| 符号说明 | 第5-12页 |
| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| PART I 糖皮质激素通过激活Fas系统、引起卵巢细胞凋亡而削弱卵子发育能力 | 第16-48页 |
| 1 前言 | 第16-26页 |
| 1.1 应激 | 第16-17页 |
| 1.1.1 应激的概念 | 第16页 |
| 1.1.2 应激与HPA轴 | 第16-17页 |
| 1.1.3 应激与雌性生殖 | 第17页 |
| 1.2 糖皮质激素 | 第17-19页 |
| 1.2.1 糖皮质激素对糖皮质激素受体的调节作用 | 第17-18页 |
| 1.2.2 糖皮质激素抵抗 | 第18页 |
| 1.2.3 糖皮质激素与炎症反应 | 第18页 |
| 1.2.4 糖皮质激素与细胞凋亡 | 第18-19页 |
| 1.3 Fas/Fas L信号通路 | 第19-20页 |
| 1.3.1 Fas与细胞凋亡 | 第19页 |
| 1.3.2 Fas在应激中的作用 | 第19页 |
| 1.3.3 Fas/Fas L通路与卵母细胞发育能力 | 第19-20页 |
| 1.4 生长因子与卵子发育 | 第20-22页 |
| 1.4.1 IGF1与卵母细胞发育能力 | 第20-21页 |
| 1.4.2 BDNF与卵母细胞发育能力 | 第21-22页 |
| 1.5 细胞凋亡 | 第22-24页 |
| 1.5.1 细胞凋亡的定义 | 第22-23页 |
| 1.5.2 细胞凋亡的检测方法 | 第23-24页 |
| 1.5.3 卵丘细胞凋亡与卵母细胞发育 | 第24页 |
| 1.6 本文主要研究内容 | 第24-26页 |
| 2 材料方法 | 第26-35页 |
| 2.1 主要试剂及配制 | 第26页 |
| 2.2 小鼠及实验处理 | 第26-27页 |
| 2.2.1 皮质醇注射方法 | 第27页 |
| 2.2.2 束缚应激处理 | 第27页 |
| 2.3 卵巢、卵丘细胞及壁颗粒细胞收集方法 | 第27页 |
| 2.4 卵母细胞体外成熟培养 | 第27-28页 |
| 2.5 卵母细胞激活及胚胎培养 | 第28页 |
| 2.6 血清收集及卵巢匀浆的方法 | 第28页 |
| 2.7 激素检测方法 | 第28页 |
| 2.8 蛋白印记方法 | 第28-30页 |
| 2.8.1 western blot试剂及溶液 | 第28-29页 |
| 2.8.2 卵母细胞蛋白的提取 | 第29页 |
| 2.8.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.8.4 抗原抗体孵育及显色方法 | 第29-30页 |
| 2.9 实时定量PCR | 第30-32页 |
| 2.9.1 卵巢、壁颗粒细胞及卵丘细胞的获取 | 第30页 |
| 2.9.2 总RNA提取、反转录 | 第30-31页 |
| 2.9.3 荧光定量检测m RNA含量的变化 | 第31-32页 |
| 2.10 凋亡检测方法 | 第32页 |
| 2.11 酶联免疫法检测CRH、Fas L | 第32-33页 |
| 2.12 免疫荧光 | 第33页 |
| 2.13 数据分析 | 第33-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-43页 |
| 3.1 注射皮质醇对血清和卵巢中皮质醇含量及卵子发育能力的影响 | 第35-36页 |
| 3.2 注射皮质醇对壁颗粒细胞和卵丘细胞凋亡影响 | 第36-37页 |
| 3.3 注射皮质醇对血清和卵巢匀浆中E2、P4、Fas L和CRH的影响 | 第37-39页 |
| 3.4 注射皮质醇对壁颗粒细胞中Igf1、Bdnf和Gr m RNA表达的影响 | 第39页 |
| 3.5 注射皮质醇对卵母细胞、壁颗粒细胞和卵丘细胞中Fas表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.6 注射皮质醇对卵母细胞成熟（-SGH）及CCM-Fas L浓度的影响 | 第40-41页 |
| 3.7 注射皮质醇对gld小鼠卵子发育及壁颗粒细胞、卵丘细胞凋亡的影响 | 第41-43页 |
| 4.讨论 | 第43-47页 |
| 4.1 糖皮质激素对糖皮质激素受体的调节作用 | 第43页 |
| 4.2 糖皮质激素对Fas/Fas L信号通路的调节作用 | 第43页 |
| 4.3 糖皮质激素对性腺类固醇激素的调节 | 第43-44页 |
| 4.4 糖皮质激素对生长因子的调节 | 第44页 |
| 4.5 生长因子与类固醇激素与细胞凋亡的关系 | 第44-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| PART II着床前母体心理应激增加后代焦虑行为：体外实验研究糖皮质激素的作用 | 第48-77页 |
| 1 前言 | 第48-57页 |
| 1.1 焦虑 | 第48-49页 |
| 1.1.1 生理性焦虑 | 第48-49页 |
| 1.1.2 病理性焦虑 | 第49页 |
| 1.2 产前应激与焦虑 | 第49-50页 |
| 1.3 产前应激影响胎儿发育的机制 | 第50-51页 |
