| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 符号及缩略语 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 第一部分 文献综述 | 第19-39页 |
| 第一章 哺乳动物卵母细胞成熟的主要特征 | 第19-25页 |
| 1 哺乳动物卵母细胞的成熟 | 第19-20页 |
| 2 卵母细胞成熟的重要特征 | 第20-21页 |
| 2.1 染色体连续精确分离二次 | 第20-21页 |
| 2.2 不均等分裂 | 第21页 |
| 3 调控卵母细胞成熟的分子基础 | 第21-22页 |
| 3.1 细胞骨架 | 第21-22页 |
| 3.2 皮质颗粒 | 第22页 |
| 4 卵母细胞成熟过程中发生的重要生物学变化 | 第22-25页 |
| 4.1 纺锤体的迁移与定位 | 第22-23页 |
| 4.2 微丝的动态分布和微丝帽的形成 | 第23-24页 |
| 4.3 皮质区域重组 | 第24-25页 |
| 第二章 卵母细胞不均等分裂的分子调控机制的研究进展 | 第25-39页 |
| 1 微丝成核因子(ACTIN NUCLEATION FACTORS) | 第27-30页 |
| 1.1 Arp2/3复合物和NPFs | 第27-29页 |
| 1.2 Formin家族蛋白 | 第29-30页 |
| 1.3 包含WH2区域的微丝成核因子 | 第30页 |
| 2 小GTP酶(SMALL GTPASES):微丝成核因子的激活物 | 第30-32页 |
| 2.1 Rho GTPases | 第30-31页 |
| 2.2 Ran GTPase | 第31-32页 |
| 2.3 Arf GTPases | 第32页 |
| 2.4 Rho-kinase(ROCK) | 第32页 |
| 3 调控微丝成核因子及小GTP酶的因子 | 第32-36页 |
| 3.1 分区缺陷蛋白(Paitioning-Defective,PAR)和蛋白激酶C蛋白(Protein Kinase C,PKC)复合物 | 第33页 |
| 3.2 Src家族激酶(Src Family Kinases,SFKs) | 第33页 |
| 3.3 肌球蛋白(Myosin)/肌球蛋白轻链激酶(Myosin Light-Chain Kinase,MLCK) | 第33-34页 |
| 3.4 MicroRNAs(miRNAs) | 第34-35页 |
| 3.5 自噬因子mTOR | 第35页 |
| 3.6 顺式高尔基体相关蛋白 | 第35-36页 |
| 4 微管相关蛋白 | 第36-38页 |
| 4.1 纺锤体稳定调控因子 | 第36页 |
| 4.2 纺锤体组装检验点(Spindle Assembly Checkpoint,SAC)调控因子 | 第36-38页 |
| 5 结语 | 第38-39页 |
| 第二部分 试验研究 | 第39-95页 |
| 第三章 微丝成核促进因子WASH复合物通过调控ARP2/3复合物参与小鼠卵母细胞的成熟过程 | 第39-65页 |
| 1 试验材料 | 第40-46页 |
| 1.1 抗体和试剂 | 第40-41页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第41-43页 |
| 1.3 抗体和试剂的配制 | 第43-46页 |
| 2 试验方法 | 第46-52页 |
| 2.1 小鼠卵母细胞的采集和体外成熟培养 | 第46-47页 |
| 2.2 显微注射WASH1 morpholino(MO)或Strumpellin抗体 | 第47-48页 |
| 2.3 活细胞工作站 | 第48页 |
| 2.4 免疫荧光染色和激光共聚焦观察 | 第48-49页 |
| 2.5 免疫蛋白印迹法(Western blot) | 第49-51页 |
| 2.6 统计分析 | 第51-52页 |
| 3 结果分析 | 第52-61页 |
| 3.1 WASH1在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的表达定位 | 第52-53页 |
| 3.2 WASH复合物影响小鼠卵母细胞第一极体的排出 | 第53-56页 |
| 3.3 WASH复合物影响在卵母细胞减数分裂过程中的纺锤体的形成 | 第56-58页 |
| 3.4 WASH复合物影响在卵母细胞减数分裂成熟过程中的微丝分布与表达 | 第58-60页 |
| 3.5 WASH复合物在小鼠卵母细胞减数分裂中调控ARP的表达 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 5 小结 | 第62-65页 |
| 第四章 微丝成核因子ARP2/3复合物在猪卵母细胞成熟过程中的表达与功能 | 第65-77页 |
| 1 试验材料 | 第66-68页 |
| 1.1 抗体和试剂 | 第66页 |
| 1.2 抗体和试剂的配制 | 第66-68页 |
| 2 方法 | 第68-69页 |
| 2.1 猪卵母细胞分离与成熟培养 | 第68页 |
| 2.2 CK666处理卵母细胞 | 第68页 |
| 2.3 免疫荧光染色和激光共聚焦观察 | 第68-69页 |
| 2.4 荧光强度分析 | 第69页 |
| 2.5 统计分析 | 第69页 |
| 3 结果分析 | 第69-75页 |
| 3.1 Arp2/3复合物在猪卵母细胞减数分裂成熟中的定位表达 | 第69-70页 |
| 3.2 CK666处理降低了Arp2/3复合物在猪卵母细胞中的表达 | 第70-71页 |
| 3.3 CK666处理降低了猪卵母细胞的成熟率 | 第71-73页 |
| 3.4 CK666处理后干扰了微丝的表达 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 5 小结 | 第76-77页 |
| 第五章 微丝成核因子FMNL1通过调控细胞骨架的动态变化参与小鼠卵母细胞的成熟过程 | 第77-95页 |
| 1 试验材料 | 第78-79页 |
| 1.1 抗体和试剂 | 第78页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第78页 |
| 1.3 抗体和试剂的配制 | 第78-79页 |
| 2 试验方法 | 第79-82页 |
| 2.1 小鼠卵母细胞的采集和体外成熟培养 | 第79页 |
| 2.2 显微注射FMNL1 morpholino(MO) | 第79-80页 |
| 2.3 Rhosin处理小鼠卵母细胞 | 第80页 |
| 2.4 活细胞工作站 | 第80页 |
| 2.5 免疫荧光染色和激光共聚焦观察 | 第80-81页 |
| 2.6 Western blot | 第81页 |
| 2.7 荧光强度分析及蛋白条带强度分析 | 第81页 |
| 2.8 统计分析 | 第81-82页 |
| 3 结果分析 | 第82-92页 |
| 3.1 FMNL1在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中的表达 | 第82-84页 |
| 3.2 敲低FMNL1蛋白后导致第一极体排出异常 | 第84-86页 |
| 3.3 敲低FMNL1蛋白后干扰了微丝的表达分布和纺锤体的迁移 | 第86-88页 |
| 3.4 敲低FMNL1蛋白后导致纺锤体组装异常 | 第88-90页 |
| 3.5 FMNL1在小鼠卵母细胞中作用于RhoA-FMNL1-GM130信号通路 | 第90-92页 |
| 4 讨论 | 第92-94页 |
| 5 小结 | 第94-95页 |
| 全文结论 | 第95-97页 |
| 创新性 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-121页 |
| 附录 1:博士期间研究成果示意图 | 第121-123页 |
| 附录 2:攻读博士期间发表文章情况 | 第123-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
