| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-34页 |
| 1.1 水产养殖病害及疫苗 | 第14-18页 |
| 1.1.1 鳗弧菌及弧菌病 | 第14-16页 |
| 1.1.2 迟钝爱德华氏菌及迟钝爱德华氏菌病 | 第16-17页 |
| 1.1.3 水产疫苗种类及递送 | 第17-18页 |
| 1.2 水产病害的感染途径 | 第18-23页 |
| 1.2.1 鱼类黏膜组织结构 | 第18-21页 |
| 1.2.2 鳗弧菌感染鱼体进入途径的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.2.3 研究病原进入途径的方法及意义 | 第23页 |
| 1.3 鱼类黏膜组织的先天免疫系统 | 第23-26页 |
| 1.3.1 黏液 | 第23-24页 |
| 1.3.2 体液免疫 | 第24-25页 |
| 1.3.3 细胞免疫 | 第25-26页 |
| 1.4 鱼类黏膜组织的适应性免疫系统 | 第26-27页 |
| 1.4.1 体液免疫 | 第26页 |
| 1.4.2 细胞免疫 | 第26-27页 |
| 1.5 鱼类免疫应答过程 | 第27-32页 |
| 1.5.1 抗原识别 | 第27-29页 |
| 1.5.2 炎症反应 | 第29-31页 |
| 1.5.3 抗原加工及递呈 | 第31页 |
| 1.5.4 淋巴细胞活化 | 第31-32页 |
| 1.5.5 黏膜免疫应答与系统免疫应答 | 第32页 |
| 1.6 论文的主要内容及意义 | 第32-34页 |
| 第2章 黏膜损伤对鳗弧菌感染斑马鱼的影响 | 第34-55页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.2.1 菌株及实验动物 | 第34页 |
| 2.2.2 药品及仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.3 培养基及溶液配制 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-42页 |
| 2.3.1 实验动物驯养 | 第35-36页 |
| 2.3.2 菌体培养及制备 | 第36页 |
| 2.3.3 细菌质粒抽提 | 第36-37页 |
| 2.3.4 鳗弧菌感受态制备 | 第37页 |
| 2.3.5 电转 | 第37页 |
| 2.3.6 鳗弧菌复壮 | 第37-38页 |
| 2.3.7 定量检测病原菌方法的建立 | 第38-39页 |
| 2.3.8 斑马鱼黏膜组织损伤模型建立 | 第39页 |
| 2.3.9 病原菌感染方式 | 第39页 |
| 2.3.10 斑马鱼组织取样 | 第39-40页 |
| 2.3.11 细菌及动物组织基因组抽提 | 第40-41页 |
| 2.3.12 免疫组织化学检测 | 第41页 |
| 2.3.13 黏液抑菌实验 | 第41-42页 |
| 2.4 实验结果 | 第42-51页 |
| 2.4.1 鳗弧菌毒株的复壮 | 第42页 |
| 2.4.2 qPCR法定量检测鳗弧菌模型建立 | 第42-43页 |
| 2.4.3 不同接种方式鳗弧菌感染斑马鱼毒力考察 | 第43-44页 |
| 2.4.4 鳗弧菌感染斑马鱼进入途径考察 | 第44-46页 |
| 2.4.5 鳗弧菌感染皮肤、肠黏膜层受损斑马鱼毒力考察 | 第46-48页 |
| 2.4.6 鳗弧菌在健康和皮肤黏膜层损伤斑马鱼组织中的定植考察 | 第48-49页 |
| 2.4.7 鳗弧菌感染皮肤损伤修复中的斑马鱼毒力考察 | 第49-51页 |
| 2.4.8 斑马鱼皮肤黏液对鳗弧菌生长的抑制作用 | 第51页 |
| 2.5 实验讨论 | 第51-54页 |
| 2.6 本章小结 | 第54-55页 |
| 第3章 鳗弧菌减毒活疫苗浸泡免疫斑马鱼的黏膜免疫应答 | 第55-74页 |
| 3.1 引言 | 第55页 |
| 3.2 实验材料 | 第55-56页 |
| 3.2.1 菌株及实验动物 | 第55页 |
| 3.2.2 药品及仪器 | 第55页 |
