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黄花蒿ALDH1启动子的克隆及其功能分析

摘要第1-9页
abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-21页
   ·黄花蒿简介第11页
   ·疟疾第11-12页
   ·青蒿素第12-14页
     ·青蒿素的理化性质第12页
     ·青蒿素药理性质第12-13页
     ·青蒿素合成、分泌、存储场所——腺毛体第13-14页
     ·青蒿素衍生物第14页
   ·青蒿素生物合成代谢途径及关键酶第14-17页
   ·青蒿素含量的影响因素第17-18页
   ·利用生物技术改变黄花蒿中青蒿素的含量第18-21页
     ·超量表达青蒿素代谢途径中的单基因对青蒿素含量的影响第18页
     ·超量表达青蒿素代谢途径中的多基因对青蒿素含量的影响第18页
     ·抑制代谢途径中竞争支路关键基因的表达对青蒿素含量的影响第18-19页
     ·转录因子对青蒿素含量的影响第19页
     ·微生物技术生产青蒿素第19-21页
第二章 绪论第21-25页
   ·研究目的与意义第21-22页
   ·研究范围和内容第22-23页
   ·研究技术路线第23-25页
第三章 材料与方法第25-45页
   ·实验材料第25-28页
     ·植物材料第25页
     ·菌株和质粒第25页
     ·仪器和设备第25-26页
     ·试剂盒和酶第26页
     ·自配试剂第26-28页
   ·常规方法与步骤第28-36页
     ·DNA、RNA提取第28-30页
     ·cDNA第一链的合成第30页
     ·引物设计第30-31页
     ·荧光定量引物最适退火温度筛选第31-32页
     ·qPCR扩增体系及反应条件第32页
     ·目的条带的回收第32-33页
     ·目的片段与克隆载体以及表达载体的连接第33-34页
     ·大肠杆菌及农杆菌感受态细胞的制备及转化第34-35页
     ·质粒抽提第35页
     ·重组子的鉴定及测序第35-36页
   ·ALDH1启动子克隆与拟南芥的组织定位第36-41页
     ·黄花蒿ALDH1启动子克隆第36-38页
     ·生物信息学分析第38页
     ·载体构建第38-40页
     ·拟南芥稳定转化第40页
     ·拟南芥阳性植株的筛选第40-41页
     ·拟南芥阳性苗的鉴定第41页
     ·GUS染色组织定位第41页
   ·用激素和伤害处理黄花蒿和转基因拟南芥第41页
   ·双荧光素酶活性分析与Aa ALDH1启动子作用的转录因子第41-45页
     ·烟草的培养第41页
     ·双荧光素酶分析载体的构建第41-42页
     ·双荧光素酶活性分析第42-45页
第四章 结果与分析第45-53页
   ·ALDH1基因启动子序列的获得及顺式作用元件分析第45-47页
     ·ALDH1基因启动子序列的获得第45页
     ·Aa ALDH1启动子序列分析第45-47页
   ·黄花蒿ALDH1基因在MeJA和伤害处理下的表达模式第47-48页
   ·转基因拟南芥在MeJA和伤害处理下GUS基因的表达模式第48-49页
   ·转基因拟南芥GUS染色组织定位第49-50页
   ·与启动子结合的转录因子第50-53页
第五章 结论与展望第53-55页
   ·结果与讨论第53页
   ·展望第53-55页
参考文献第55-63页
附录第63-67页
 附录 1:常用抗生素以及细菌培养基的配置第63-64页
 附录 2:MS培养基配方第64-65页
 附录 3: 缩略词表第65-67页
攻读硕士学位期间发表的论文第67-69页
致谢第69页

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