摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
缩略词(ABBREVIATION) | 第16-18页 |
第一部分 文献综述 | 第18-42页 |
第一章 热应激及其研究进展 | 第18-32页 |
1 应激综述 | 第18-21页 |
1.1 细胞水平反应 | 第18-20页 |
1.2 分子水平反应 | 第20-21页 |
2 热休克蛋白概述 | 第21-32页 |
2.1 热休克蛋白的发现 | 第21页 |
2.2 热休克蛋白的分类 | 第21-22页 |
2.3 热休克蛋白的结构和生物学功能 | 第22-32页 |
第二章 转录组学和蛋白质组学的研究方法及当前进展 | 第32-42页 |
1 转录组学 | 第32-36页 |
1.1 研究转录组的基本方法 | 第32-34页 |
1.2 RNA-Seq研究进展 | 第34-36页 |
2 蛋白质组学 | 第36-40页 |
2.1 双向电泳技术 | 第36-37页 |
2.2 免疫共沉淀技术 | 第37页 |
2.3 蛋白质芯片技术 | 第37-38页 |
2.4 同位素标记相对和绝对定量技术 | 第38-39页 |
2.5 质谱和生物信息学分析 | 第39-40页 |
3 本研究的目的及意义 | 第40-42页 |
第二部分 试验研究 | 第42-118页 |
第三章 急性热应激对北京鸭和番鸭肝脏组织病理损伤及相关抗氧化活性的影响 | 第42-48页 |
1 材料与方法 | 第43-44页 |
1.1 样品采集 | 第43页 |
1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
1.3 主要仪器 | 第44页 |
1.4 试验方法 | 第44页 |
1.5 数据统计 | 第44页 |
2 结果 | 第44-46页 |
2.1 热处理对北京鸭和番鸭肝脏组织结构的影响 | 第44-45页 |
2.2 热处理对北京鸭番鸭肝脏组织抗氧化酶活性的影响 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
第四章 热应激对北京鸭和番鸭肝脏组织热休克蛋白(HSPS)及相关炎性因子的影响 | 第48-58页 |
1 材料与方法 | 第49-51页 |
1.1 样品采集 | 第49页 |
1.2 试剂 | 第49页 |
1.3 仪器 | 第49-50页 |
1.4 试验方法 | 第50-51页 |
2 结果与分析 | 第51-55页 |
2.1 热应激北京鸭和番鸭肝脏组织中HSPs基因表达水平 | 第51-53页 |
2.2 热应激北京鸭和番鸭各组织中HSP70基因表达水平 | 第53-54页 |
2.3 热应激北京鸭和番鸭肝脏中相关炎性因子表达水平 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
第五章 热应激番鸭肝脏组织的差异转录组学分析 | 第58-78页 |
1 材料与方法 | 第60-64页 |
1.1 样品采集 | 第60页 |
1.2 试剂 | 第60页 |
1.3 仪器 | 第60页 |
1.4 试验方法 | 第60-64页 |
2 结果与分析 | 第64-74页 |
2.1 总RNA提取结果 | 第64页 |
2.2 组装结果分析 | 第64-66页 |
2.3 拼接转录本的注释 | 第66-68页 |
2.4 拼接转录本的GO功能及KEGG通路分析 | 第68-70页 |
2.5 差异基因的筛选及分析 | 第70-73页 |
2.6 差异基因的qRCR验证 | 第73-74页 |
2.7 SSR简单序列重复标记 | 第74页 |
3 讨论 | 第74-77页 |
3.1 转录组文库构建及拼接序列的注释情况 | 第74-75页 |
3.2 差异基因的分析 | 第75-76页 |
3.3 SSR简单序列重复标记 | 第76-77页 |
4 小结 | 第77-78页 |
第六章 抑制HSP70基因表达对鸭肝脏细胞凋亡相关基因表达的影响 | 第78-88页 |
1 材料与方法 | 第79-82页 |
1.1 样品采集 | 第79页 |
1.2 试剂及主要溶液配制 | 第79-80页 |
1.3 仪器 | 第80页 |
1.4 试验方法 | 第80-82页 |
2 结果 | 第82-86页 |
2.1 鸭肝脏原代细胞培养 | 第82-83页 |
2.2 鸭原代肝细胞生长曲线 | 第83-84页 |
2.3 HSP70-siRNA干扰引物筛选与优化 | 第84-85页 |
2.4 HSP70对细胞凋亡通路关键基因表达的影响 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-88页 |
第七章 热应激条件下北京鸭和番鸭肝脏蛋白质代谢的研究 | 第88-108页 |
1 材料与方法 | 第90-93页 |
1.1 样品采集 | 第90页 |
1.2 试剂 | 第90页 |
1.3 仪器 | 第90页 |
1.4 试验方法 | 第90-93页 |
2 结果 | 第93-104页 |
2.1 北京鸭与番鸭热应激前后差异表达蛋白的鉴定 | 第93-96页 |
2.2 北京鸭与番鸭热应激及恢复期间比较蛋白组学分析 | 第96-98页 |
2.3 差异蛋白的信息学分析 | 第98-102页 |
2.4 差异表达蛋白的转录水平验证 | 第102-104页 |
3 讨论 | 第104-107页 |
3.1 氧化应激蛋白 | 第104页 |
3.2 信号通路相关蛋白 | 第104-105页 |
3.3 能量代谢相关蛋白 | 第105页 |
3.4 氨基酸和蛋白质代谢相关蛋白 | 第105-107页 |
4 结论 | 第107-108页 |
第八章 番鸭ENO1基因CDS序列克隆及结构分析 | 第108-118页 |
1 材料与方法 | 第109-112页 |
1.1 样品采集 | 第109页 |
1.2 试剂 | 第109-110页 |
1.3 仪器 | 第110页 |
1.4 试验方法 | 第110-112页 |
2 结果 | 第112-116页 |
2.1 番鸭ENO1基因克隆测序结果分析 | 第112-113页 |
2.2 北京鸭与番鸭ENO1基因结构分析 | 第113-114页 |
2.3 北京鸭与番鸭α-enolase三级结构比较 | 第114-116页 |
3 讨论 | 第116-118页 |
参考文献 | 第118-140页 |
全文结论 | 第140-142页 |
创新点 | 第142-144页 |
附录 | 第144-148页 |
攻读博士期间发表及待发表的论文 | 第148-150页 |
致谢 | 第150页 |