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木醋杆菌群体感应基因luxR的克隆及其功能分析

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 前言第8-19页
    1.1 细菌纤维素第8-12页
        1.1.1 细菌纤维素的特性第8-9页
        1.1.2 细菌纤维素的生产菌株第9页
        1.1.3 细菌纤维素的应用第9-11页
        1.1.4 细菌纤维素的生物合成第11-12页
    1.2 群体感应系统第12-17页
        1.2.1 群体感应系统简介第12-14页
        1.2.2 LuxR蛋白第14-16页
        1.2.3 群体感应系统最新研究进展第16-17页
    1.3 本论文主要研究内容与意义第17-19页
2 材料与方法第19-35页
    2.1 实验材料第19-24页
        2.1.1 菌种第19页
        2.1.2 培养基第19页
        2.1.3 质粒及引物第19-20页
        2.1.4 主要仪器第20-21页
        2.1.5 主要试剂第21-22页
        2.1.6 主要溶液及缓冲液第22-24页
    2.2 实验方法第24-35页
        2.2.1 木葡糖酸醋杆菌的培养方法第24页
        2.2.2 大肠杆菌E.coli DH5α及B121(DE3)感受态细胞的制备及转化方法第24-25页
        2.2.3 木葡糖酸醋杆菌感受态细胞的制备及电击转化第25-26页
        2.2.4 木葡糖酸醋杆菌过表达菌株G.x-pMV24-luxR的构建过程第26-29页
        2.2.5 重组质粒pMV24-luxR在E.coli BL21 (DE3)中的表达第29页
        2.2.6 重组质粒pMV24-luxR在G.xylinus CGMCC 2955中的表达第29-31页
        2.2.7 过表达菌株与亲本菌株发酵性能比较第31-32页
        2.2.8 竞争能力比较第32页
        2.2.9 细菌纤维素机械性能差异比较第32页
        2.2.10 小分子代谢物的提取及衍生化第32-35页
3 结果与讨论第35-60页
    3.1 木葡糖酸醋杆菌luxR过表达菌株的构建第35-39页
        3.1.1 luxR基因的克隆第35页
        3.1.2 重组质粒pMD18T-luxR和pMV24-luxR的构建第35-37页
        3.1.3 重组质粒pMV24-luxR在E.coli BL21(DE3)中的表达验证第37-38页
        3.1.4 重组质粒pMV24-luxR在G.xylinus CGMCC 2955中的表达验证第38-39页
        3.1.5 小结第39页
    3.2 发酵性能分析第39-44页
        3.2.1 振荡条件下菌株发酵性能第39-40页
        3.2.2 静置条件下菌株发酵性能第40-41页
        3.2.3竞争能力比较第41-42页
        3.2.4 各菌株细菌纤维素机械性能差异分析第42-44页
        3.2.5 小结第44页
    3.3 工程菌株与亲本菌株胞内小分子代谢物分析比较第44-60页
        3.3.1 胞内代谢物的检测与定性定量分析第44-46页
        3.3.2 工程菌株和亲本菌株胞内代谢物多元统计分析第46-52页
        3.3.3 结合代谢网络分析第52-59页
        3.3.4 小结第59-60页
4 结论第60-61页
5 展望第61-62页
6 参考文献第62-67页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第67-68页
8 致谢第68页

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