 MiRNA的生物合成和生物学功能 | 第19-20页 |
2.2 MiRNA与肿瘤 | 第20-21页 |
3 研究目的及意义 | 第21-22页 |
第二章 ZEA对TM3细胞增殖和迁移的影响 | 第22-36页 |
1 材料 | 第22-23页 |
1.1 细胞株 | 第22页 |
1.2 主要试剂 | 第22页 |
1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
1.4 溶液配制 | 第23页 |
2 方法 | 第23-29页 |
2.1 细胞培养、冻存与复苏 | 第23-24页 |
2.2 TM3细胞的鉴定 | 第24页 |
2.3 细胞染毒 | 第24页 |
2.4 细胞增殖活力的检测 | 第24-25页 |
2.5 RTCA监测染毒细胞指数 | 第25页 |
2.6 Transwell检测细胞迁移 | 第25-26页 |
2.7 RTCA监测染毒细胞迁移指数 | 第26页 |
2.8 细胞周期的检测 | 第26-27页 |
2.9 CycLin D1、Cdk4蛋白水平的检测 | 第27-29页 |
3 结果 | 第29-34页 |
3.1 TM3细胞的培养与鉴定 | 第29-30页 |
3.2 ZEA对TM3细胞的增殖活力的影响 | 第30页 |
3.3 不同浓度的ZEA对TM3细胞指数的影响 | 第30-31页 |
3.4 TransweLL检测ZEA对TM3细胞迁移的影响 | 第31-32页 |
3.5 RTCA监测ZEA对TM3细胞迁移的影响 | 第32页 |
3.6 ZEA对TM3细胞周期及其调控蛋白的影响 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
第三章 ZEA对TM3细胞microRNA表达的影响 | 第36-45页 |
1 材料 | 第36-37页 |
1.1 测序样本 | 第36-37页 |
1.2 主要试剂 | 第37页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第37页 |
2 方法 | 第37-39页 |
2.1 样品制备 | 第37页 |
2.2 RNA的提取 | 第37-38页 |
2.3 RNA的纯度分析 | 第38页 |
2.4 MicroRNA表达差异检测 | 第38页 |
2.5 数据分析 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-43页 |
3.1 样本中获取的microRNA数 | 第39-40页 |
3.2 样本中表达差异的microRNA | 第40-41页 |
3.3 KEGG和GO分析 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
第四章 高通量测序及预测结果的验证 | 第45-53页 |
1 材料 | 第45-46页 |
1.1 测序样本 | 第45页 |
1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
1.3 主要设备 | 第46页 |
1.4 引物的设计与合成 | 第46页 |
2 实验方法 | 第46-48页 |
2.1 样品制备 | 第46-47页 |
2.2 RNA的提取 | 第47页 |
2.3 RNA纯度分析 | 第47页 |
2.4 microRNA的逆转录 | 第47页 |
2.5 荧光定量PCR检测miRNA表达 | 第47-48页 |
2.6 免疫印迹检测相关蛋白 | 第48页 |
2.7 统计学分析 | 第48页 |
3 试验结果 | 第48-50页 |
3.1 处理组和不同时间段染毒组中Let-7c-5p、miR-7a-5p、miR-10b-5p、miR-10a-5p、miR-21a-5p的差异表达 | 第48-49页 |
3.2 ZEA染毒不同时间的蛋白水平检测 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读学位期间发表论文 | 第65-66页 |