| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 前言 | 第20-28页 |
| 1.1 miRNA的结构特征 | 第21-23页 |
| 1.2 miRNA的鉴定和靶基因预测 | 第23-24页 |
| 1.3 miRNA与肿瘤发生的关系 | 第24-25页 |
| 1.3.1 促癌作用的miRNA | 第24-25页 |
| 1.3.2 抑癌作用的miRNA | 第25页 |
| 1.4 miRNA与结肠癌 | 第25-27页 |
| 1.5 结语 | 第27-28页 |
| 第1章 文献综述 | 第28-36页 |
| 1.1 miRNA的结构特征 | 第29-31页 |
| 1.2 miRNA的鉴定和靶基因预测 | 第31-32页 |
| 1.3 miRNA与肿瘤发生的关系 | 第32-33页 |
| 1.3.1 促癌作用的miRNA | 第32-33页 |
| 1.3.2 抑癌作用的miRNA | 第33页 |
| 1.4 miRNA与结肠癌 | 第33-35页 |
| 1.5 结语 | 第35-36页 |
| 第2章 mi R-93 在人结肠癌组织及人结肠癌细胞中的表达 | 第36-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-42页 |
| 2.2.1 病理组织取材 | 第38页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第38页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR（Realtime PCR）检测miRNA-93 表达 | 第38-41页 |
| 2.2.4 原位杂交方法观察miR-93 在结肠癌组织中的表达 | 第41-42页 |
| 2.2.5 统计分析 | 第42页 |
| 2.3 实验结果 | 第42-44页 |
| 2.3.1 miR-93 在结肠癌组织和细胞系的表达 | 第42-43页 |
| 2.3.2 结肠癌组织中miR-93 的表达 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-45页 |
| 2.5 小结 | 第45-46页 |
| 第3章 miR-93 对人结肠癌细胞HCT116生物学行为的影响 | 第46-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第46-48页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第46-47页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第47-48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-52页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第48页 |
| 3.2.2 结肠癌细胞转染 | 第48页 |
| 3.2.3 细胞活力检测 | 第48-49页 |
| 3.2.4 细胞集落形成检测 | 第49页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR（Realtime PCR）检测miRNA-93 表达 | 第49-52页 |
| 3.2.6 流式细胞术 | 第52页 |
| 3.2.7 统计分析 | 第52页 |
| 3.3 结果 | 第52-55页 |
| 3.3.1 LNA anti-miR-93 inhibitor抑制HCT116细胞中miR-93 表达 | 第52-53页 |
| 3.3.2 miR-93 表达下调对HCT116细胞增殖的作用 | 第53-54页 |
| 3.3.3 miR-93 表达下调对HCT116细胞凋亡的作用 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-58页 |
| 第4章 miR-93 下游靶基因的预测及确认 | 第58-72页 |
| 4.1 实验材料 | 第58-60页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第59-60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-67页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第60页 |
| 4.2.2 荧光素酶报告基因载体的构建 | 第60页 |
| 4.2.3 双荧光素酶报告基因检测 | 第60-61页 |
| 4.2.4 结肠癌细胞转染 | 第61页 |
| 4.2.5 Western blot | 第61-64页 |
| 4.2.6 实时荧光定量PCR（Realtime PCR）检测miRNA-93 表达 | 第64-67页 |
| 4.2.7 统计分析 | 第67页 |
| 4.3 实验结果 | 第67-70页 |
| 4.3.1 miR-93 靶基因预测 | 第67页 |
| 4.3.2 miR-93 病毒载体的构建 | 第67-68页 |
| 4.3.3 双荧光素酶基因报告分析 | 第68-69页 |
| 4.3.4 转染后HCT116细胞的PTEN mRNA检测结果 | 第69-70页 |
| 4.3.5 转染后HCT116细胞的PTEN的蛋白表达 | 第70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-71页 |
| 4.5 小结 | 第71-72页 |
| 第5章 miR-93 对结肠癌细胞PI3K/Akt信号通路的影响 | 第72-84页 |
| 5.1 实验材料 | 第72-74页 |
| 5.1.1 主要试剂 | 第72-74页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第74页 |
| 5.2 实验方法 | 第74-81页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第74页 |
| 5.2.2 结肠癌细胞转染 | 第74-75页 |
| 5.2.3 Western blot | 第75-78页 |
| 5.2.4 实时荧光定量PCR（Realtime PCR）检测miRNA-93 表达 | 第78-80页 |
| 5.2.5 统计分析 | 第80-81页 |
| 5.3 结果 | 第81-82页 |
| 5.3.1 抑制miR-93 表达对PI3K，Akt，mTOR的mRNA水平的影响 | 第81页 |
| 5.3.2 抑制miR-93 表达对PI3K，Akt，mTOR的蛋白水平的影响 | 第81-82页 |
| 5.4 讨论 | 第82-83页 |
| 5.5 小结 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
