摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略表 | 第10-11页 |
1 综述 | 第11-22页 |
1.1. 国内食用植物油生产现状 | 第11页 |
1.2. 棉籽脂肪酸的组分和油脂的合成途径 | 第11-13页 |
1.2.1 棉籽脂肪酸的组分 | 第11-12页 |
1.2.2 油脂的合成途径 | 第12-13页 |
1.3 油脂合成过程中的关键基因 | 第13-19页 |
1.3.1 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 | 第13-17页 |
1.3.2 乙酰辅酶A羧化酶 | 第17页 |
1.3.3 3-磷酸甘油脂酰转移酶 | 第17-18页 |
1.3.4 溶血磷酸酰基转移酶 | 第18-19页 |
1.3.5 二脂酰甘油酰基转移酶 | 第19页 |
1.4 课题意义与立题思路 | 第19-22页 |
2 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 植物材料及载体和菌株 | 第22页 |
2.1.2 酶和相关试剂 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-33页 |
2.2.1 目的基因的检索与引物设计 | 第22-23页 |
2.2.2 目的基因的表达模式分析与克隆 | 第23-24页 |
2.2.3 GhPEPC干涉表达载体的RNAi构建 | 第24-26页 |
2.2.4 35s启动子和 α-球蛋白启动子的GhDGAT超表达载体的构建 | 第26-27页 |
2.2.5 电击转化农杆菌 | 第27页 |
2.2.6 农杆菌介导的陆地棉遗传转化 | 第27-29页 |
2.2.7 转基因植株的阳性检测 | 第29-30页 |
2.2.8 转基因植株的拷贝数分析 | 第30-31页 |
2.2.9 转基因植株的目的基因表达量分析 | 第31页 |
2.2.10 种子脂肪酸组分含量的测定 | 第31-32页 |
2.2.11 转基因植株后代的蛋白质含量和油分测量 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-50页 |
3.1 PPC和PEPC1 的RNAi载体构建与功能分析 | 第33-45页 |
3.1.1 PPC和PEPC1 的表达模式分析 | 第33页 |
3.1.2 PPC和PEPC1 区段的克隆 | 第33-37页 |
3.1.3 PPC和PEPC1 的RNAi干涉表达载体的构建 | 第37-38页 |
3.1.4 RNAi表达载体的陆地棉遗传转化 | 第38-40页 |
3.1.5 转基因植株T0 的阳性检测 | 第40-41页 |
3.1.6 转基因植株的Southern杂交 | 第41-42页 |
3.1.7 转基因植株的基因表达量检测 | 第42-43页 |
3.1.8 转基因植株T1 代的蛋白质含量和油脂含量 | 第43-44页 |
3.1.9 脂肪酸组分含量的测定 | 第44-45页 |
3.2 GhDGAT基因超表达载体的构建与遗传转化 | 第45-50页 |
3.2.1 GhDGAT基因的表达模式分析 | 第45页 |
3.2.2 αGP启动子与GhDGAT的PCR扩增 | 第45-46页 |
3.2.3 GhDGAT基因的超表达载体构建 | 第46-49页 |
3.2.4 超表达载体陆地棉的遗传转化 | 第49页 |
3.2.5 转基因植株的阳性检测 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 GhPEPC基因和GhDGAT基因 | 第50页 |
4.2 启动子选择及其对油分改良的影响 | 第50-51页 |
4.3 转基因植株基因表达量的差异 | 第51页 |
4.4 通过基因调控提高油分含量 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-67页 |
致谢 | 第67页 |