| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-21页 |
| ·CPV病毒的基本特征 | 第11-13页 |
| ·病毒的分类和结构 | 第11-12页 |
| ·CPV的分子生物学特征及致病性 | 第12页 |
| ·CPV-2 的起源和进化 | 第12-13页 |
| ·CPV的诊断方法 | 第13-16页 |
| ·临床症状判断 | 第13-14页 |
| ·病原学诊断 | 第14页 |
| ·免疫学诊断 | 第14-15页 |
| ·核酸诊断 | 第15-16页 |
| ·CPV疫苗的种类 | 第16-19页 |
| ·灭活疫苗 | 第16页 |
| ·弱毒疫苗 | 第16-17页 |
| ·基因工程疫苗 | 第17-19页 |
| ·本课题研究的目的和内容 | 第19-21页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第21-37页 |
| ·载体、菌株及生物材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21页 |
| ·常用试剂配制 | 第21-24页 |
| ·CPV-NY株的分离鉴定 | 第24-29页 |
| ·F81细胞的培养 | 第24页 |
| ·病料的采集和处理 | 第24页 |
| ·病料的PCR检测 | 第24-26页 |
| ·CPV病毒在F81细胞中的增殖动态 | 第26-27页 |
| ·CPV分离株的不同培养方法培养及其病毒TCID50测定（组织半数感染量） | 第27-28页 |
| ·CPV-NY-VP2基因的克隆及序列分析 | 第28-29页 |
| ·CPV-NY株的VP2基因的原核表达及反应原性鉴定 | 第29-31页 |
| ·VP2基因的扩增及重组原核表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·VP2基因的诱导表达与鉴定 | 第30-31页 |
| ·VP2基因的表达条件的优化 | 第31页 |
| ·CPV-NY-VP2蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第31-33页 |
| ·CPV VP2蛋白多克隆抗体的制备 | 第31-32页 |
| ·VP2多克隆抗体与病毒的反应活性 | 第32页 |
| ·VP2多克隆抗体滴度的测定 | 第32页 |
| ·VP2多克隆抗体检测病毒滴度的测定 | 第32-33页 |
| ·血清中和试验 | 第33页 |
| ·研制一种犬细小病毒IgG抗体检测试剂盒 | 第33-37页 |
| ·IPMA抗体检测反应板的制备 | 第33-34页 |
| ·IPMA操作程序 | 第34-35页 |
| ·检测试剂盒的组装及批内批间重复性试验 | 第35-36页 |
| ·保存期试验 | 第36页 |
| ·IPMA试剂盒对临床血清的检测 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-58页 |
| ·CPV-NY株的分离鉴定 | 第37-46页 |
| ·病料的PCR检测 | 第37页 |
| ·病毒的分离培养 | 第37-38页 |
| ·CPV分离株在F81细胞中的增殖动态 | 第38-39页 |
| ·CPV分离株的不同培养方法培养及病毒TCID50测定 | 第39-40页 |
| ·CPV-NY-VP2基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pMD18-T-CPV-VP2酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·CPV-NY-VP2基因序列分析 | 第42-46页 |
| ·犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定 | 第46-51页 |
| ·CPV VP2基因的扩增与pET28a-CPV-VP2重组表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·CPV-VP2蛋白的诱导表达与鉴定 | 第47-49页 |
| ·诱导条件的优化 | 第49-51页 |
| ·CPV VP2蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第51-55页 |
| ·VP2蛋白多克隆抗体与病毒的反应活性 | 第51页 |
| ·VP2多克隆抗体滴度的测定 | 第51-52页 |
| ·VP2多克隆抗体用于病毒滴度的测定 | 第52-54页 |
| ·血清中和实验 | 第54-55页 |
| ·研制一种CPV IgG抗体检测试剂盒 | 第55-58页 |
| ·IPMA检测试剂盒的批内批间重复试验 | 第55页 |
| ·IPMA保存期试验 | 第55-56页 |
| ·IPMA试剂盒对临床血清的检测 | 第56-58页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第58-60页 |
| ·CPV-NY株的分离鉴定 | 第58页 |
| ·犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定 | 第58-59页 |
| ·CPV VP2蛋白多克隆抗体的制备与鉴定 | 第59页 |
| ·研制一种CPV IgG抗体检测试剂盒 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-67页 |
| 附录A：质粒图谱 | 第64-66页 |
| 附录B：攻读学位期间获得研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
