| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-35页 |
| 1 萼片的形态和功能 | 第19页 |
| 2 影响梨萼片宿存的因素 | 第19-21页 |
| ·品种特性 | 第19页 |
| ·砧木品种 | 第19页 |
| ·授粉品种 | 第19-20页 |
| ·光照影响 | 第20页 |
| ·其他因素 | 第20页 |
| ·花萼脱落的调控研究与技术 | 第20-21页 |
| 3 植物器官脱落的主要研究进展 | 第21-27页 |
| ·器官脱落的组织的细胞形态学研究 | 第21-22页 |
| ·器官脱落的激素调节 | 第22-23页 |
| ·器官脱落相关酶的研究 | 第23-25页 |
| ·矿质营养对器官脱落的调控 | 第25页 |
| ·器官脱落分子生物学研究 | 第25-27页 |
| 4 高通量技术测序技术的发展 | 第27-32页 |
| ·高通量测序分析技术的原理及应用 | 第27-31页 |
| ·454测序技术原理及应用 | 第28-29页 |
| ·SOLliD测序 | 第29页 |
| ·Illumina/Solexa测序 | 第29-30页 |
| ·HeliScoper Sequencer | 第30-31页 |
| ·高通量方法鉴定植物器官脱落相关基因 | 第31-32页 |
| 5 脱落相关基因的研究进展 | 第32-33页 |
| ·IDA(inflorescence deficient in abscission)基因 | 第32页 |
| ·JOINTLESS基因 | 第32-33页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 喷施不同植物生长调节剂对‘库尔勒香梨’萼片发育的影响 | 第35-45页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料与处理方法 | 第35-36页 |
| ·主要测定方法 | 第36-37页 |
| ·数据处理 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-43页 |
| ·不同植物生长调节剂对‘库尔勒香梨’萼片脱落与宿存的影响 | 第37-38页 |
| ·喷施植物生长调节剂对花萼离区细胞壁水解酶活性的影响 | 第38-39页 |
| ·喷施植物生长调节剂对花萼内源激素含量的影响 | 第39-43页 |
| ·喷施植物生长调节剂对花萼生长素含量的影响 | 第39-40页 |
| ·喷施植物生长调节剂对花萼赤霉素含量的影响 | 第40-42页 |
| ·喷施植物生长调节剂对花萼脱落酸含量的影响 | 第42-43页 |
| ·喷施植物生长调节剂对花萼(IAA+GA_3)/ABA比值的影响 | 第43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 基于高通量Illumina测序技术的化学调控下‘库尔勒香梨’花萼脱落的表达谱研究 | 第45-63页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| ·实验材料及处理 | 第46页 |
| ·试验方法 | 第46-51页 |
| ·RNA提取 | 第46-47页 |
| ·测序实验 | 第47-49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| ·荧光定量RT-PCR验证表达变化的基因 | 第49-51页 |
| 2 结果与讨论 | 第51-63页 |
| ·RNA提取质量检测 | 第51-52页 |
| ·‘库尔勒香梨’花萼脱落过程Illumina测序结果统计 | 第52页 |
| ·脱萼处理、宿萼处理下花萼离区差异表达基因的筛选 | 第52-54页 |
| ·差异表达基因的主要生物学功能 | 第54-55页 |
| ·萼片脱落相关基因的分类 | 第55-62页 |
| ·光合作用 | 第55页 |
| ·植物激素信号转导 | 第55-56页 |
| ·细胞壁水解相关基因在萼片脱落过程中高度表达 | 第56-57页 |
| ·转录因子 | 第57-58页 |
| ·参与碳水化合物代谢 | 第58页 |
| ·其他差异表达的基因 | 第58-62页 |
| ·应用荧光定量验证表达谱结果 | 第62-63页 |
| 第四章 梨PsIDA基因的鉴定与功能研究 | 第63-79页 |
| 1 材料和方法 | 第63-70页 |
| ·试验材料 | 第63-64页 |
| ·试剂与菌株 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·供试菌株和载体 | 第64页 |
| ·总RNA的提取、纯化及ds-cDNA的合成 | 第64-66页 |
| ·总RNA的提取及纯度检测 | 第64-65页 |
