摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
缩略词(Abbreviation) | 第15-18页 |
前言 | 第18-24页 |
参考文献 | 第21-24页 |
第一部分 文献综述 | 第24-66页 |
第一章 哺乳动物卵巢卵泡闭锁与卵母细胞老化的研究进展 | 第24-48页 |
1 卵泡闭锁 | 第25-33页 |
1.1 卵泡闭锁的形态特征与生化特征 | 第25页 |
1.2 闭锁卵泡的类型 | 第25-26页 |
1.3 卵泡闭锁的机制 | 第26-33页 |
1.4 展望 | 第33页 |
2 卵母细胞老化 | 第33-41页 |
2.1 卵母细胞老化引起的危害 | 第33-34页 |
2.2 卵母细胞老化的机理和影响老化的因素 | 第34-36页 |
2.3 卵母细胞老化过程中主要的分子、生化和细胞学变化 | 第36-39页 |
2.4 卵母细胞老化与成熟和凋亡的关系 | 第39-40页 |
2.5 展望 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
第二章 胚胎体外发育潜能的评估 | 第48-66页 |
1 胚胎体外发育潜能的评价体系 | 第48-55页 |
1.1 形态学评估 | 第48-51页 |
1.2 基因组学评价 | 第51-52页 |
1.3 转录组学评价 | 第52页 |
1.4 蛋白组学评价 | 第52-53页 |
1.5 代谢组学评价 | 第53-55页 |
2 胚胎代谢液分析评估胚胎的发育潜能 | 第55-59页 |
2.1 胚胎代谢组学常用分析技术 | 第55-56页 |
2.2 胚胎代谢组学数据处理方法 | 第56页 |
2.3 胚胎培养液的代谢组学研究 | 第56-59页 |
3 展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
第二部分 试验研究 | 第66-146页 |
第三章 PGC-1α和NRF-1在山羊卵泡发育和闭锁过程中表达变化的研究 | 第66-88页 |
1 材料与方法 | 第67-75页 |
1.1 样品采集 | 第67-68页 |
1.2 主要仪器 | 第68页 |
1.3 主要试剂 | 第68-69页 |
1.4 试验方法 | 第69-75页 |
2 结果与分析 | 第75-83页 |
2.1 目的蛋白在山羊卵巢卵泡发育过程中的定位 | 第75-78页 |
2.2 卵泡内雌激素和孕酮的含量检测 | 第78页 |
2.3 总RNA与目的基因扩增的验证 | 第78-79页 |
2.4 目的基因在山羊卵巢卵泡发育过程中的定量表达 | 第79-81页 |
2.5 目的蛋白在山羊卵巢卵泡发育过程中的蛋白表达 | 第81-83页 |
3 讨论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-88页 |
第四章 PGC-1α和NRF-1调控体外培养山羊颗粒细胞凋亡的研究 | 第88-112页 |
1 材料与方法 | 第89-96页 |
1.1 样品收集 | 第89-90页 |
1.2 主要仪器 | 第90页 |
1.3 主要试剂 | 第90页 |
1.4 试验方法 | 第90-96页 |
2 结果与分析 | 第96-106页 |
2.1 PGC-1α和NRF-1在体外培养颗粒细胞中的表达 | 第96-97页 |
2.2 PGC-1α和NRF-1干扰载体的构建 | 第97-98页 |
2.3 PGC-1α和NRF-1过表达载体的构建 | 第98-99页 |
2.4 PGC-1α和NRF-1对mtDNA的含量和细胞活性的影响 | 第99-101页 |
2.5 PGC-1α和NRF-1对抗氧化相关基因表达的影响 | 第101-102页 |
2.6 PGC-1α和NRF-1对凋亡相关基因表达的影响 | 第102页 |
2.7 PGC-1α和NRF-1对Caspase 9和Caspase 3活性的影响 | 第102-103页 |
2.8 PGC-1α和NRF-1对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第103页 |
2.9 PGC-1α和NRF-1对细胞周期和凋亡的影响 | 第103-106页 |
3 讨论 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-112页 |
第五章 PGC-1α和NRF-1在山羊卵母细胞老化过程中作用的研究 | 第112-128页 |
1 材料与方法 | 第114-117页 |
1.1 样品采集 | 第114页 |
1.2 主要仪器 | 第114页 |
1.3 主要试剂 | 第114-115页 |
1.4 主要溶液配制 | 第115页 |
1.5 试验方法 | 第115-117页 |
2 结果与分析 | 第117-123页 |
2.1 山羊卵母细胞体外培养老化时间点的确定 | 第117-118页 |
2.2 卵丘卵母细胞TUNEL凋亡的检测 | 第118-120页 |
2.3 目的基因在山羊COCs的卵母细胞内的表达 | 第120-121页 |
2.4 目的基因在山羊COCs的卵丘细胞内的表达 | 第121-123页 |
3 讨论 | 第123-125页 |
参考文献 | 第125-128页 |
第六章 PGC-1α和NRF-1评价山羊转基因克隆胚胎体外发育潜能的初步研究 | 第128-146页 |
1 材料与方法 | 第130-133页 |
1.1 样品采集 | 第130页 |
1.2 主要仪器 | 第130页 |
1.3 主要试剂 | 第130页 |
1.4 主要溶液配制 | 第130页 |
1.5 试验方法 | 第130-133页 |
2 结果与分析 | 第133-139页 |
2.1 基于形态评估的不同分组对体外克隆胚胎后续发育潜能的影响 | 第133-134页 |
2.2 代谢组学检测及数据预处理 | 第134页 |
2.3 主成分(PCA)分析 | 第134-136页 |
2.4 偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)及对模型的验证 | 第136页 |
2.5 基于形态学评估的不同质量胚胎代谢液中差异代谢物的分析 | 第136页 |
2.6 目的基因在转基因克隆胚胎中表达的研究 | 第136-139页 |
3 讨论 | 第139-142页 |
参考文献 | 第142-146页 |
全文结论 | 第146-148页 |
创新点 | 第148-150页 |
进一步研究的内容 | 第150-152页 |
攻读博士期间发表的学术论文 | 第152-154页 |
致谢 | 第154页 |