| 英文缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-20页 |
| 1. FHIT 基因 | 第12-13页 |
| ·FHIT 基因简介 | 第12页 |
| ·FHIT 基因研究过程 | 第12页 |
| ·FHIT 基因的功能及作用 | 第12-13页 |
| 2.microRNA | 第13-15页 |
| ·microRNA 简介 | 第13-14页 |
| ·microRNA 合成过程和作用机制 | 第14-15页 |
| ·microRNA 与肿瘤的关系 | 第15页 |
| 3. SIRNA | 第15-18页 |
| ·RNA 干扰简介 | 第15-16页 |
| ·siRNA 的制备方法 | 第16-17页 |
| ·siRNA 与miRNA 的联系与区别 | 第17-18页 |
| 4. 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 材料与方法 | 第20-30页 |
| 1. 材料 | 第20-22页 |
| ·引物合成及序列测定 | 第20页 |
| ·菌株、细胞株及质粒 | 第20页 |
| ·分子生物学工具酶 | 第20页 |
| ·常用分子生物学试剂盒 | 第20-21页 |
| ·细胞培养试剂与耗材及化学处理试剂 | 第21页 |
| ·RNA 提取相关试剂 | 第21页 |
| ·蛋白印迹(Western Blot)技术相关试剂 | 第21页 |
| ·常规试剂 | 第21-22页 |
| ·大型仪器 | 第22页 |
| ·实验中使用的主要软件 | 第22页 |
| 2. 方法 | 第22-30页 |
| ·生物信息学检索 | 第22页 |
| ·细胞培养及转染 | 第22-23页 |
| ·常规PCR 反应 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的构建、阳性克隆的鉴定 | 第24页 |
| ·突变体的构建 | 第24-25页 |
| ·FHIT-siRNA 表达载体的构建 | 第25页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第26页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第26-27页 |
| ·细胞裂解 | 第27页 |
| ·Western 印迹 | 第27-28页 |
| ·DNA 损伤诱导剂处理细胞 | 第28页 |
| ·MTT 比色法检测细胞生长曲线 | 第28页 |
| ·流式细胞术检测G2 期延迟 | 第28-29页 |
| ·其他 | 第29-30页 |
| 结果与分析 | 第30-47页 |
| 第一部分 FHIT 小干扰RNA 的构建及干扰效果检测 | 第30-34页 |
| 1. FHIT-siRNA 表达载体的设计及构建 | 第30-31页 |
| 2. FHIT-siRNA 载体测序分析 | 第31-32页 |
| 3. FHIT-siRNA 对FHIT 及相关基因表达的影响 | 第32-33页 |
| 小结 | 第33-34页 |
| 第二部分 靶向FHIT 的MICRORNA 的筛选 | 第34-41页 |
| 1. 靶向FHIT 的microRNA 生物信息学检索 | 第34-35页 |
| 2. FHIT 3’UTR 荧光素酶报告基因载体的构建 | 第35-36页 |
| 3. 荧光素酶报告基因检测结果 | 第36-38页 |
| 4. Western 印迹检测结果 | 第38页 |
| 5. FHIT 3’UTR 突变体荧光素酶报告基因载体的构建 | 第38-39页 |
| 6. FHIT 3’UTR 突变体荧光素酶报告基因检测结果 | 第39-40页 |
| 小结 | 第40-41页 |
| 第三部分 靶向FHIT 的MICRORNA 的功能研究 | 第41-47页 |
| 1. 流式细胞计量检测 | 第41-43页 |
| 2. miR-143 对FHIT 相关基因的调控 | 第43-44页 |
| 3. MTT 法检测细胞生长曲线 | 第44-46页 |
| 小结 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-49页 |
| 1.siRNA 设计的原则 | 第47页 |
| 2.靶向性的 microRNA 的筛选 | 第47-48页 |
| 3.miR-143 在肿瘤治疗过程中的作用 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 硕士期间发表文章 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