| ·RNA完整性及纯度检测 | 第65页 |
| ·ds-cDNA的合成 | 第65-66页 |
| ·PsIDA基因克隆 | 第66页 |
| ·PsIDA基因系统进化分析 | 第66-67页 |
| ·PsIDA基因亚细胞定位 | 第67页 |
| ·PsIDA植物过表达载体的构建 | 第67页 |
| ·转基因番茄植株的获得 | 第67-69页 |
| ·农杆菌菌液的制备 | 第68页 |
| ·PsIDA基因转化Micro-Tom番茄植株的获得 | 第68-69页 |
| ·阳性转基因番茄初步确定 | 第69页 |
| ·T0代转基因番茄植株靶基因表达量分析 | 第69页 |
| ·转PsIDA基因植株的功能初步分析 | 第69-70页 |
| ·转基因植株的表型观察 | 第69页 |
| ·番茄花柄离区脱落相关基因的qRT-PCR分析 | 第69-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-77页 |
| ·‘库尔勒香梨’PsIDA的克隆 | 第70-71页 |
| ·PsIDA系统发生分析 | 第71-72页 |
| ·PsIDA-GFP融和蛋白的亚细胞定位 | 第72页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA 1301-PsIDA的构建 | 第72-73页 |
| ·转PsIDA基因番茄的获得及检测 | 第73-75页 |
| ·部分转PsIDA基因番茄植株半定量检测 | 第75页 |
| ·转基因番茄功能初步分析 | 第75-77页 |
| ·PsIDA过表达植株表型分析 | 第75-76页 |
| ·超表达PsIDA基因影响离区发育相关基因的表达 | 第76-77页 |
| 3 讨论 | 第77-79页 |
| 第五章 梨JOINTLESS基因的鉴定与功能研究 | 第79-97页 |
| 1 材料和方法 | 第80-84页 |
| ·植物材料和处理 | 第80页 |
| ·JOINTLESS基因的克隆 | 第80-81页 |
| ·JOINTLESS基因引物设计 | 第80页 |
| ·PCR扩增 | 第80-81页 |
| ·JOINTLESS基因系统进化分析 | 第81页 |
| ·基因表达分析(Real-time PCR) | 第81页 |
| ·JOINTLESS基因亚细胞定位 | 第81页 |
| ·JOINTLESS植物过表达载体的构建 | 第81-83页 |
| ·转基因番茄植株的获得及鉴定 | 第83-84页 |
| ·T0代转基因番茄植株靶基因表达量分析 | 第84页 |
| ·转基因植株功能的初步分析 | 第84页 |
| ·转基因阳性植株表型观察 | 第84页 |
| ·转基因植株花柄离区细胞学观察 | 第84页 |
| ·转基因植株花柄离区多聚半乳糖醛酸酶及纤维素酶活性的测定 | 第84页 |
| ·转基因番茄花柄离区脱落相关基因的qRT-PCR分析 | 第84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-95页 |
| ·‘库尔勒香梨’JOINTLESS基因的克隆 | 第84-86页 |
| ·‘库尔勒香梨’JOINTLESS的系统发生分析 | 第86-87页 |
| ·梨JOINTLESS基因表达特性的研究 | 第87页 |
| ·JOINTLESS-GFP融和蛋白的亚细胞定位 | 第87-88页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA 1301-JOINTLESS的构建 | 第88-90页 |
| ·转JOINTLESS基因的番茄的获得及检测 | 第90-91页 |
| ·部分转基因番茄植株的半定量检测 | 第91-92页 |
| ·转JOINTLESS基因的番茄表型观察 | 第92-93页 |
| ·转基因番茄植株细胞学分析 | 第93页 |
| ·转基因番茄花柄离区多聚半乳糖醛酸酶及纤维素酶活性的测 | 第93-94页 |
| ·PsJOINTLESS超表达影响离区形成等相关基因的表达 | 第94-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 综合讨论 | 第97-101页 |
| 1. 梨萼片脱落的生理学基础 | 第97-98页 |
| 2. 梨萼片脱落的分子调控机制 | 第98-99页 |
| 3. 脱落相关基因的功能鉴定 | 第99-101页 |
| 全文结论 | 第101-103页 |
| 创新点 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-121页 |
| 攻读博士学位期间发表(待发表)的论文 | 第121-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
