中文摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
中文文摘 | 第4-6页 |
目录 | 第6-9页 |
绪论 | 第9-21页 |
第一节 课题背景 | 第9-11页 |
·紫球藻简介 | 第9页 |
·藻胆蛋白 | 第9-11页 |
第二节 藻红蛋白基本性质 | 第11-14页 |
·藻红蛋白分类与命名 | 第11-12页 |
·藻红蛋白分子组成 | 第12-13页 |
·藻红蛋白的聚集形态及空间结构 | 第13页 |
·藻红蛋白物理性质 | 第13-14页 |
第三节 藻红蛋白分子生物学 | 第14-18页 |
·藻红蛋白脱辅基基因 | 第14页 |
·藻红蛋白脱辅基基因结构 | 第14-15页 |
·藻红蛋白脱辅基基因序列特征 | 第15页 |
·藻红蛋白的生物合成 | 第15-17页 |
·藻红蛋白的基因克隆及表达 | 第17-18页 |
第四节 藻红蛋白作用 | 第18-20页 |
·藻红蛋白在藻体生理过程中的作用 | 第18-19页 |
·藻红蛋白的应用 | 第19-20页 |
第五节 本课题研究的目的和意义 | 第20-21页 |
第一章 紫球藻藻红蛋白基因克隆 | 第21-35页 |
第一节 材料与方法 | 第21-26页 |
·材料 | 第21-22页 |
·藻种和质粒 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·主要培养基及试剂配制 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·藻的培养 | 第22页 |
·紫球藻基因组DNA提取 | 第22-23页 |
·藻红蛋白基因a亚基的克隆 | 第23-25页 |
·重组子的筛选和鉴定 | 第25页 |
·序列的测定与分析 | 第25-26页 |
第二节 结果与分析 | 第26-32页 |
·LA-PCR扩增 | 第26-27页 |
·重组子的筛选及鉴定 | 第27页 |
·LA-PCR产物序列测定与序列分析 | 第27-28页 |
·藻红蛋白α亚基聚类分析 | 第28-29页 |
·信号肽预测 | 第29-30页 |
·理化表征分析 | 第30页 |
·疏水性和跨膜分析 | 第30-31页 |
·空间结构分析 | 第31-32页 |
第三节 小结与讨论 | 第32-35页 |
第二章 藻红蛋白亚基在毕赤酵母中表达 | 第35-55页 |
第一节 材料与方法 | 第35-44页 |
·材料 | 第35-38页 |
·实验方法 | 第38-44页 |
第二节 结果与分析 | 第44-52页 |
·目的基因peA与peB的扩增 | 第44-45页 |
·重组表达质粒的构建 | 第45-47页 |
·重组毕赤酵母工程菌的构建 | 第47-50页 |
·毕赤酵母工程菌的诱导表达 | 第50-51页 |
·mRNA水平检测表达情况 | 第51-52页 |
第三节 小结与讨论 | 第52-55页 |
第三章 藻红蛋白亚基在大肠杆菌中表达 | 第55-65页 |
第一节 材料与方法 | 第55-60页 |
·材料 | 第55-57页 |
·实验方法 | 第57-60页 |
第二节 结果与分析 | 第60-64页 |
·目的基因peA与peB的扩增 | 第60-61页 |
·重组表达质粒的构建 | 第61页 |
·重组E.coli BL21工程菌的构建 | 第61-62页 |
·E coli BL21工程菌的诱导表达 | 第62-64页 |
第三节 小结与讨论 | 第64-65页 |
第四章 藻红蛋白基因密码子偏好性分析 | 第65-73页 |
第一节 材料与方法 | 第65页 |
·序列数据与软件 | 第65页 |
·方法 | 第65页 |
第二节 结果与分析 | 第65-71页 |
·有效密码子数(ENC)和GC含量分析 | 第65-66页 |
·密码子偏好性分析 | 第66-68页 |
·紫球藻藻红蛋白基因与大肠杆菌、毕赤酵母的密码子偏好性比较 | 第68-71页 |
第三节 小结与讨论 | 第71-73页 |
第五章 结论 | 第73-75页 |
附录1 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-89页 |
个人简历 | 第89-90页 |