| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表（Abbreviation） | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 草鱼概述 | 第13页 |
| 1.2 鱼类天然免疫系统的研究 | 第13-14页 |
| 1.3 TRIM家族 | 第14-17页 |
| 1.3.1 TRIM家族的发现 | 第14-15页 |
| 1.3.2 TRIM家族的分类 | 第15页 |
| 1.3.3 TRIM家族的表达分布 | 第15-16页 |
| 1.3.4 TRIM家族与天然免疫 | 第16页 |
| 1.3.5 TRIM家族的其他功能 | 第16-17页 |
| 1.4 TRIM32的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.4.1 TRIM32蛋白的结构特点 | 第17-19页 |
| 1.4.2 TRIM32蛋白在天然免疫中的作用与功能 | 第19页 |
| 1.4.3 TRIM32蛋白与泛素化 | 第19-21页 |
| 2 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 3.1.1 质粒、菌株及细胞系 | 第22页 |
| 3.1.2 实验动物 | 第22页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.4 主要培养基与试剂的配制 | 第23-24页 |
| 3.1.5 实验仪器与设备 | 第24-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-38页 |
| 3.2.1 目的基因的克隆 | 第26-29页 |
| 3.2.2 目的基因的序列分析及系统进化树分析 | 第29-30页 |
| 3.2.3 真核表达载体的构建与鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.4 间接免疫荧光检测 | 第31-32页 |
| 3.2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第32-33页 |
| 3.2.6 Western blotting检测 | 第33-34页 |
| 3.2.7 qRT-PCR检测 | 第34-35页 |
| 3.2.8 双荧光素酶报告实验 | 第35-36页 |
| 3.2.9 融合蛋白的纯化 | 第36页 |
| 3.2.10 蛋白质浓度的测定 | 第36-37页 |
| 3.2.11 ELISA试剂盒检测所制备抗体效价 | 第37页 |
| 3.2.12 统计学分析 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-50页 |
| 4.1 TRIM32基因克隆与分析 | 第38-40页 |
| 4.1.1 TRIM32基因克隆 | 第38页 |
| 4.1.2 TRIM32序列分析 | 第38-39页 |
| 4.1.3 TRIM32系统进化树分析 | 第39-40页 |
| 4.2 草鱼TRIM32的真核表达及亚定位 | 第40-42页 |
| 4.2.1 pcDNA4.0-TRIM32重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第40-41页 |
| 4.2.2 TRIM32真核表达产物免疫印迹检测 | 第41-42页 |
| 4.2.3 TRIM32蛋白在EPC细胞中的亚定位 | 第42页 |
| 4.3 草鱼TRIM32的表达分析 | 第42-44页 |
| 4.3.1 草鱼TRIM32在不同组织的表达分析 | 第42-43页 |
| 4.3.2 草鱼TRIM32在不同胚胎发育时期的表达分析 | 第43-44页 |
| 4.4 草鱼TRIM32激活转录因子NF-κB | 第44-45页 |
| 4.5 抗草鱼TRIM32多抗的制备 | 第45-50页 |
| 4.5.1 草鱼TRIM32原核表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 4.5.2 草鱼TRIM32原核表达蛋白的检测及纯化 | 第47-48页 |
| 4.5.3 抗草鱼TRIM32抗体效价的检测 | 第48-50页 |
| 讨论 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
