符号说明 | 第3-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
1 前言 | 第8-23页 |
1.1 花发育的模型 | 第8-14页 |
1.1.1 花器官发育的分子模型 | 第8-9页 |
1.1.2 花分生组织特性的维持和终止 | 第9-11页 |
1.1.3 花器官分化 | 第11-12页 |
1.1.4 边界决定基因 | 第12-13页 |
1.1.5 矮牵牛花发育研究 | 第13-14页 |
1.2 重瓣花的相关研究进展 | 第14-18页 |
1.2.1 重瓣花起源 | 第15页 |
1.2.2 重瓣花的发生机制 | 第15-17页 |
1.2.3 生长素信号响应因子ARF3与花器官发育 | 第17-18页 |
1.3 染色体步移技术 | 第18-19页 |
1.3.1 反向PCR(inverse PCR) | 第18页 |
1.3.2 连接法介导的PCR(ligation-mediated PCR) | 第18-19页 |
1.3.3 随机引物PCR(randomly primed PCR) | 第19页 |
1.4 植物组基因编辑敲除系统 | 第19-21页 |
1.4.1 基因组编辑技术 | 第19-20页 |
1.4.2 CRISPR-Cas9系统 | 第20页 |
1.4.3 CRISPR-Cas9的结构及作用机理 | 第20-21页 |
1.5 矮牵牛重瓣花发育相关基因的表达分析 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-34页 |
2.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 质粒与菌株 | 第23页 |
2.1.3 所用的生化试剂 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-34页 |
2.2.1 矮牵牛无菌苗的培养 | 第23页 |
2.2.2 染色体步移扩增FBP6基因序列 | 第23-25页 |
2.2.3 矮牵牛单重瓣中PhWUS、PhAP2A、PhARF3基因差异表达分析 | 第25-27页 |
2.2.4 载体构建 | 第27-32页 |
2.2.5 农杆菌介导遗传转化 | 第32-34页 |
3 结果与分析 | 第34-43页 |
3.1 步移克隆PMADS3、FBP6基因结果与分析 | 第34-37页 |
3.2 矮牵牛单重瓣中PHWUS、PHAP2A、PHARF3基因差异表达分析 | 第37-40页 |
3.2.1 PhWUS差异表达分析 | 第37-38页 |
3.2.2 PhAP2A差异表达分析 | 第38-39页 |
3.2.3 PhARF3差异表达分析 | 第39-40页 |
3.3 矮牵牛敲除PMADS3、FBP6载体构建及遗传转化结果与分析 | 第40-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
4.1 利用染色体步移技术克隆未知基因 | 第43页 |
4.2 矮牵牛C类基因PMADS3、FBP6敲除 | 第43-44页 |
4.3 矮牵牛重瓣花发育过程中差异基因分析 | 第44-45页 |
4.4 展望 | 第45-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-58页 |
附录 | 第58-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况及主要研究成果 | 第62页 |