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我国猪伪狂犬病病毒变异株全基因组序列分析及其gE/gI基因缺失灭活疫苗免疫特性

摘要第1-13页
ABSTRACT第13-18页
综述部分第18-42页
 第一章 伪狂犬病病毒分子病毒学及其免疫研究进展第18-31页
  1 病原第18-27页
   ·病毒理化特性第18-19页
   ·病毒分子生物学特征第19-25页
   ·流行病学第25-26页
   ·病毒致病性第26-27页
  2 防制第27-31页
   ·PRV免疫第27-28页
   ·PRV疫苗第28-31页
 参考文献第31-42页
研究部分第42-146页
 第二章 我国猪伪狂犬病病毒超强毒株分离与鉴定第42-66页
  摘要第42-43页
  1 材料与方法第43-51页
   ·主要材料第43-44页
   ·临床病料与血清样品第44页
   ·病毒分离鉴定第44-45页
   ·病毒滴度测定第45-46页
   ·病毒粒子的电镜观察第46页
   ·PRV gE与gC基因的PCR扩增、克隆与基因测序第46-48页
   ·基因遗传进化树分析第48-49页
   ·PRV gE与gC基因编码氨基酸序列比对分析第49页
   ·PRV ZJ01动物感染试验第49-50页
   ·PRV不同毒株毒力比较第50页
   ·病理学观察第50-51页
   ·组织中PRV DNA载量的检测第51页
   ·PRV ELISA抗体检测第51页
   ·数据分析第51页
  2 结果第51-62页
   ·临床观察与血清学调查第51-53页
   ·病毒分离与鉴定第53-54页
   ·病毒粒子形态第54-55页
   ·gE和gC基因序列分析第55-56页
   ·PRV ZJ01株动物感染试验结果第56-59页
   ·毒力比较试验结果第59-62页
  3 讨论第62-64页
  参考文献第64-65页
  ABSTRACT第65-66页
 第三章 猪伪狂犬病病毒超强毒株ZJ01抗原特性鉴定第66-82页
  摘要第66-67页
  1 材料与方法第67-70页
   ·病毒与细胞第67页
   ·试剂第67页
   ·病毒血清交叉中和试验第67页
   ·PRV ZJ01株灭活疫苗制备第67-68页
   ·仔猪免疫保护试验第68-69页
   ·PRV ELISA抗体的检测第69页
   ·PRV中和抗体的检测第69页
   ·鼻腔排毒的检测第69页
   ·脏器组织中PRV病毒载量的检测第69页
   ·病理学观察第69-70页
   ·统计学分析第70页
  2 结果第70-76页
   ·清病毒交叉中和试验第70-72页
   ·猪体免疫试验结果第72-76页
  3 讨论第76-78页
  参考文献第78-80页
  abstract第80-82页
 第四章 猪伪狂犬病病毒超强毒株ZJ01全基因组序列测定与分析第82-112页
  摘要第82-83页
  1 材料与方法第83-89页
   ·病毒第83页
   ·试剂第83页
   ·PRV ZJ01基因组DNA的提取与纯化第83-85页
   ·Ion Torrent高通量测序第85页
   ·序列的拼接与组装第85页
   ·Gaps的填补第85-86页
   ·PRV ZJ01全基因组序列PCR验证第86-87页
   ·PRV ZJ01基因组RFLP验证第87页
   ·PRV ZJ01基因注释及功能预测GC含量的计算第87-88页
   ·进化树分析第88-89页
   ·PRV gE与gC基因编码氨基酸序列比对分析第89页
  2 结果与讨论第89-107页
   ·PRV ZJ01 gDNA提取与纯化第89页
   ·PRV ZJ01 基因组序列的测定第89-90页
   ·PRV ZJ01 基因组的注释第90-94页
   ·PRV ZJ01 编码蛋白的特点第94-103页
   ·PRV ZJ01 基因组调控序列的分析第103页
   ·基因序列进化分析第103-107页
  参考文献第107-110页
  abstract第110-112页
 第五章 猪伪狂犬病病毒超强毒株ZJO1 BAC细菌人工染色体构建与鉴定第112-134页
  摘要第112-113页
  1 材料与方法第113-121页
   ·病毒与细胞第113页
   ·质粒与菌株第113-114页
   ·工具酶与试剂第114页
   ·病毒纯化与基因组提取第114页
   ·引物设计与同源重组臂的PCR扩增第114-115页
   ·转移载体的构建第115-117页
   ·重组病毒拯救与噬斑纯化第117页
   ·重组病毒vZJ01-GFP△gE/gI株BAC的克隆与鉴定第117页
   ·pZJ01遗传稳定性第117页
   ·gE/gI基因缺失病毒vZJ01△gE/gI的构建与鉴定第117-118页
   ·无痕恢复病毒vZJ01gE/gI-R的构建与鉴定第118页
   ·病毒体外增殖特征测定第118-119页
   ·小鼠攻毒试验第119页
   ·家兔攻毒试验第119页
   ·仔猪攻毒试验第119-121页
   ·统计学分析第121页
  2 结果第121-130页
   ·中间载体构建与鉴定第121-122页
   ·转移载体构建与鉴定第122页
   ·vZJ01-GFP△gE/gI重组病毒拯救与纯化第122-123页
   ·PRV ZJ01 BAC克隆的筛选与鉴定第123-124页
   ·PRV ZJ01 BAC克隆的遗传稳定性鉴定第124-125页
   ·gE/gI基因缺失病毒vZJ01△gE/gI的构建与纯化第125页
   ·无痕恢复病毒vZJ01gE/gI-R的构建与纯化第125-126页
   ·重组病毒空斑形态观察第126页
   ·病毒生长曲线第126-127页
   ·小鼠攻毒试验结果第127页
   ·家兔攻毒试验结果第127-128页
   ·猪体攻毒试验结果第128-130页
  3 讨论第130-131页
  参考文献第131-133页
  abstract第133-134页
 第六章 猪伪狂犬病病毒超强毒ZJ01 gE/gI基因缺失株灭活疫苗免疫保护作用第134-146页
  摘要第134-135页
  1 材料与方法第135-137页
   ·病毒与细胞第135页
   ·试剂第135页
   ·疫苗的准备第135页
   ·仔猪免疫保护试验第135-136页
   ·PRV ELISA抗体的检测第136页
   ·PRV中和抗体的检测第136页
   ·鼻腔排毒的检测第136页
   ·脏器组织中PRV病毒载量的检测第136页
   ·病理学观察第136-137页
   ·统计学分析第137页
  2 结果第137-141页
   ·疫苗安全性第137页
   ·免疫抗体测定结果第137-138页
   ·攻毒保护试验结果第138-141页
  3 讨论第141-143页
  参考文献第143-144页
  abstract第144-146页
全文总结第146-148页
致谢第148-150页
发表论文第150页

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