| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1.1 苦豆子概述 | 第10页 |
| 1.2 赖氨酸脱羧酶基因研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 植物启动子研究进展 | 第11-14页 |
| 1.3.1 植物启动子基本结构与功能 | 第11页 |
| 1.3.2 植物启动子类型 | 第11-12页 |
| 1.3.3 植物启动子的研究方法 | 第12-14页 |
| 1.4 植物遗传转化研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4.1 植物遗传转化方法 | 第14-15页 |
| 1.4.2 影响遗传转化效率的因素 | 第15页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 第二章 苦豆子瞬时转化体系建立 | 第16-23页 |
| 2.1 材料 | 第16页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第16-17页 |
| 2.2.1 仪器 | 第16页 |
| 2.2.2 菌株和质粒 | 第16页 |
| 2.2.3 试剂及其配制 | 第16-17页 |
| 2.3 方法 | 第17-18页 |
| 2.3.1 苦豆子子叶节愈伤组织的获得 | 第17页 |
| 2.3.2 农杆菌活化与培养 | 第17-18页 |
| 2.3.3 农杆菌介导转化苦豆子愈伤组织 | 第18页 |
| 2.3.4 GUS组织化学染色 | 第18页 |
| 2.3.5 数据统计与分析 | 第18页 |
| 2.4 结果与分析 | 第18-21页 |
| 2.4.1 农杆菌菌液浓度对瞬时转化的影响 | 第18-19页 |
| 2.4.2 农杆菌侵染时间对瞬时转化的影响 | 第19页 |
| 2.4.3 农杆菌与愈伤组织共培养时间对瞬时转化的影响 | 第19-20页 |
| 2.4.4 子叶节预培养时间对瞬时转化的影响 | 第20页 |
| 2.4.5 AS对瞬时转化的影响 | 第20-21页 |
| 2.4.6 苦豆子瞬时转化体系 | 第21页 |
| 2.5 讨论 | 第21-23页 |
| 第三章 SaLDC启动子的克隆、序列分析及表达载体构建 | 第23-32页 |
| 3.1 材料 | 第23页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第23-24页 |
| 3.2.1 仪器及耗材 | 第23页 |
| 3.2.2 菌株和质粒 | 第23-24页 |
| 3.2.3 试剂及其配制 | 第24页 |
| 3.3 方法 | 第24-28页 |
| 3.3.1 苦豆子基因组DNA提取 | 第24页 |
| 3.3.2 SaLDC启动子序列克隆及片段回收 | 第24-25页 |
| 3.3.3 SaLDC启动子连接与转化 | 第25页 |
| 3.3.4 阳性克隆的筛选及测序 | 第25-26页 |
| 3.3.5 SaLDC启动子序列生物信息学分析 | 第26页 |
| 3.3.6 植物表达载体构建及转化大肠杆菌 | 第26-28页 |
| 3.4 结果与分析 | 第28-31页 |
| 3.4.1 SaLDC启动子序列克隆 | 第28页 |
| 3.4.2 SaLDC启动子序列连接转化及测序 | 第28-29页 |
| 3.4.3 SaLDC启动子序列信息学分析 | 第29-30页 |
| 3.4.4 SaLDC启动子序列植物表达载体构建和验证 | 第30-31页 |
| 3.5 讨论 | 第31-32页 |
| 第四章 SaLDC启动子缺失分析 | 第32-39页 |
| 4.1 材料 | 第32页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第32-33页 |
| 4.2.1 仪器及耗材 | 第32页 |
| 4.2.2 菌株和质粒 | 第32页 |
| 4.2.3 试剂及其配制 | 第32-33页 |
| 4.3 方法 | 第33-36页 |
| 4.3.1 SaLDC启动子缺失片段的克隆及表达载体构建 | 第33-34页 |
| 4.3.2 农杆菌介导表达载体转化苦豆子愈伤组织 | 第34-35页 |
| 4.3.3 转基因愈伤组织GUS组织化学染色 | 第35页 |
| 4.3.4 转基因愈伤组织GUS蛋白荧光定量分析 | 第35-36页 |
| 4.3.5 数据统计与分析 | 第36页 |
| 4.4 结果与分析 | 第36-38页 |
| 4.4.1 不同长度的SaLDC启动子片段的克隆和表达载体构建 | 第36-37页 |
| 4.4.2 不同长度SaLDC启动子片段在苦豆子愈伤中的瞬时表达 | 第37-38页 |
| 4.5 讨论 | 第38-39页 |
| 第五章 SaLDC启动子表达模式验证 | 第39-45页 |
| 5.1 材料 | 第39页 |
| 5.2 仪器与试剂 | 第39页 |
| 5.2.1 仪器 | 第39页 |
| 5.2.2 菌株和质粒 | 第39页 |
| 5.2.3 试剂及其配制 | 第39页 |
| 5.3 方法 | 第39-41页 |
| 5.3.1 拟南芥种植 | 第39-40页 |
| 5.3.2 农杆菌介导的蘸花法转化拟南芥 | 第40页 |
| 5.3.3 SaLDC启动子在拟南芥中的表达 | 第40页 |
| 5.3.4 SaLDC启动子对干旱胁迫的响应 | 第40-41页 |
| 5.3.5 SaLDC启动子对不同光照条件的响应 | 第41页 |
| 5.4 结果与分析 | 第41-43页 |
| 5.4.1 SaLDC启动子在转基因拟南芥中的时空表达和组织特异性表达 | 第41-42页 |
| 5.4.3 SaLDC启动子对干旱胁迫的响应 | 第42-43页 |
| 5.4.4 SaLDC启动子对不同光照条件的响应 | 第43页 |
| 5.5 讨论 | 第43-45页 |
| 第六章 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