| 3.2.3 培养基及溶液配制 | 第55-56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-59页 |
| 3.3.1 斑马鱼浸泡免疫 | 第56页 |
| 3.3.2 斑马鱼组织RNA抽提 | 第56-57页 |
| 3.3.3 RNA消化、逆转录 | 第57页 |
| 3.3.4 RT-qPCR | 第57-58页 |
| 3.3.5 病理组织样品制备及分析 | 第58-59页 |
| 3.3.6 透射电镜样品制备及分析 | 第59页 |
| 3.4 实验结果 | 第59-67页 |
| 3.4.1 鳗弧菌减毒活疫苗浸泡接种斑马鱼进入途径考察 | 第59-60页 |
| 3.4.2 鳗弧菌减毒活疫苗在黏膜组织中的存留 | 第60-62页 |
| 3.4.3 斑马鱼黏膜组织对鳗弧菌减毒活疫苗的识别 | 第62页 |
| 3.4.4 斑马鱼黏膜组织对鳗弧菌减毒活疫苗的摄取 | 第62页 |
| 3.4.5 浸泡接种后斑马鱼黏膜组织细胞因子的分泌表达 | 第62-67页 |
| 3.4.6 浸泡接种后斑马鱼肠黏膜组织的炎症反应 | 第67页 |
| 3.5 实验讨论 | 第67-71页 |
| 3.6 本章小结 | 第71-74页 |
| 第4章 鳗弧菌减毒活疫苗免疫斑马鱼激发的系统免疫与局部免疫 | 第74-83页 |
| 4.1 引言 | 第74页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第74页 |
| 4.3 实验结果 | 第74-77页 |
| 4.3.1 局部點膜组织与系统免疫器官对减毒活疫苗的识别和摄取 | 第74页 |
| 4.3.2 局部黏膜组织与系统免疫器官对减毒活疫苗的加工和递呈 | 第74-75页 |
| 4.3.3 局部黏膜组织与系统免疫器官浸泡接种后T细胞的增殖和分化 | 第75-76页 |
| 4.3.4 局部黏膜组织与系统免疫器官浸泡接种后抗体分泌 | 第76-77页 |
| 4.4 实验讨论 | 第77-82页 |
| 4.5 本章小结 | 第82-83页 |
| 第5章 鳗弧菌减毒活疫苗不同接种方式激发的免疫应答 | 第83-94页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第83页 |
| 5.3 实验结果 | 第83-87页 |
| 5.3.1 不同方式接种激发的免疫系统对减毒活疫苗的识别和摄取 | 第83-85页 |
| 5.3.2 不同方式接种激发的免疫系统对减毒活疫苗的加工 | 第85页 |
| 5.3.3 不同方式接种激发的免疫系统对减毒活疫苗的递呈 | 第85-87页 |
| 5.3.4 不同方式接种激发的抗体分泌 | 第87页 |
| 5.4 实验讨论 | 第87-92页 |
| 5.5 本章小结 | 第92-94页 |
| 第6章 黏膜损伤对迟钝爱德华氏菌感染斑马鱼的影响 | 第94-104页 |
| 6.1 引言 | 第94页 |
| 6.2 实验材料 | 第94页 |
| 6.3 实验方法 | 第94-95页 |
| 6.3.1 菌体培养及制备 | 第94-95页 |
| 6.3.2 病原菌接种方式 | 第95页 |
| 6.4 实验结果 | 第95-99页 |
| 6.4.1 不同接种方式迟钝爱德华氏菌感染斑马鱼毒力考察 | 第95-97页 |
| 6.4.2 感染迟钝爱德华氏菌后斑马鱼各组织炎症相关细胞因子的表达 | 第97页 |
| 6.4.3 感染迟钝爱德华氏菌后斑马鱼各组织抗菌反应相关细胞因子的表达 | 第97页 |
| 6.4.4 迟钝爱德华氏菌在肠黏膜损伤斑马鱼肠道中的存留 | 第97-99页 |
| 6.5 实验讨论 | 第99-102页 |
| 6.6 本章小结 | 第102-104页 |
| 第7章 主要结论和创新点 | 第104-107页 |
| 7.1 主要结论 | 第104-105页 |
| 7.2 创新点 | 第105页 |
| 7.3 展望 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-122页 |
| 攻读博士学位期间撰写的论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
