| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-25页 |
| 第一章 破骨细胞及其调控机制的研究进展 | 第12-17页 |
| 1 破骨细胞及其在骨重建中的作用 | 第12-13页 |
| 2 调控破骨细胞的主要信号机制 | 第13-17页 |
| 2.1 RANKL/RANK/OPG系统 | 第13-15页 |
| 2.2 M-CSF/c-Fms信号通路 | 第15页 |
| 2.3 Ca~(2+)信号通路 | 第15-17页 |
| 第二章 维生素D及其对破骨细胞的调控 | 第17-21页 |
| 1 维生素D及其代谢调控 | 第17-18页 |
| 2 维生素D对破骨细胞的作用 | 第18-21页 |
| 2.1 维生素D对破骨细胞生成的影响 | 第18-19页 |
| 2.2 维生素D对破骨细胞转录因子的影响 | 第19页 |
| 2.3 维生素D对破骨细胞迁移的影响 | 第19-21页 |
| 第三章 破骨细胞蛋白质组学研究进展 | 第21-24页 |
| 1 蛋白质组学的主要研究技术 | 第21-22页 |
| 2 蛋白质组学在破骨细胞研究中的应用 | 第22-24页 |
| 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二部分 试验研究 | 第25-63页 |
| 第一章 1α,25-(OH)_2D_3对RAW264.7细胞及其分化为破骨细胞的影响 | 第25-35页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| 1.1 细胞株 | 第25页 |
| 1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.3 主要试剂 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| 2.1 溶液配制 | 第26-27页 |
| 2.2 RAW264.7细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.3 细胞免疫荧光染色 | 第28页 |
| 2.4 Western blot检测 | 第28-29页 |
| 2.5 RTCA检测细胞增殖 | 第29页 |
| 2.6 破骨细胞TRAP染色及计数 | 第29页 |
| 2.7 破骨细胞相关基因表达水平检测 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-33页 |
| 3.1 RAW264.7细胞及破骨细胞中VDR的表达分布 | 第30-31页 |
| 3.2 RTCA检测1α,25-(OH)_2D_3对RAW264.7细胞增殖的影响 | 第31-32页 |
| 3.3 1α,25-(OH)_2D_3促进破骨细胞形成 | 第32-33页 |
| 3.4 1α 25-(OH)_2D_3影响破骨细胞分化相关标志基因表达 | 第33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 蛋白质组学方法筛选和鉴定1α,25-(OH)_2D_3调控破骨细胞分化的差异蛋白 | 第35-56页 |
| 1 材料 | 第35页 |
| 1.1 细胞株 | 第35页 |
| 1.2 主要仪器 | 第35页 |
| 1.3 主要试剂 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-39页 |
| 2.1 溶液配制 | 第35-36页 |
| 2.2 细胞培养 | 第36页 |
| 2.3 双向电泳样品制备 | 第36-37页 |
| 2.4 IPG胶条水化和等电聚焦 | 第37-38页 |
| 2.5 胶条平衡 | 第38页 |
| 2.6 SDS-PAGE电泳 | 第38页 |
| 2.7 凝胶染色 | 第38页 |
| 2.8 图像扫描与分析 | 第38页 |
| 2.9 胶内酶切 | 第38-39页 |
| 2.10 质谱鉴定 | 第39页 |
| 2.11 数据库查询 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-54页 |
| 3.1 双向电泳图谱 | 第39-40页 |
| 3.2 差异蛋白质谱鉴定及生物信息学分析 | 第40-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 第三章 部分差异蛋白质的验证 | 第56-63页 |
| 1 材料 | 第56页 |
| 1.1 细胞株 | 第56页 |
| 1.2 主要仪器 | 第56页 |
| 1.3 主要试剂 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-57页 |
| 2.1 RAW264.7细胞培养 | 第56页 |
| 2.2 qRT-PCR检测破骨细胞基因表达水平 | 第56-57页 |
| 3 结果 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间论文发表情况 | 第77-78页 |
