摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第12-21页 |
0.1 淀粉样疾病 | 第12页 |
0.2 胱抑素C(Cystatin C)与人胱抑素(human Cystatin C,HCC) | 第12-13页 |
0.3 鸡胱抑素C(chicken Cystatin C) | 第13-14页 |
0.4 淀粉样纤维(amyloid fibre) | 第14-15页 |
0.5 抗纤维化小分子对淀粉样蛋白疾病治疗的研究 | 第15-16页 |
0.6 茶多酚 | 第16-17页 |
0.7 淀粉样蛋白纤维检测及分析方法 | 第17-19页 |
0.7.1 ThT(硫磺素T)荧光检测 | 第17-18页 |
0.7.2 ANS(8-苯胺1萘磺酸)荧光检测 | 第18页 |
0.7.3 透射电子显微镜检测(TEM) | 第18页 |
0.7.4 细胞毒性检测(MTT法) | 第18-19页 |
0.8 分子动力学模拟(Molecular Dynamic Simulations) | 第19页 |
0.9 分子对接模拟(Docking studies) | 第19-21页 |
第一章 鸡胱抑素I66Q突变体的表达、纯化及淀粉样纤维的培养 | 第21-29页 |
1.1 实验材料 | 第21-23页 |
1.1.1 菌株 | 第21页 |
1.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
1.1.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
1.2 实验方法 | 第23-26页 |
1.2.1 培养基与化学试剂的配制 | 第23-24页 |
1.2.2 胞外鸡胱抑素突变体I66Q的表达及纯化 | 第24-25页 |
1.2.3 鸡胱抑素I66Q突变体的淀粉样纤维培养 | 第25-26页 |
1.2.4 生物统计学数据处理 | 第26页 |
1.3 实验结果与讨论 | 第26-28页 |
1.3.1 利用毕赤酵母表达鸡胱抑素I66Q突变体及其纯化 | 第26-27页 |
1.3.2 鸡胱抑素I66Q突变体淀粉样纤维的培养 | 第27-28页 |
1.4 本章小结 | 第28-29页 |
第二章 EGCG对鸡胱抑素I66Q突变体淀粉样纤维形成的影响 | 第29-38页 |
2.1 实验材料 | 第29-30页 |
2.1.1 主要试剂 | 第29页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-32页 |
2.2.1 主要化学试剂的配制 | 第30页 |
2.2.2 ANS荧光检测 | 第30-31页 |
2.2.3 透射电子显微镜检测 | 第31页 |
2.2.4 细胞毒性检测 | 第31-32页 |
2.2.5 生物统计学数据处理 | 第32页 |
2.3 实验结果与讨论 | 第32-37页 |
2.3.1 利用ThT荧光检测EGCG对鸡胱抑素I66Q突变体淀粉样纤维形成的影响 | 第32-33页 |
2.3.2 利用ANS荧光检测EGCG对鸡胱抑素I66Q突变体淀粉样纤维形成的影响 | 第33-34页 |
2.3.3 利用透射电子显微镜(TEM)检测EGCG对鸡胱抑素I66Q突变体淀粉样纤维形成的影响 | 第34-36页 |
2.3.4 利用MTT法检测鸡胱抑素I66Q突变体淀粉样纤维及寡聚体的细胞毒性 | 第36-37页 |
2.4 本章小结 | 第37-38页 |
第三章 应用AutoDock分子对接软件研究EGCG与鸡胱抑素I66Q突变体分子间的相互作用 | 第38-48页 |
3.1 实验材料 | 第38页 |
3.1.1 所需实验软件及功能 | 第38页 |
3.1.2 蛋白及小分子EGCG结构文件 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 利用GROMACS 4.5.0 软件对鸡胱抑素I66Q突变体进行分子动力学模拟 | 第38-39页 |
3.2.2 应用AutoDock分子对接软件研究EGCG与鸡胱抑素I66Q突变体分子间的相互作用 | 第39-40页 |
3.3 实验结果与讨论 | 第40-46页 |
3.3.1 鸡胱抑素I66Q突变体蛋白在成纤维模拟条件下的结构变化 | 第40-41页 |
3.3.2 AutoDock对接结果能量分析及不同表位的分布 | 第41-42页 |
3.3.3 最优结合表位分析 | 第42-44页 |
3.3.4 第二可能结合表位分析 | 第44-46页 |
3.4 本章小结 | 第46-48页 |
结论与展望 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
攻读学位期间发表学术论文情况 | 第55-56页 |