| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 研究背景综述 | 第11-21页 |
| ·植物寄生线虫的危害 | 第11页 |
| ·病原线虫侵染植物的分子机制研究 | 第11-12页 |
| ·植物寄生线虫的防治方法 | 第12-17页 |
| ·农业防治 | 第13页 |
| ·物理防治 | 第13-14页 |
| ·化学防治 | 第14-15页 |
| ·生物防治 | 第15-17页 |
| ·杀线虫细菌侵染线虫的过程 | 第17页 |
| ·侵染线虫相关酶类的作用研究进展 | 第17-18页 |
| ·芽孢杆菌防治线虫的优势 | 第18页 |
| ·杀线虫芽孢杆菌B16简介 | 第18-19页 |
| ·杀线虫芽孢杆菌B16的分离及杀线活性 | 第18-19页 |
| ·杀线虫芽孢杆菌B16的侵染机制 | 第19页 |
| ·芽孢与侵染机制的关系 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 B16的GFP组成型表达突变株B16g的构建 | 第21-35页 |
| ·前言 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第22页 |
| ·实验用培养基和溶液 | 第22页 |
| ·实验主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·线虫的培养及无菌线虫的获得 | 第22页 |
| ·实验方法与步骤 | 第22-31页 |
| ·GFP组成型表达载体p MG的构建 | 第22-29页 |
| ·B16的GFP组成型表达突变株B16g的获得 | 第29-30页 |
| ·B16g-22和野生型B16生长曲线的测定 | 第30-31页 |
| ·B16g和野生型B16吸引线虫能力比较 | 第31页 |
| ·B16g和野生型B16的杀线虫能力比较 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-34页 |
| ·目的片段Mre B的序列分析 | 第31-32页 |
| ·组成型表达载体p MG双酶切验证 | 第32页 |
| ·B16g荧光检测及稳定性检测 | 第32-33页 |
| ·B16g-22和B16生长速度的比较 | 第33页 |
| ·B16g-22和野生型B16吸引线虫能力比较 | 第33-34页 |
| ·B16g和野生型B16的杀线虫能力比较 | 第34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第三章 B16g转座子随机突变文库的构建与筛选 | 第35-41页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第35-36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·B16g转座子随机突变文库的构建 | 第36-37页 |
| ·B16g-22转座子随机突变文库杀线虫活性的初筛 | 第37页 |
| ·B16g-22转座子随机突变文库杀线虫活性的复筛 | 第37页 |
| ·B16g-22转座子随机突变株的鉴定 | 第37页 |
| ·实验结果与分析 | 第37-40页 |
| ·B16g-22g转座子突变文库的获得 | 第37页 |
| ·B16g-22转座子随机突变株杀线虫活性的初筛 | 第37-39页 |
| ·B16g-22转座子随机突变株杀线虫活性的复筛 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 突变子突变基因的克隆 | 第41-48页 |
| ·前言 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·突变子基因组的提取 | 第41-42页 |
| ·突变子全基因组酶切 | 第42页 |
| ·酶切产物的回收 | 第42页 |
| ·酶切产物自连 | 第42页 |
| ·连接产物的回收 | 第42页 |
| ·反向PCR扩增连接产物 | 第42-44页 |
| ·实验结果与分析 | 第44-46页 |
| ·突变子全基因组酶切 | 第44页 |
| ·反向PCR片段序列在NCBI数据库中同源性比对结果 | 第44-46页 |
| ·候选基因的扩增 | 第46页 |
| ·小结 | 第46-48页 |
| 第五章 插入突变子PA31的侵染活性分析 | 第48-52页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验菌株 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·PA31和B16g-22对线虫吸引能力的比较 | 第48-49页 |
| ·PA31和B16g-22对线虫定殖能力的比较 | 第49页 |
| ·PA31和B16g-22杀线虫能力比较 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·PA31和B16g-22对线虫吸引能力的比较 | 第49-50页 |
| ·PA31和B16g-22对线虫定殖能力的比较 | 第50页 |
| ·PA31和B16g-22杀线虫能力比较 | 第50-52页 |
| 第六章 讨论与展望 | 第52-55页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 附录A: 常见培养基及其配方 | 第59-60页 |
| 附录B: 主要试验用生化试剂 | 第60-61页 |
| 附录C: 主要实验仪器 | 第61-62页 |
| 附录D: 攻读学位期间获得的科研成果 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
