摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 前言 | 第10-28页 |
1.1 pelota | 第10-22页 |
1.1.1 pelota的介绍 | 第10-11页 |
1.1.2 pelota的功能与结构 | 第11-22页 |
1.2 结构生物学简述 | 第22-23页 |
1.2.1 X-RAY解析蛋白结构的流程 | 第23页 |
1.3 蛋白结晶学介绍 | 第23-26页 |
1.3.1 蛋白质晶体学简介 | 第23-24页 |
1.3.2 蛋白质结晶的方法 | 第24-25页 |
1.3.3 获得高分辨率蛋白晶体的方法 | 第25-26页 |
1.4 课题研究的内容和方法 | 第26-28页 |
1.4.1 课题研究的内容 | 第26-27页 |
1.4.2 课题研究的方法 | 第27页 |
1.4.3 课题研究的目的和意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-49页 |
2.1 实验材料 | 第28-36页 |
2.1.1 实验质粒及菌种 | 第28页 |
2.1.2 常用试剂和仪器 | 第28-31页 |
2.1.3 常用试剂和缓冲液的配置 | 第31-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-49页 |
2.2.1 DNA的克隆 | 第36-42页 |
2.2.2 蛋白表达及纯化 | 第42-45页 |
2.2.3 晶体的设置 | 第45-49页 |
3 实验结果 | 第49-68页 |
3.1 pelota全长克隆的表达和结晶 | 第49-61页 |
3.1.1 pelota全长克隆的构建 | 第49-51页 |
3.1.2 pelota克隆全长试表达的小试及纯化 | 第51-53页 |
3.1.3 22b-pelota_(f.l)纯化条件的优化 | 第53-59页 |
3.1.4 22b-pelota_(f.l)蛋白均一性急稳定性的检验 | 第59-60页 |
3.1.5 22b-pelota_(f.l)蛋白结晶 | 第60-61页 |
3.1.6 22b-pelota_(f.l)结晶条件的优化 | 第61页 |
3.2 22b-pelota全长突变的表达和结晶 | 第61-68页 |
3.2.1 22b-pelota全长的突变 | 第61-63页 |
3.2.2 22b-pelota全长突变的表达 | 第63-66页 |
3.2.3 22b-pelota全长突变的结晶 | 第66-68页 |
4 分析和讨论 | 第68-69页 |
5 小结 | 第69-70页 |
6 参考文献 | 第70-75页 |
7 附录 | 第75-76页 |
8 致谢 | 第76页 |