| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩写表 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 大豆皂苷综述 | 第11-15页 |
| 1.2.1 大豆皂苷的分类和结构 | 第11-14页 |
| 1.2.2 大豆皂苷的生物活性研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 巨噬细胞及其免疫功能 | 第15-18页 |
| 1.3.1 细胞因子TNF-α 和IL-1β 简介 | 第16-17页 |
| 1.3.2 NF-κB简介 | 第17-18页 |
| 1.3.3 Toll样受体 4 | 第18页 |
| 1.4 研究内容和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 大豆皂苷Ab的溶血活性研究 | 第20-27页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.2 实验动物 | 第20页 |
| 2.2.3 材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第21页 |
| 2.3 大豆皂苷Ab的制备和鉴定 | 第21-23页 |
| 2.3.1 大豆皂苷粗提物的制备 | 第21页 |
| 2.3.2 大豆总皂苷的制备 | 第21-22页 |
| 2.3.3 制备型高效液相法分离大豆皂苷单体 | 第22页 |
| 2.3.4 皂苷结构鉴定 | 第22-23页 |
| 2.4 大豆皂苷Ab的溶血性测定 | 第23-26页 |
| 2.4.1 分光光度法测定溶血活性 | 第23-24页 |
| 2.4.2 结果与分析 | 第24-26页 |
| 2.5 本章小结 | 第26-27页 |
| 第三章 大豆皂苷Ab对RAW264.7 细胞的毒性研究 | 第27-34页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第27页 |
| 3.3 RAW264.7 细胞的常规培养 | 第27-31页 |
| 3.3.1 细胞复苏及培养 | 第27-28页 |
| 3.3.2 细胞传代 | 第28页 |
| 3.3.3 细胞冻存 | 第28页 |
| 3.3.4 建立细胞生长曲线 | 第28-29页 |
| 3.3.5 结果与分析 | 第29-31页 |
| 3.4 大豆皂苷Ab对RAW264.7 细胞毒性测定 | 第31-32页 |
| 3.4.1 MTT实验原理 | 第31页 |
| 3.4.2 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.4.3 结果与分析 | 第32页 |
| 3.5 本章小结 | 第32-34页 |
| 第四章 大豆皂苷Ab对RAW264.7 细胞分泌细胞因子TNF-α和IL-1β及NF-κB通路的影响 | 第34-40页 |
| 4.1 引言 | 第34-35页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第35页 |
| 4.2.1 细胞系 | 第35页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第35页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第35页 |
| 4.3 实验方法 | 第35-36页 |
| 4.3.1 RAW264.7 细胞分泌TNF-α、IL-1β 的检测 | 第35-36页 |
| 4.3.2 大豆皂苷Ab对NF-κB转录因子的激活作用 | 第36页 |
| 4.4 结果与分析 | 第36-39页 |
| 4.4.1 大豆皂苷Ab对RAW264.7 细胞分泌TNF-α、IL-1β 的影响 | 第36-38页 |
| 4.4.2 大豆皂苷 Ab 对 RAW264.7 细胞的 NF-κB 转录因子的作用 | 第38-39页 |
| 4.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 第五章 特异沉默TLR4基因表达的siRNA对大豆皂苷Ab诱导的TNF-α、IL-1β表达及NF-κB信号通路的影响 | 第40-54页 |
| 5.1 引言 | 第40页 |
| 5.2 材料与试剂 | 第40-41页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第40-41页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第41页 |
| 5.3 实验方法 | 第41-48页 |
| 5.3.1 TLR4 siRNA的合成 | 第41-42页 |
| 5.3.2 TLR4 siRNA的转染 | 第42-43页 |
| 5.3.3 Western blot检测TLR4蛋白表达 | 第43-47页 |
| 5.3.4 检测TLR4基因表达抑制后的皂苷的免疫刺激活性变化 | 第47-48页 |
| 5.4 结果与分析 | 第48-52页 |
| 5.4.1 BCA法蛋白浓度测定 | 第48页 |
| 5.4.2 特异沉默TLR4基因表达的siRNA对大豆皂苷Ab诱导的TNF-α、IL-1β 表达及NF-κB转录因子的影响 | 第48-52页 |
| 5.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 第六章 结论与展望 | 第54-56页 |
| 6.1 总结 | 第54页 |
| 6.2 展望 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录1 小鼠肿瘤坏死因子TNF-α ELISA试剂盒 | 第62-67页 |
| 附录2 小鼠白介素IL-1β ELISA试剂盒 | 第67-72页 |
| 附录3 双荧光素酶报告基因检测操作步骤 | 第72-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第76-78页 |
