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酿酒酵母菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达及其信号通路初步研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
缩略语表第10-11页
1 引言第11-19页
    1.1 抗菌肽第11页
    1.2 防御素第11-12页
    1.3 β-防御素第12-13页
        1.3.1 β-防御素的来源和分布第12页
        1.3.2 β-防御素的分子结构特征第12-13页
        1.3.3 β-防御素的生物学活性第13页
    1.4 益生性酵母菌第13-14页
    1.5 益生菌诱导防御素表达的研究进展第14-15页
    1.6 NF-kB及MAPKs信号通路第15-16页
    1.7 研究目的及意义第16-18页
    1.8 技术路线第18-19页
2 试验内容第19-26页
    2.1 材料与方法第19页
        2.1.1 试验材料第19页
        2.1.2 仪器与试剂第19页
    2.2 试验方法第19-25页
        2.2.1 绵羊RECs的培养和鉴定第19-20页
        2.2.2 酿酒酵母菌的培养第20-21页
        2.2.3 酿酒酵母菌诱导SBD-1表达及其信号通路初步研究第21-22页
        2.2.4 绵羊RECs总RNA的提取第22-23页
        2.2.5 总RNA的反转录第23-24页
        2.2.6 RT-qPCR第24-25页
        2.2.7 RT-qPCR标准曲线建立第25页
        2.2.8 SBD-1 mRNA表达水平的计算第25页
        2.2.9 统计分析第25页
    2.3 ELISA检测共培养上清中SBD-1蛋白的表达及标准曲线的绘制第25-26页
3 结果第26-36页
    3.1 细胞培养第26页
    3.2 绵羊RECs的鉴定第26-27页
    3.3 总RNA纯度及质量分析第27-28页
    3.4 标准品的鉴定第28页
    3.5 RT-qPCR结果第28-30页
        3.5.1 SBD-1基因和β-actin基因RT-qPCR扩增曲线及熔解曲线第28-30页
        3.5.2 SBD-1基因和β-actin基因PCR扩增效率曲线第30页
    3.6 酿酒酵母菌对绵羊RECs SBD-1 mRNA相对表达量的影响第30-31页
    3.7 酿酒酵母菌对绵羊RECs SBD-1 蛋白相对表达量的影响第31-32页
        3.7.1 ELISA试验标准曲线第31-32页
        3.7.2 酿酒酵母菌诱导RECs培养上清中SBD-1的蛋白表达检测结果第32页
    3.8 酿酒酵母菌诱导SBD-1表达的信号通路初步研究结果第32-36页
4 讨论第36-40页
    4.1 酿酒酵母菌诱导绵羊RECs SBD-1的表达第36-37页
    4.2 酿酒酵母菌诱导绵羊RECs SBD-1表达的信号通路初步研究第37-40页
5 结论第40-41页
6 展望第41-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-51页
作者简介第51页

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