| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 黄河鲤鱼及其养殖现状 | 第12-13页 |
| 1.2 鱼类的免疫系统 | 第13-14页 |
| 1.2.1 免疫器官与组织 | 第13-14页 |
| 1.2.2 免疫细胞 | 第14页 |
| 1.2.3 体液免疫因子 | 第14页 |
| 1.3 活性氧 | 第14-16页 |
| 1.3.1 动物体活性氧的产生 | 第14-15页 |
| 1.3.2 活性氧的作用与危害 | 第15页 |
| 1.3.3 抗氧化酶的产生 | 第15-16页 |
| 1.4 Prx家族的简介及其生理功能 | 第16-18页 |
| 1.4.1 Prx家族的分类 | 第16页 |
| 1.4.2 Prx家族的作用 | 第16-17页 |
| 1.4.3 Prx3的研究背景 | 第17-18页 |
| 1.4.4 Prx4的研究背景 | 第18页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 嗜水气单胞菌 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.5 常用溶液配制 | 第21页 |
| 2.1.6 主要数据库及生物软件 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-37页 |
| 2.2.1 黄河鲤鱼总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.2 RNA质量测定 | 第22-23页 |
| 2.2.3 反转录合成cDNA | 第23页 |
| 2.2.4 黄河鲤鱼基因组DNA的提取及检测 | 第23-24页 |
| 2.2.5 引物设计 | 第24-25页 |
| 2.2.6 Prx3和Prx4基因组序列的扩增 | 第25-27页 |
| 2.2.7 生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.2.8 人工感染鲤鱼试验 | 第28页 |
| 2.2.9 荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 2.2.10 黄河鲤鱼Prx4基因的原核表达与蛋白纯化 | 第29-34页 |
| 2.2.11 总蛋白的提取 | 第34页 |
| 2.2.12 黄河鲤鱼Prx4蛋白的Western-blot检测 | 第34-35页 |
| 2.2.13 酶活鉴定 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-53页 |
| 3.1 RNA的质量检测 | 第37页 |
| 3.2 黄河鲤鱼Prx3和Prx4基因ORF克隆 | 第37-38页 |
| 3.3 黄河鲤鱼Prx3和Prx4基因全长的基本分析 | 第38-39页 |
| 3.4 黄河鲤鱼Prx3和Prx4序列的生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 3.5 黄河鲤鱼Prx与其他脊椎动物Prx的多序列比对分析 | 第40-41页 |
| 3.6 黄河鲤鱼Prx与其他物种Prx的系统进化树分析 | 第41-44页 |
| 3.7 黄河鲤鱼Prx3和Prx4基因蛋白质空间结构 | 第44页 |
| 3.8 荧光定量PCR体系的摸索 | 第44-46页 |
| 3.9 黄河鲤鱼感染嗜水汽单胞菌后Prx3和Prx4基因的表达变化 | 第46-48页 |
| 3.10 黄河鲤鱼Prx4重组质粒的构建 | 第48-49页 |
| 3.11 重组pMAL-c5x-Prx4蛋白的诱导条件优化 | 第49页 |
| 3.12 表达产物的纯化及酶切 | 第49-50页 |
| 3.13 蛋白在各个组织中的表达情况 | 第50-51页 |
| 3.14 抗氧化活性 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 Prx在鱼类研究方面的分析 | 第53页 |
| 4.2 黄河鲤鱼Prx3和Prx4保守性的分析 | 第53-54页 |
| 4.3 黄河鲤鱼Prx3和Prx4表达水平的分析 | 第54页 |
| 4.4 重组蛋白Prx4抗氧化活性的分析 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