| 1.3.1 产前应激中糖皮质激素的作用 | 第50页 |
| 1.3.2 胎盘CRH、11β-HSD2与胎儿脑“编程” | 第50页 |
| 1.3.3 产前应激对后代HPA轴和海马的影响 | 第50-51页 |
| 1.4 产前应激与表观遗传 | 第51-52页 |
| 1.5 海马在应激反应中的作用 | 第52-53页 |
| 1.5.1 调控生理状态下HPA轴活性 | 第52-53页 |
| 1.5.2 调控应激状态下HPA轴活性 | 第53页 |
| 1.6 糖皮质激素及其受体在应激反应中的作用 | 第53-54页 |
| 1.6.1 糖皮质激素 | 第53页 |
| 1.6.2 糖皮质激素受体 | 第53-54页 |
| 1.6.3 糖皮质激素受体与焦虑 | 第54页 |
| 1.7 BDNF在应激反应中的作用 | 第54-55页 |
| 1.7.1 BDNF与焦虑 | 第55页 |
| 1.8 糖皮质激素BDNF的调控作用 | 第55-56页 |
| 1.8.1 糖皮质激素对BDNF转录的影响 | 第55-56页 |
| 1.8.2 糖皮质激素对BDNF m RNA稳定性的影响 | 第56页 |
| 1.8.3 糖皮质激素对BDNF转录、加工、运输和分泌的影响 | 第56页 |
| 1.9 本文主要研究内容 | 第56-57页 |
| 2 材料方法 | 第57-62页 |
| 2.1 主要试剂及配制 | 第57页 |
| 2.2 实验动物及应激处理 | 第57-58页 |
| 2.3 饮水和采食的测定 | 第58页 |
| 2.4 胚胎移植 | 第58页 |
| 2.4.1 制作不育雄鼠的输精管切除术 | 第58页 |
| 2.4.2 供体处理方法 | 第58页 |
| 2.4.3 受体处理方法 | 第58页 |
| 2.5 焦虑行为检测 | 第58-59页 |
| 2.5.1 高架十字迷宫测试 | 第59页 |
| 2.5.2 旷场行为测试 | 第59页 |
| 2.5.3 明暗箱行为测试 | 第59页 |
| 2.6 荧光定量检测海马内相关基因m RNA含量的变化 | 第59-60页 |
| 2.6.1 海马组织的获取及RNA提取的前处理 | 第59-60页 |
| 2.6.2 总RNA提取、反转录 | 第60页 |
| 2.6.3 荧光定量PCR | 第60页 |
| 2.7 血清激素测量 | 第60页 |
| 2.8 免疫荧光染色方法 | 第60-61页 |
| 2.8.1 胚胎的获取、固定及卵裂球的分离 | 第60页 |
| 2.8.2 GR的染色方法 | 第60-61页 |
| 2.9 数据分析 | 第61-62页 |
| 3 实验结果 | 第62-73页 |
| 3.1 着床前束缚应激对F0母鼠的影响 | 第62-64页 |
| 3.1.1 束缚应激模型有效性的检测 | 第62-63页 |
| 3.1.2 束缚应激对母鼠饮水、采食及体重的影响 | 第63页 |
| 3.1.3 束缚应激对母鼠生殖的影响 | 第63-64页 |
| 3.2 着床前束缚应激对F1代小鼠焦虑行为的影响 | 第64-66页 |
| 3.2.1 F1代小鼠高架十字迷宫测试结果 | 第64-65页 |
| 3.2.2 F1代小鼠旷场测试结果 | 第65页 |
| 3.2.3 F1代小鼠明暗箱测试结果 | 第65-66页 |
| 3.3 着床前束缚应激对F1代海马内GR和BDNF mRNA表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.4 着床前束缚应激对F1代小鼠HPA轴活性的影响 | 第67页 |
| 3.5 胚胎移植 | 第67-68页 |
| 3.5.1 体外培养添加皮质酮对早期胚胎发育的影响 | 第67-68页 |
| 3.5.2 体外培养添加皮质酮对胚胎移植受体小鼠生殖的影响 | 第68页 |
| 3.6 体外培养添加皮质酮对ET后代小鼠焦虑行为的影响 | 第68-70页 |
| 3.6.1 ET后代小鼠高架十字迷宫测试结果 | 第68-69页 |
| 3.6.2 ET后代小鼠旷场测试结果 | 第69-70页 |
| 3.6.3 ET后代小鼠明暗箱测试结果 | 第70页 |
| 3.7 体外培养添加皮质酮对ET后代海马内GR、BDNF m RNA表达的影响 | 第70-71页 |
| 3.8 体外培养添加皮质酮对ET后代HPA轴活性的影响 | 第71-72页 |
| 3.9 GR在早期胚胎中的分布及变化情况 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-76页 |
| 4.1 着床前束缚应激及体外培养模型的建立 | 第73页 |
| 4.2 着床前束缚应激（皮质酮）对生殖的影响 | 第73-74页 |
| 4.3 着床前束缚应激（皮质酮）对焦虑行为的影响 | 第74页 |
| 4.4 着床前束缚应激（皮质酮）对后代HPA轴活性的影响 | 第74-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| PART I 参考文献 | 第77-87页 |
| PART II 参考文献 | 第87-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 攻读学位期间论文发表情况 | 第100页 |
